20%胆汁(或2%胆盐)刺激生长试验

出处:按学科分类—医药、卫生 中国科学技术出版社《临床厌氧菌检验手册》第93页(770字)

1.原理 胆汁能抑制许多厌氧菌的生长,因为胆盐可降低细胞膜的表面张力,从而损伤其细胞膜。但有的厌氧菌含有胆盐分解的酶类,能利用胆汁作为营养物质,故生长旺盛。

2.方法 分为试管法和纸片法(质控以脆弱类杆菌ATCC 25285为准)。

(1)试管法:将待检细菌以相同的菌量接种至含20%胆汁的BHI培养基和不含胆汁的BHI的对照管,或用2%胆盐BHI试验也可。

结果判断:胆汁的BHI管生长旺盛为阳性,刺激生长;胆汁BHI管不生长为阴性,抑制生长。不含胆汁BHI管为对照,多为一般生长记为+。

(2)纸片法:取胆粉250mg,磷酸氢二钠7.6mg,磷酸二氢钾1.8mg,蒸馏水0.5mg,混匀后,加入100mm直径的滤纸1片,浸入上述溶液中,吸干溶液后,晾干,置干燥缸内保存备用。

将含菌量为108CFU/ml滴于BHI血平板上0.1ml,用灭菌L棒涂匀,贴上含牛胆粉纸片1张,37℃培养24~48小时。

结果判断:纸片周围长满细菌者为胆汁刺激生长或耐胆汁。纸片周围有1mm以上的抑菌环者,则为胆汁试验抑制菌生长。

3.意义 刺激生长的主要脆弱类杆菌中的脆弱、普通、吉氏、卵形类杆菌和内脏类杆菌。而多形、单形、埃氏类杆菌较大量生长;腐败类杆菌、小梭形类杆菌、超巨类杆菌在胆汁中能生长,锐利类杆菌和凝固类杆菌对胆汁敏感,生长不定。其他菌多被胆汁抑制生长。

分享到: