玉米同工酶电泳鉴定法

出处:按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农作物品种鉴定手册》第213页(1737字)

据我们和美国先锋种子公司等单位的研究,玉米种子和幼苗的过氧化物酶、酯酶和脱氢酶的同工酶图谱在品种间存在差异。

据李继耕等(1980)研究,玉米过氧化物酶同工酶电泳图谱主要有四种类型:互补型(杂种带有来自父本和母本的酶带)如7487788×G4040-5550;杂种型(杂种具有两亲所没有的杂种酶带)如埃1278C×塘四平头和风白29B×GB5);其他差异型(杂种与亲本有差异,但这种差异不同于互补型和杂种型);无差异型(杂种与亲本无差异),如W64AO2×A619O2等。按照前三种图谱就可区分品种。

从目前国内外研究资料看,以幼苗芽鞘同工酶电泳鉴定结果最为可靠和快速。其鉴定方法是先准备砂床,播上50-100粒种子,放在25-30℃培养3-5天,剥下芽鞘,分别放入研钵,每个芽鞘放入一个研钵。分别加入3-5滴20%蔗糖缓冲提取液,充分研磨成匀浆,然后经3000-5000转/分钟离心10分钟。每个样品加样30-50μl,用7%聚丙烯酰胺凝胶电泳2-2.5小时,然后再进行显色,按电泳图谱区分异品种,计算品种纯度百分率。

【参考文献】:

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