快速筛选法测定碎牛肉中的防腐剂——亚硫酸盐、苯甲酸盐、山梨酸盐及抗坏血酸盐

出处：按学科分类—工业技术 中国轻工业出版社《食品添加剂分析检验手册》第327页（2458字）

1．原理

本法介绍检测大量碎牛肉中4种常用的防腐剂，制备1份样品溶液，分若干等分进行各项检测。亚硫酸盐用酸脱色过的副品红比色法测定，抗坏血酸用2，6－二氯靛酚滴定，苯甲酸和山梨酸用紫外吸光法测定。本法能迅速选出阴性样品(不含防腐剂的样品)，而对阳性样品(含防腐剂的)能定量测定防腐剂。

2．试剂和溶液

2．1 萃取溶液 溶解200g偏磷酸和100mL亚磷酸于约700mL水中，并稀释至1L，贮于冰箱中备用，保存2周。

2．2 25mg／100mL2，6－二氯酚靛酚溶液 溶解25mg2，6－二氯酚靛酚于100mL含有26mg硫酸氢钠的热溶液中，冷却后定容至100mL，过滤后，装于棕色瓶内，贮于冰箱中，每星期至少标定1次。

标定方法：取5mL新鲜配制的标准抗坏血酸溶液，加5mL1%草酸，用上液滴定至粉红色于15s内不消失为终点。

2．3 1mg／mL抗坏血酸溶液 溶解100mg美国药典规格的抗坏血酸于100mL萃取液中，临用前配制。

2．4 3mg／mL苯甲酸钠溶液 溶解300mg苯甲酸钠于100mL萃取液中。

2．5 1．5mg／mL山梨酸钾溶液 溶解150mg山梨酸钾于100mL萃取液中。

2．6 紫外参比溶液 将30mL溶液与50mL乙醇，20mL水混合。

2．7 酸脱色的副品红溶液 置100mg盐酸副品红和200mL水于1000mL容量瓶中，加160mL盐酸(1：1)，并稀释至刻度。放置12h，吸此液20mL，用水稀释至100mL。

2．8 四氯高汞钠 称取23．4g氯化钠和54．3g氯化高汞于2L容量瓶中。溶解于约1900mL水中，并稀释至刻度。

2．9 15mg／100mL甲醛溶液 取2mL福尔马林，用水稀释至100mL。吸取此液2mL，用水稀释至100mL。

2．10 3mg／mL亚硫酸钠溶液 溶解300mg亚硫酸钠于100mL萃取液中。

3．测定方法

3．1 样液的制备 称取30g碎牛肉置于200mL烧杯中，加30mL萃取液(逐次加入)，掺入肉中。加50mL乙醇，充分搅拌，放置10min，时间不要太长。倾倒溶液通过湿润过的15cm折叠的滤纸，使大部分固体留在烧杯中。弃去最初的数毫升滤液，从收集的最初10mL中取出1份进行亚硫酸盐的测定。

3．2 亚硫酸盐的测定 吸取5mL副品红溶液和2mL四氯高汞钠，置于200mm试管中。加入2mL样品溶液，接着加10mL甲醛溶液，混合后放置30min。如果显出紫色，于波长550nm处对照试剂空白(以2mL水代替样品溶液)测定吸光度。从标准曲线上查出相应的样品中亚硫酸钠的百分数。

亚硫酸盐标准曲线的绘制：称取每份30g纯净碎牛肉样品共6份，置于6个烧杯中，分别加入1mL，2mL，3mL，4mL，5mL，6mL亚硫酸盐溶液，接着加入足量的萃取溶液至30mL，各加50mL乙醇，混合并过滤，便得到亚硫酸盐标准液。按亚硫酸盐的测定中所述，分别取2mL进行显色，以在波长550nm处测得的吸光度对肉中亚硫酸的浓度(在0．01～0．06之间)绘制标准曲线。

3．3 苯甲酸盐及山梨酸盐的测定 吸取5mL样品液，置于50mL具玻璃塞量筒中，加石油醚至刻度，振摇1min。同样将5mL紫外参比溶液和45mL石油醚一起振摇配成参比萃取液，如果样品萃取液在波长225nm和250nm处显吸收峰，对照参比萃取液在波长300nm和200nm之间的扫描，对苯甲酸和山梨酸的特征吸收曲线作校核。如果由曲线验证有苯甲酸存在，则在波长225nm处测其吸光度，并从标准曲线上找出相应的苯甲酸钠在样品中的百分数。同样如果验证有山梨酸存在，则在波长250nm处测其吸光度，并从山梨酸标准曲线上找出相应的山梨酸钾在样品中的百分数。

苯甲酸盐和山梨酸盐标准曲线的绘制：称取每份30g纯净的碎牛肉样品共12份，分别置12个烧杯中，于前6个烧杯中分别加入1mL，2mL，3mL，4mL，5mL，6mL苯甲酸盐溶液，于后6个烧杯中分别加入同量的山梨酸盐溶液。再于每个烧杯中加入定量的萃取液至30mL，接着加50mL乙醇，混合后过滤，便得到苯甲酸盐和山梨酸盐标准溶液。各取5mL，并按“苯甲酸盐和山梨酸盐测定”中所述进行。以测得的吸光度对肉样中苯甲酸钠浓度(0．01%～0．06%)和山梨酸钾浓度(0．005%～0．030%)绘制标准曲线。

3．4 抗坏血酸的测定 加1mL靛酚溶液于25mL样液中。如果靛酚变成粉红色，并持续10s不褪色，则表明未添加抗坏血酸。如果靛酚脱色，则用靛酚继续滴至粉红色为终点。再将用作限度试验的1mL靛酚加到滴定管读数上。

4．分析结果的表述