食品中铜的测定方法
出处：按学科分类—工业技术 中国轻工业出版社《食品添加剂分析检验手册》第221页（7056字）
一、葡萄糖酸铜
化学名：葡萄糖酸铜(Copper Gluconate)
结构式
分子式：C12H22CuO4
相对分子质量：453．84
葡萄糖酸铜的鉴别
1．试剂和溶液
1．1 氢氧化铵。
1．2 10%亚铁氰化钾。
1．3 盐酸。
1．4 冰乙酸。
1．5 苯肼。
2．操作步骤
2．1 取本品水溶液，加入过量氢氧化铵试液，即产生蓝色沉淀后变为深蓝色溶液。
2．2 取本品水溶液，加10%亚铁氰化钾试液(新配)，即产生棕红色沉淀，不溶于稀盐酸。
2．3 取5mL温热本品水溶液，加入0．7mL冰乙酸、1mL新蒸馏苯肼，在水浴中加热30min，冷却，用玻璃棒摩擦玻璃管内壁，即生成葡萄糖酸苯肼结晶。
二、硫酸铜
化学名：硫酸铜(Cupric Sulfate；Copper Sulfate)
结构式：CuSO4·5H2O
相对分子质量：249．69
(一)鉴别方法
本品5%溶液呈铜盐反应和硫酸盐反应。
1．试剂和溶液
1．1 亚铁氰化钾。
1．2 乙酸。
1．3 氨。
1．4 氯化钡。
1．5 盐酸。
1．6 硝酸。
1．7 醋酸铅。
1．8 醋酸铵。
1．9 氢氧化钠。
2．操作步骤
2．1 硫酸盐反应。
2．1．1 取供试品溶液，加氯化钡试液，即生成白色沉淀；分离，沉淀在盐酸或硝酸中均不溶解。
2．1．2 取供试品溶液，加醋酸铅试液，即生成白色沉淀；分离，沉淀在醋酸铵试液或氢氧化钠试液中溶解。
2．1．3 取供试品溶液，加盐酸，不生成白色沉淀(与硫代硫酸盐区别)。
2．2 铜盐反应 向本品溶液中添加新配亚铁氰化钾溶液(1+10)产生红棕色沉淀。向一部分沉淀中加稀乙酸(1+20)，沉淀不溶。向另一部分沉淀中添加氨试液(40mL氯水制成100mL溶液)，沉淀溶解，溶液的颜色变深蓝。
(二)食品中铜的测定方法
1．原子吸收分光光度法原理
样品处理后，导入原子吸收分光光度计中，原子化以后，吸收324．8nm共振线，其吸收量与铜量成正比，与标准系列比较定量。
2．试剂和溶液
要求使用去离子水，优级纯或高级纯试剂。
2．1 铜标准溶液 精密称取1．0000g金属铜(99．99%)，分次加入6mol／LHNO3溶液溶解，总量不超过37mL，移入1000mL容量瓶中，用水稀释至刻度。此溶液每毫升相当于1mg铜。
2．2 铜标准使用液 吸取10．0mL铜标准溶液，置于100mL容量瓶中，加0．5%硝酸稀释至刻度。
2．3 硝酸。
2．4 6mol／L HNO3 量取38mL硝酸，加水稀释至100mL。
2．5 0．5%硝酸 量取lmL硝酸，加水稀释至200mL。
2．6 10%硝酸 量取l0．5mL硝酸，加水稀释至100mL。
2．7 过硫酸铵。
2．8 0．5%硫酸钠溶液。
2．9 石油醚。
3．仪器
原子吸收分光光度计。
4．操作方法
4．1 样品处理。
4．1．1 谷类：除去外壳，磨碎，过20目筛，混匀。称取1．0～5．0g样品，置于石英或瓷坩埚中，加5mL硝酸，放置0．5h，小火蒸干，继续加热炭化，移入高温炉中，500℃灰化1h，取出放冷，再加1mL硝酸浸湿灰分，小火蒸干。称取2g过硫酸铵，覆盖灰分，再移入高温炉中，800℃灰化20min，冷却后取出，以0．5%硫酸钠溶液少量多次洗入l0mL容量瓶中，并稀释至刻度，备用。
取与样品相同量的硝酸、过硫酸铵，按同法作试剂空白试验。
4．1．2 水产类：取可食部分捣成匀浆。称取1．0～5．0g，以下按4．1．1自“置于石英或瓷坩埚中……”起依法操作。
4．1．3 乳、炼乳、乳粉、茶、咖啡：称取2g混匀或磨碎样品，置于瓷坩埚中，加热炭化后，置高温炉中，420℃灰化3h，放冷后加水少许，稍加热，然后加1mLl∶1硝酸，加热溶解后，移入100mL容量瓶中，加水稀释至刻度，备用。
4．1．4 油脂类：称取2．0g混匀样品，固体油脂先加热融成液体，置于l00mL锥形瓶中，加10mL石油醚，用10%硝酸提取2次，每次5mL，振摇lmin，合并硝酸液于50mL容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀，备用。
4．1．5 饮料、酒、醋等：吸取2．0mL样品，置于100mL容量瓶中，加0．5%硝酸至刻度，混匀，备用。
4．2 测定 吸取0，lmL，2mL，4mL，6mL，8mL铜标准使用液，分别置于100mL容量瓶中，加0．5%硝酸稀释至刻度，混匀。容量瓶中每毫升分别相当于0，10ng，20ng，40ng，60ng，80ng铜。
将处理后的样液、试剂空白和各容量瓶中铜标准液分别导入火焰进行测定。测定条件：灯电流6mA，波长324．8nm，狭缝0．19nm，空气流量9L／min，乙炔流量2L／min，灯头高度3mm，氘灯背景校正(也可根据仪器型号，调至最佳条件)，以铜含量对应浓度吸光度，绘制标准曲线比较。
5．分析方法的表述
式中 x——样品中铜的含量，mg／kg
ρ1——测定用样品中铜的含量，ng／mL
ρ2——试剂空白液中铜的含量，ng／mL
V——样品处理后的总体积，mL
m——样品质量(体积)，g(mL)
(三)二乙胺基二硫代甲酸钠法
1．原理
样品经消化后，在碱性溶液中铜离子与二乙胺基二硫代甲酸钠生成棕黄色络合物，溶于四氯化碳与标准系列比较定量。
2．试剂和溶液
2．1 柠檬酸铵、乙二胺四乙酸二钠溶液称取20g柠檬酸铵及5g乙二胺四乙酸二钠溶于水中，加水稀释至100mL。
2．2 2mol／L硫酸量取20mL硫酸，倒入300mL水中，冷后再加水稀释至360mL。
2．3 1∶1氨水。
2．4 酚红指示液 0．1%乙醇溶液。
2．5 铜试剂溶液 0．1%二乙氨基二硫代甲酸钠〔(C2H5)2NCS2Na·3H2O〕溶液，必要时可过滤，贮存于冰箱中。
2．6 四氯化碳。
2．7 铜标准溶液 同原子吸收分光光度法中的2．1。
2．8 铜标准使用液 吸取铜标准溶液10．0mL，置于100mL容量瓶中，加2mol／L(
H2SO4)稀释至刻度。如再稀释一次，至每毫升相当于10μg铜。
2．9 6mol／LHNO3 量取60mL硝酸，加水稀释至160mL。
3．仪器
分光光度计。
4．操作方法
4．1 样品消化。
4．1．1 硝酸－硫酸法。
4．1．1．1 粮食、粉丝、粉条、豆干制品、糕点、茶叶等及其他含水分少的固体食品：称取5．0g或10．0g的粉碎样品，置于250～500mL定氮瓶中，先加水少许使湿润，加数粒玻璃珠，10～15mL硝酸，放置片刻，小火缓缓加热，待作用缓和，放冷。沿瓶壁加入5mL或10mL硫酸，再加热，至瓶中液体开始变成棕色时，不断沿瓶壁滴加硝酸至有机质分解完全。加大火力，至产生白烟，溶液应澄明无色或微带黄色，放冷。在操作过程中应注意防止爆炸。
加20mL水煮沸，除去残余的硝酸至产生白烟为止，如此处理2次，放冷。将冷后的溶液移入50mL或100mL容量瓶中，用水洗涤定氮瓶，洗液并入容量瓶中，放冷，加水至刻度，混匀。定容后的溶液每10mL相当于1g样品，相当加入硫酸量1mL。
取与消化样品相同量的硝酸和硫酸，按同一方法作试剂空白试验。
4．1．1．2 蔬菜、水果：称取25．0g或50．0g洗净打成匀浆的样品。置于250～500mL定氮瓶中，加数粒玻璃珠，10～15mL硝酸，以下按4．1．1．1自“放置片刻……”起依法操作，但定容后的溶液每10mL相当于5g样品，相当加入硫酸量1mL。
4．1．1．3 酱、酱油、醋、冷饮、豆腐、腐乳、酱腌菜等：称取10．0g或20．0g样品(或吸取10．0mL或20．0mL液体样品)，置于250～500mL定氮瓶中，加数粒玻璃珠，5～15mL硝酸。以下按4．1．1．1自“放置片刻……”起依法操作，但定容后的溶液每10mL相当于2g或2mL样品。
4．1．1．4 含酒精性饮料或含二氧化碳饮料：吸取10．0mL或20．0mL样品，置于250～500mL定氮瓶中，加数粒玻璃珠，先用小火加热除去乙醇或二氧化碳，再加5～10mL硝酸，混匀后，以下按4．1．1．1自“放置片刻……”起依法操作，但定容后的溶液每10mL相当于2mL样品。
吸取5～10mL水代替样品，加与消化样品相同量的硝酸和硫酸，按相同操作方法做试剂空白试验。
4．1．1．5 含糖量高的食品：称取5．0g或10．0g样品，置于250～500mL定氮瓶中，先加少许水使湿润，加数粒玻璃珠、5～10mL硝酸混合后，摇匀。缓缓加入5mL或10mL硫酸，待作用缓和停止起泡沫后，先用小火缓缓加热(糖分易炭化)，不断沿瓶壁补加硝酸，待泡沫全部消失后，再加大火力，至有机质分解完全，发生白烟，溶液应澄明无色或微带黄色，放冷。以下按4．1．1．1自“加20mL水煮沸……”起依法操作。
4．1．1．6 水产品：取可食部分样品捣成匀浆，称取5．0g或10．0g(海产藻类、贝类可适当减少取样量)，置于250～500mL定氮瓶中，加数粒玻璃珠、5～10mL硝酸，混匀后，以下按4．1．1．1自“沿瓶壁加入5或10mL硫酸……”起依法操作。
4．1．2 灰化法。
4．1．2．1 粮食及其他含水分少的食品：称取5．0g样品，置于坩埚中，加热至炭化，然后移入高温炉中，500℃灰化3h，放冷，取出坩埚，加1mL硝酸，润湿灰分，用小火蒸干，在500℃灼烧1h，放冷，取出坩埚。加1mL1∶1硝酸，加热，使灰分溶解，移入50mL容量瓶中，用水洗涤坩埚，洗液并入容量瓶中，加水至刻度，混匀备用。
4．1．2．2 含水分多的食品或液体样品：称取5．0g或吸取5．0mL样品，置于蒸发皿中，先在水浴上蒸干，以下再按4．1．2．1自“加热至炭化……”起依法操作。
4．2 测定 吸取10．0mL消化后的定容溶液和同量的试剂空白液，分别置于125mL分液漏斗中，加水稀释至20mL。
吸取0．00，0．50mL，1．00mL，1．50mL，2．00mL，2．50mL铜标准使用液(相当0、5μg、10μg、15μg、20μg、25μg铜)，分别置于125mL分液漏斗中，各加2mol／L(
H2SO4)至20mL。
于样品消化液、试剂空白液和铜标准液中，各加5mL柠檬酸铵、乙二胺四乙酸二钠溶液和3滴酚红指示液，混匀，用1∶1氨水调至红色。各加2mL铜试剂溶液和10．0mL四氯化碳，剧烈振摇2min，静置分层后，四氯化碳层经脱脂棉滤入2cm比色杯中，以零管调节零点，于波长440nm处测吸光度，绘制标准曲线比较。
5．分析方法的表述
式中 x——样品中铜的含量，mg／kg或mg／L
m1——测定用样品消化液中铜的含量，μg
m2——试剂空白液中铜的含量，μg
m——样品质量(体积)，g(mL)
V1——样品消化液的总体积，mL
V2——测定用样品消化液体积，mL