胸腺B细胞

出处：按学科分类—自然科学总论 北京出版社《现代科技综述大辞典上》第784页（3767字）

鸟类法氏囊，哺乳动物的胚肝、骨髓是人们公认的B淋巴细胞中央淋巴器官。

而胸腺是T淋巴细胞分化的中央淋巴器官，由胚肝、骨髓来源的前体T细胞在此分化成熟为T细胞。在胸腺内也存在少量Ig⁺B细胞(M．Inaba等，1987)，特别是患有自身免疫疾病如重症肌无力(MC)、系统红斑狼疮(SLE)病人的胸腺内存在B淋巴滤泡和大量的浆细胞(C．L．Williams和V．A．Lenmon，1986；Y．Ichikawa，1992)。在一系列自身免疫小鼠如(NZB×NZH)F₁、MRL／MP－lpr(MPL／lpr)和BXSB等也观察到类似现象。

结合现代细胞分离技术和免疫酶标检测手段，学术界对胸腺B细胞的表型、发生、功能等进行了深入研究。

Miyama-Inaba等采用65%Percoll密度梯度离心，收集介质与Percoll溶液界面之间低浮力密度胸腺细胞，再经抗－Thy－1．2，CD4，CD8加补体杀死T细胞，即可获得富含胸腺B细胞的类群(也叫低浮力密度胸腺细胞)，约占全部胸腺细胞总数的1%左右。从正常小鼠胸腺分离纯化的B细胞，其中膜表面Ig阳性(sl⁺g)细胞占低浮力密度胸腺细胞总数的3%～90%。免疫酶标检测表明，大多数胸腺B细胞表达CD5+表面抗原，而脾脏B细胞为CD5⁺用抗－CD5单抗加补体能够杀死胸腺B细胞，抗－Thy01．2，CD4，CD8等抗T细胞抗体加补体则对胸腺B细胞不产生毒害作用。尽管胸腺B细胞和腺脏B细胞都有sIg，但多数胸腺B细胞较弱地表达B220、Ia表面抗原，相对较多表达Mac－1(CD11b)和CD5(M．Inaba等，1988)，与腹腔CD5⁺B细胞特性相似(从英姿，1993)，而脾脏B细胞的表型为CD5^－、CD11b^－，对C57BL／6小鼠、年幼的NZB小鼠胸腺B细胞的研究也得到相似的实验结果。

对人类MG患者胸腺B细胞的研究报道较多。MG患者低浮力密度胸腺B细胞占全部胸腺细胞总数的0．83±0．15%(C．Leprince，等1990)，Lepri-nce等对MG患者胸腺进行免疫荧光分析，发现胸腺内具有生发中心，IgM⁺IgD⁺双阳性细胞位于生发中心边缘，处于分化过程中的IgM⁺IgD^－细胞则位于生发中心中央。

CD21单抗(抗CR2)能使大多数生发中心着色，中央部位染色最深。这表明B细胞活化过程，促进了CD21的表达。

进一步分析低浮力密度胸腺B细胞的表型，结果有63±4%CD19⁺细胞，8±2%CD35⁺细胞，并有一部分胸腺B细胞表达CD71和4F2表面抗原。用B8．7、CD23单抗染色，B8．7是B细胞活化特异抗原，(C．Y．Leprince，1988)，虽然CD23在T细胞、网状细胞表面也有表达，但这两种细胞在胸腺B细胞分离过程中被除去，结果B8．7⁺细胞占全部胸腺B细胞总数的22±4%，CD23⁺细胞则占14±5%。表明MG患者胸腺生发中心B细胞表达CD19，CD21，IgM，IgD等B细胞标志，低浮力密度胸腺B细胞则不同程度地表达B细胞活化标志，如CD71，4F2，CD23和B8．7，即MG患者胸腺B细胞有一部分为活化的B细胞。

K．Nango等(1991)收集14d小鼠胚胎低浮力密度胸腺细胞，经抗B220(6B2)、抗CD5单抗双染色分析，结果约3．5%为B220⁺细胞，B220⁺／CD5⁺细胞占0．5%，此时sIg细胞尚未观察到。

16d胚胎小鼠低浮力密度胸腺细胞含3%～10%的CD5⁺细胞，在18d胚胎也观察到类似的数量。14d、16d胚胎，B220⁺／CD5⁺细胞分别占低浮力密度胸腺细胞总数0．98%和0．64%。

A．Strasser等(1988年)证明，B细胞表面抗原B220(14．8)的表达比sIgM的表达要早，在14d胚胎胸腺就存在B220⁺／Thy－1^－细胞，而胚肝在13d胚胎才有前体B细胞出现，说明胸腺B细胞是在胸腺内分化，而不同于外周淋巴器官B细胞的发育。18d胚胎中低浮力密度胸腺细胞合有大量的B220⁺细胞，且70%的B220⁺细胞表达CD5⁺。

值得注意的是，18d胚胎胸腺B细胞类群中70%为sIgM⁺，约95%sIgM⁺细胞为CD5⁺(占全部胸腺B细胞类群的65%)。新生小鼠，90%的胸腺B细胞为sIgM⁺，且70%～80%的胸腺B细胞为CD5⁺。

与新生小鼠相比，18d胚胎的胸腺不存在CD5^－／IgM⁺细胞。CD5－B细胞是出生后由外周淋巴器官迁移而来，还是由胸腺内的CD5⁺细胞转化形成而来不清楚。

很明显，18d以后的胚胎，CD5⁺B细胞是胸腺B细胞的主要类群。胚胎胸腺CD5⁺B细胞的增殖情况与成体胸腺B细胞增殖情况相似。14d、18d小鼠胚胎胸腺中仅有少量的CD5⁺B细胞，随后胸腺CD5⁺B细胞继续增殖到成体水平。

从小鼠出生后3d到6～8周，胸腺CD5⁺B细胞的百分比保持不变，说明第18d胚胎对于胸腺B细胞和胸腺CD5⁺B细胞的分化和成熟是个重要时期。

正常小鼠胸腺B细胞特别是CD5⁺B细胞对常规B细胞有丝分裂原如LPS、或抗－IgM加IL－4不产生免疫应答。即使有LPS存在，胸腺B细胞也不分化为抗体产生细胞。

然而带有la抗原的T辅助细胞能够促使CD5^－B细胞增殖、分化为抗体产生细胞(M．Iaaba等，1990)。MG患者胸腺B细胞具有活化B细胞的表型。Leprince等检测MG患者胸腺B细胞对BCGF12kDa、rIL－2加抗－IgM的免疫反应，发现单独用BCGF12kDa就能诱导所有胸腺B细胞大量增殖。

抗B8．7抗体能够完全拮抗BCGF12kDa所诱导的正常人B细胞增殖，而对BCGF12kDa所诱导的MG患者胸腺B细胞的增殖只起部分抑制作用。由rIL－2所诱导的MG患者胸腺B细胞的增殖，结果差异很大，但都低于BCGF12kDa的诱导增殖数量，表明rIL－2还需要其它刺激因子协同诱导胸腺B细胞的增殖。不论BCGF12kDa还是rIL－2，在有抗－IgM单抗存在时，都能显着促进MG患者胸腺B细胞的增殖，表明MG患者胸腺B细胞有一部分为休止B细胞，在有生长因子存在时，可以被如抗－IgM进一步激活、诱导增殖。

其它一些因子如rIL－1，rIL－4，rIFN-a，rIFN－γ则不能诱导MG患者胸腺B细胞的增殖，即使与抗－IgM一起刺激，也仅起微弱诱导增殖作用。

胸腺对于T细胞发育的正向、负向选择起着重要的作用。在T细胞分化过程中获得了对自身MHC限制和自身抗原的耐受性。最近研究表明，对自身抗原的耐受性是由于胸腺内带有TcrvB的T细胞缺失所致，而表达MIL－1，Mts－9的小鼠则不含有V_B－3，V_β－6，V_β－1T细胞。

Molina等发现，只有B细胞表达MLs(I．J．Molina等，1988)，表明胸腺B细胞对于T细胞发育的负向选择起着重要作用。

小鼠胸腺B细胞主要是CD5⁺B细胞，Y．Hitoshi等(1990年)发现，小鼠CD5⁺B细胞能够产生IL－T，从而增强胸腺细胞对IL－2、IL－4和IL－10的增殖反应，影响胸腺中T细胞发育。

自身免疫小鼠的腹腔CD5⁺B细胞能够分泌自身抗体(从英姿，1993)。对MG患者胸腺B细胞表型、功能的研究表明，胸腺B细胞的活化状态与自身免疫反应有关。抗－乙酰胆碱受体(AChR)抗体阻断了神经与肌肉之间的信号传递是MG疾病机理(Y．Fujii等，1984)。MG患者胸腺B细胞在体外能够自发分泌Ig，特别是抗－AChR抗体，与常规B细胞相比，所分泌的抗－AChR抗体具有高度特异性。

如将rIL－2加入培养的MG患者胸腺B细胞，则提高Ig的分泌量，其中包括抗－AchR抗体。用staphA和RIL－2共同刺激MG患者胸腺B细胞，只能进一步促进Ig分泌量，而对抗－AChR抗体的产量影响不大。

用IL－2或IL－2加StaphA作为刺激因子，研究对与上述相同条件下培养的人正常B细胞的影响，结果是单独用IL－2或IL－2加StaphA都能够促进正常人B细胞Ig分泌量，但不能促进抗－AChR抗体。分泌培养上清液中地检测不到抗AchR抗体。StaphA和IL－2能够提高Ig分泌量，但不能促进MG患者胸腺B细胞抗－AChR抗体产生，说明这些抗－AChR抗体产生细胞在体内早已被激活。MG患者胸腺B细胞的表型、功能与临床症状也有相关性，具有高滴度(＞100nm)血清抗自身抗体的病人其胸腺内B细胞、B8．7⁺细胞和CD23⁺细胞等的百分比较高，受BCGF12kDa刺激，胸腺B细胞具有更高的增殖反应(C．Leprinca等，1990)。

R．R．Hardg等(1987年)研究表明，人类CD5⁺B细胞与类风湿关节炎自身抗体分泌有关，MG患者胸腺内是否有CD5⁺B细胞尚需作进一步研究。

(山东大学于士广、丛英姿撰)