重组DNA技术
书籍:农业大词典
更新时间:2018-12-08 22:06:14
出处:按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农业大词典》第208页(379字)
又称基因工程。
将体外重组的DNA分子导入原核或真核细胞中增殖和表达的技术。重组DNA技术中应用的载体大多是经过改造的质粒或温和噬菌体。1972年美国伯格(P.Bery)等将病毒SV40的DNA与噬菌体P22的DNA连接在一起,构成第一批重组DNA分子;1973年美国科恩(N.Cohen)将不同的外源DNA插入质粒PSC101中,并导入大肠杆菌中,开创了遗传工程的研究。重组DNA技术通常分4个步骤:①取得重组DNA片段;②DNA片段和载体连接;③将重组DNA分子导入宿主细胞;④通过遗传学、免疫学或分子杂交方法选出含有所需要的重组DNA分子的宿主细胞。在构建重组DNA分子和选择宿主细胞时,要求外源基因在宿主细胞中必须能准确地转录和转译,所产生的蛋白质在宿主细胞中不被分解,要使外源基因能在宿主细胞中表达。