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三点试验

书籍:方法大辞典

出处:按学科分类—自然科学总论 山东人民出版社《方法大辞典》第135页(987字)

在包括三对基因的一次杂交中,确定三个非等位连锁基因在染色体上的排列顺序及相对距离的方法,称为三点测交,简称三点试验。

这是基因定位的经典方法,由摩尔根的学生斯蒂文特于1913年所首创。

1900年孟德尔遗传定律被重新发现,萨顿和鲍维尔于1903年提出遗传的染色体学说,认为基因是位于染色体上。

但直到1910年摩尔根发现了果蝇白眼性状的伴性遗传之后,才把某一特定基因与特定的染色体联系起来,第一次用实验证明了基因位于染色体上的假说,并证实在同一染色体上的基因有连锁现象。确定染色体上许多相互连锁的基因间的距离和位置的基本方法是:求得这些基因的重组频率,并以之作为基因间的距离单位作图。

按斯特蒂文特的规定把杂交子代中出现1%重组体的两个基因间的距离定为一个图距单位,或称为一个分摩。例如,在黑腹果蝇的x染色体上有3个突变基因,分别为白眼基因w(野生型为红眼w)、黄体基因y(野生型为灰体y)和短翅基因m(野生型为长翅M)。

将具有上述三突变基因的雌蝇()与野生雄蝇(wym或写成+++)杂交,然后再将杂交子代中的雌性杂合体()与三隐性雄蝇测交。由于三隐性雄蝇所产生的配子内或带有具三隐性基因的x染色体,或带有不具相应等位基因的y染色体,因此三杂合体雌蝇所产生的各种配子同三隐性雄蝇所产生的配子相结合时,雌蝇各配子的比例就能由测交子代的表型比数上如实地反映出来。

三点测交的结果

分别计算上述测交子代中各种类型的个体数,求得三个基因间的重组频率:

得到的这些重组值去掉%后,就可用作为两个基因在遗传学图上的图距,把它们彼此间的位置和顺序确定下来。如wym在染色体上的相对位置如下:

一次三点试验可以确定三个基因的排列次序和相对距离,通过多次三点试验就可以把许多基因的排序和相对距离确定下来,绘成基因的连锁图。

三点试验判断基因顺序是很可靠的。这个方法还可用来研究交叉干涉、染色单体干涉等现象。

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