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激素放射免疫测定

书籍:农业大词典 更新时间:2018-12-09 07:35:02

出处:按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农业大词典》第744页(519字)

将同位素放射测量与免疫反应原理相结合的方法。

其基本原理是用高纯度的欲测定物质作抗原(Ag)对免疫,使其产生抗体(Ab)。再将抗原分成不同梯度的含量分别加入管中,另将Ag进行同位素标记(*Ag)并与Ab一起加入管中,在Ab*Ag浓度固定时,则三者结合的结果是:当Ag多时,它与Ab结合也多,而*Ag与Ab结合则少,反之亦然。可见于如下公式:*Ag+Ag+Ab*Ag·Ab+Ag·Ab+*Ag(剩余)+Ag(剩余),在仪器中测出*Ag·Ab(标记抗原与抗体结合部分),计算其结合率;绘出标准曲线。欲测定的样品也可用同法加样,只是不加Ag而加欲测定的血清或血浆,如此也可得到不同结合率,再用结合率在标准曲线上查出Ag的含量。另外,在反应之后应加入分离剂,多用葡聚糖活性碳或第二抗体以除去剩余的抗原。类固醇激素多用氚(3H)标记,放射能量低,样品制作费用高,程序较多,但标记物半衰期长,药盒可保存半年左右。

蛋白质激素多用碘标记(125I),程序简单,易测定,放射性强度大,半衰期短,药盒只能保持数天。放射免疫法为超微量定量分析法,可达10-12g或10-9g水平,是较准确和稳定的方法。

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