补体结合实验

出处：按学科分类—自然科学总论 山东人民出版社《方法大辞典》第209页（888字）

根据补体对抗原——抗体复合物的结合以及抗原、抗体和补体混合物中补体活动的消失，作为对抗原或抗体的一种试验，而称之。

是血清学技术中较为敏感的实验，应用于流行性病学的调查、病毒学疾病的临床诊断、疫苗使用后人体抗体水平的调查、检测病毒抗原等。

补体结合实验分为两个系统：(1)结合系统，抗原与抗体形成复合物，则补体与其结合，无抗原、抗体复合物，补体则呈散离状态。(2)指示系统，在补体结合反应系统中，补体与抗原、抗体复合物结合与否肉眼是观察不到的，必须添加指示系统，试验中常以补体在体外适宜条件下，能溶解致敏的红细胞这一生物学效应，应用羊血球、溶血素和补体反应作为指示系统。溶血素和红血球结合后，只有在补体单独存在的情况下才能溶血，这样可根据溶血与否，查知反应系统中有无游离的补体存在，从而得知有何抗原、抗体反应。

补体结合实验反应系统中，(1)抗原是指组织培养感染性的活病毒或死病毒以及病原体的某些成分。(2)抗体是病人恢复期血清，抗原免疫动物的高效价免疫血清。

(3)补体是存在于哺乳动物或低等动物中的一类血浆蛋白质的物质。(4)红血球来源于绵羊红细胞。

(5)溶血素是绵羊红细胞免疫于家兔后抗绵羊红细胞的免疫血清。实验过程一般是将抗原，抗体、补体、溶血素等进行预备实验，测定出各自的效价以及在反应系统中的各自配比，然后混合于一定温度，一定时间内进行反应，观察溶血现象。根据以上原理，实验可能出现以下三种情况：(1)抗原与相应抗体形成复合物，补体与其结合，无游离补体存在，溶血素不能溶解羊红血球，出现不溶血现象，结果是阴性。(2)抗原存在，相应抗体缺少，无抗体，抗原复合物，补体不与其结合呈游离状态，羊血球在补体存在的条件下被溶血素溶解，呈溶血现象，结果是阳性。

(3)抗体存在，缺少相应的抗原，补体不与其结合呈游离状态，羊血球在补体存在的条件下，被溶血素溶解，呈溶血反应，结果也是阳性。定量分析，可用分光光度计以测定OD值判断溶血程度。