染色体检查
出处：按学科分类—医药、卫生 上海科学技术文献出版社《新编妇产科临床诊疗手册》第295页（2121字）
一、外周血染色体检查
(1)将0．2～0．5ml含有肝素的全血加入贮有5ml培养液的容积为15ml的培养瓶内，轻摇均匀后，放入37℃恒温箱内培养72h。常用培养基为RDMI1640、TC199、HamF10或HamF12。取上述任何一种培养液4ml，与小牛血清1ml，青霉素及链霉素各100μg／ml，植物血球凝集素0．2ml混合，调pH值至7．0～7．4。
(2)终止培养前2～4h在培养瓶内加入秋水仙素溶液0．05～0．1ml(40μg／ml)，轻轻摇匀，继续37℃培养。
(3)终止培养后用吸管吸去上清液，留培养液0．5ml。加入低渗液(0．075mmol／LKCl液)6ml，用吸管轻轻吹打，使成细胞悬浮液。将此液移入离心管，在37℃处理15～20min。
(4)以1000r／min速度离心7min。
(5)吸去离心管内上清液，留0．5ml；加入新配置的固定液3ml(甲醇∶冰醋酸=3∶1)，静置15min后再用吸管吹打均匀，再静置15min。
(6)以1000r／min速度离心7min后，吸去上清液，加固定液1ml，放在4℃冰箱内过夜或在离心及吸去上清液后再加固定液3ml，吹打成细胞悬液后，静置30min。然后再以1000r／min速度离心7min。
(7)将离心管中上清液吸去，留0．1～0．3ml，用吸管吹打成细胞悬浮液。取此液2～3滴置于干或湿的冷冻载片上，用口吹玻片使细胞分散。置玻片于空气中干燥，或在微火上烘干。
(8)用Giemsa染液浸满载玻片，染色0．5～1h，倾倒染液，用蒸馏水冲洗1次。
(9)待玻片干燥后，如需要，可用中性树胶加盖片封固。
(10)用光镜按低倍、高倍、油镜顺序观察分析。找到良好分散的中期分裂象，作显微摄影，供作核型分析。
二、羊水细胞染色体检查
(1)将穿刺所得的羊水离心5min(800～1000r／min)。在接种罩内进行接种，先吸出上清液留送其他检查，剩下0．5ml羊水在离心管内，打匀沉淀在管底的羊水细胞，使成悬浮液，分别接种入2～3瓶盛有HamF10或HamF12培养液的培养瓶中，置CO2培养箱内进行培养。
(2)接种5～7d后，有活力的羊水细胞就贴壁生长，可倒置在显微镜下观察。如已贴壁生长，以后每2～3d换培养液1次，当细胞生长旺盛时(一般为培养14～20d左右)即可准备收获。
(3)制片当天加秋水仙素(同“外周血染色体检查”)。
(4)将培养瓶中的培养液倒入离心管内，在培养瓶底放入0．02%EDTA胰酶消化液0．5ml，轻摇3～5min，使贴壁细胞消化脱落(亦可用玻璃吸管尖端轻吹瓶壁，帮助细胞脱落)。将细胞脱落下来形成的细胞悬液倒入离心管，离心5min(800～1000r／min)吸去上清液，留1ml于管底。
(5)以后低渗、固定、制片同“外周血染色体检查”。
三、绒毛直接法制备染色体检查
(1)取得标本后，置入D-HanKs溶液(或RPMI1640或TC199)中，pH值为7．0～7．2。
(2)用含10%小牛血清及含有最终浓度为0．1～0．4μg／ml秋水仙素，pH值为7．0～7．2的RPMI1640培养1h。
(3)用预温到37℃的1%～1．5%柠檬酸钠3ml，低渗处理20～35min。
(4)往低渗液中加入新配置的甲醇∶冰醋酸(3∶1)固定液1～2ml，至少固定30min以上。
(5)吸去固定液，顺管壁缓慢加入60%醋酸1ml以离解细胞。2～3min后缓慢加入2ml甲醇，随即离心8～10min(1500～2000r／min)。
(6)换入新固定液3～5ml，固定1～2h。
(7)冰片滴片，并立即送入80℃烤箱内烤2h以上，再作显带处理。