快速装置简介

出处:按学科分类—医药、卫生 中国科学技术出版社《临床厌氧菌检验手册》第155页(1517字)

各种快速装置的原理都是一样的,但所用底物种类和数量不同。多种装置所采用的底物大部分为两类:其一为改良的常规底物,用以测定吲哚产生、糖发酵反应和过氧化氢产生等;其二为人工合成底物,如测定糖苷酶活性就是用对硝基苯结合至各种糖上形成无色的糖苷为底物,经酶水解释放黄色的对硝基酚,测定氨其肽酶,磷酸酶活性亦是以人工合成化合物为底物。此外,各种装置在菌液稀释、浓度以及结果判定方法上也存在一些差异。

1.VPI-ZYM系统 是一种半定量微量法,由20个小壳斗组成,其中一个为空白对照,另19个中含有脱水产色底物,可检测以下19种预成酶反应:碱性磷酸酶、脂酶(C-4)、复合脂酶(C-8)、脂酶(C-14)、亮氨酸氨基肽酶、缬氨酸氨肽酶、半胱氨酸氨酞酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶、酸性磷酸酶、磷酸脱氢酶、α-半乳糖苷酶、β-半乳糖苷酶、β-葡萄苷酸酶、α-葡萄糖苷酶、β-葡萄糖苷酶、N-乙酰-β-葡萄糖胺酶、α-甘露糖苷酶和α-岩藻糖苷酶。本系统配有一个标准颜色反应图表,各种反应根据空白孔和颜色图表分成0~5级,从而表示酶活性强度。但本系统没有可供即刻鉴定的数据库。

2.aN-ident系统 本系统有两排各10个小壳斗,每斗中含有一种脱水底物,可以检测色氨酸酶,N-乙酰葡萄糖苷酶,α-阿拉伯糖苷酶,β-葡萄糖苷酶,α葡萄糖苷酶,α-岩藻糖苷酶,磷酸酶、α-半乳糖苷酶,β-半乳糖苷酶,醋酸吲哚酸、精氨酸酶、亮氨酸氨肽酶、脯氨酸氨肽酶、焦谷氨酸芳基胺酶、酪氨酸氨肽酶、精氨酸氨肽酶、丙氨酸氨肽酶、组氨酸氨肽酶、苯丙氨酸氨肽酶、甘氨酸氨肽酶、过氧化氢酶,总共21种生化反应。加菌液在35℃培养4小时后,不需加试剂即可出现适当颜色改变的反应,可直接判定结果。色氨酸酶反应需加Kovas试剂,过氧化氢酶需在葡萄糖苷酶孔中加30%双氧水,氨基肽酶需加肉桂醛试剂才能判定颜色反应,然后依据说明书解释结果。试验结果用一个7位数值的编码表示,按an-ident分析图解索引做出菌种鉴定。

3.RapID-ANA系统 此系统由10孔塑料盘组成,可检测18种生化反应,碱性磷酸酶、亮氨甘氨酸氨肽酶、β-半乳糖苷酶、苯丙氨酸氨肽酶、α-半乳糖苷酶、精氨酸氨肽酶、α-葡萄糖苷酶、脯氨酸氨肽酶、β-葡萄糖苷酶、甘氨酸氨肽酶、α-岩藻糖苷酶、丝氨酸氨肽酶、N-乙酰葡萄糖胺酶、吡咯烷酮基氨肽酶、三苯四氮唑还原酶、精氨酸酶、色氨酸酶等。菌液用孵育液配制,35℃培养4小时后,需在色氨酸孔加入肉桂醛试剂,氨基肽酶反应孔加“RapID-ANA”试剂后观察结果,各个反应按指定数值升分,即得一个6位数编码,查阅数据库手册做出鉴定。

4.ANI鉴定卡 本卡为一种铸型塑料卡,由30孔组成,包含一个空白孔和28个生化试剂孔,检测如下反应:磷酸酶、磷酸胆碱酶、β-半乳糖苷酶、α-半乳糖苷酶、β-葡萄糖苷酶、α-葡萄糖苷酶、β-葡萄糖苷酸酶、β-乳糖苷酶、α-甘露糖苷酶、α-岩藻糖苷酶、β-岩藻糖苷酶、β-木糖苷酶、α-阿拉伯糖苷酶、N乙酰葡萄糖胺酶、N-苯甲酰精氨酸氨肽酶、亮氨酸氨肽酶、脯氨酸氨肽酶、丙氨酸氨肽酶、赖氨酸氨肽酶、γ-谷氨酰氨肽酶、三苯四氮唑还原酶、精氨酸酶、尿素酶、葡萄糖、海藻糖、阿拉伯糖、密三糖和木糖发酵。ANI鉴定卡自动化程度很高,试验者只需进行革兰氏染色和吲哚试验,阴性和阳性结果判定和解释均由电子计算机完成。

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