糖精钠
出处：按学科分类—工业技术 中国轻工业出版社《食品添加剂分析检验手册》第339页（9991字）
结构式：
分子式：C7H4O3NSNa·2H2O
相对分子质量：241．19
一、糖精钠的鉴别
1．试剂
1．1 间苯二酚。
1．2 硫酸。
1．3 氢氧化钠 40g／L溶液。
1．4 盐酸 100g／L溶液。
2．仪器
一般实验室仪器。
3．操作步骤
3．1 取试样约20mg，加间苯二酚约40mg，混合后加硫酸10滴，用微火加热，至显深绿色，放冷，加水10mL与过量的氢氧化钠溶液即成绿色有荧光的溶液。
3．2 取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取试样，在无色火焰中燃烧，火焰即显鲜黄色。
3．3 熔点测定 按《中华人民共和国药典》1977年版熔点测定法规定。取试样约0．3g，加水5mL溶解后，加稀盐酸1mL，即析出结晶，过滤，滤渣用水洗净，经105℃干燥后，测定其熔点应为226～230℃。
二、糖精钠的含量测定
1．试剂和溶液
1．1 冰乙酸。
1．2 乙酸酐。
1．3 结晶紫指示液 0．5%乙酸溶液。
1．4 无水乙酸 取冰乙酸适量，按含水量计算1g水加乙酸酐5．22mL即得。
1．5 高氯酸 0．1mol／LHClO4标准溶液，按GB601配制。
2．仪器
一般实验室仪器和自动滴定管(25mL)。
3．测定方法
取干燥失重测定后试样0．3g，称准至0．0002g，加入乙酸酐5mL，溶解后，加2滴结晶紫指示液，用0．1mol／LHClO4溶液滴定至蓝绿色。
4．分析结果的表述
糖精钠质量分数(w)，按式(11－1)计算：
式中 c——HClO4标准溶液浓度，mol／L
V——消耗高氯酸标准溶液的体积，mL
m——试样质量，g
0．2052——每毫摩糖精钠的质量，g／mmol
三、食品中糖精钠的测定方法
(一)高效液相色谱法
1．原理
样品加温除去二氧化碳和乙醇，调节pH至近中性，过滤后进高效液相色谱仪。经反相色谱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性定量。取样量为2．5g时，进样量为10μL时，最低检出量为1．5ng。
2．试剂和溶液
2．1 甲醇 经滤膜(0．5μm)过滤。
2．2 氨水(1+1) 氨水加等体积水混合。
2．3 0．02mol／L乙酸铵溶液 称取1．54g乙酸铵，加水至1000mL溶解，经滤膜(0．45μm)过滤。
2．4 糖精钠标准贮备溶液 准确称取0．0851g经120℃烘干4h后的糖精钠(C7H4O3NSNa·2H20)，加水溶解定容至100．0mL。糖精钠含量1．0mg／mL，作为储备溶液。
2．5 糖精钠标准使用溶液 吸取糖精钠标准贮备液10．0mL，放入100mL容量瓶中，加水至刻度。经滤膜(0．45μm)过滤。该溶液每毫升相当于0．10mg的糖精钠。
3．仪器
高效液相色谱仪，紫外检测器。
4．测定方法
4．1 样品处理。
4．1．1 汽水、饮料、果汁类：汽水需微温搅拌除去二氧化碳，然后吸取2．0mL样品加入已装有中性氧化铝(3cm×1．5cm)的小柱中，过滤，弃去初滤液。然后用移动相洗脱糖精钠，接收于25mL带塞量筒中，洗脱至刻度，摇匀。此液通过微孔滤膜后进样。
4．1．2 配制酒类：称取10．0g样品，放入小烧杯中，水浴加热除去乙醇，用氨水(1+1)调至pH7，加水定容至适当体积，经滤膜(0．45μm)过滤。
4．2 高效液相色谱参考条件：
4．2．1 色谱柱：YWG-C18 4．6mm×150mm，5μm，或其他型号C18柱。
4．2．2 流动相： 甲醇+乙酸铵溶液(0．02mol／L)(5+95)。
4．2．3 流速：1．0mL／min。
4．2．4进样量：10μL。
4．2．5 检测器：紫外检测器，波长230μm，灵敏度0．2AUFS。根据保留时间定性，外标峰面积法定量。
5．分析结果的表述
式中 x——样品中糖精钠的含量，g／kg(L)
m1——进样体积中糖精钠的质量，mg
V2——进样体积，mL
V1——样品稀释总体积，mL
m2——样品质量，g
6．其他
本方法可同时测定山梨酸、苯甲酸、糖精钠(见图11－1)。
图11－1 高效液相苯甲酸、山梨酸、糖精钠色谱图
1－苯甲酸 2－山梨酸 3－糖精钠
(二)薄层色谱法
1．原理
在酸性条件下，食品中的糖精钠用乙醚提取、浓缩、薄层色谱分离，显色后与标准比较，进行定性和半定量测定。
2．试剂和溶液
2．1 乙醚 不含过氧化物。
2．2 无水硫酸钠。
2．3 无水乙醇及乙醇(95%)。
2．4 聚酰胺粉 100～140目。
2．5 盐酸(1+1) 取100mL盐酸，加水稀释至200mL。
2．6 展开剂。
2．6．1 正丁醇+氨水+无水乙醇(20+1+1)。
2．6．2 异丙醇+氨水+无水乙醇(20+1+1)。
2．7 显色剂 称取0．040g溴甲酚紫溶于100mL50%乙醇溶液，用1．2mL0．4%氢氧化钠溶液调至pH8。
3．仪器
3．1 吹风机。
3．2 层析缸。
3．3 玻璃板5cm×20cm。
3．4 微量注射器10μL。
3．5 玻璃喷雾器。
4．测定方法
4．1 样品提取。
4．1．1 饮料、果酱：称取2．5g(mL)已经混匀的样品(汽水需加热去除二氧化碳)，置于25mL带塞量筒中，加氯化钠至饱和(约1g)，加0．5mL26mol／LHCl溶液酸化，用15mL、10mL乙醚提取2次，每次振摇1min，静止分层，用滴管将上层乙醚提取液通过无水硫酸钠滤入25mL容量瓶中，用少量乙醚洗无水硫酸钠，加乙醚至刻度，混匀。吸取10．0mL乙醚提取液分2次置于10mL带塞离心管中，在约40℃水浴上挥发至干，加入0．1mL无水乙醇溶解残渣，备用。
4．1．2 糕点：称取2．5g糕点样品，研碎，置于25mL带塞量筒中，用石油醚提取3次，每次20mL，每次振摇3min，弃去石油醚，让样品挥干后(在通风橱中不断搅拌样品，以除去石油醚)，加入0．5mL6mol／LHCl溶液酸化，再加约1g氯化钠，以下按4．1．1自“用15mL、10mL乙醚提取2次……”起依法操作。
4．2 测定。
4．2．1 聚酰胺粉板的制备：称取4g聚酰胺粉，加1．0g可溶性淀粉，加约14mL水研磨均匀合适为止，立即倒入涂布器内制成面积为5cm×20cm，厚度为0．3mm的薄层板6块。室温干燥后，于80℃干燥1h，取出，置于干燥器中保存、备用。
4．2．2 点样：薄层板下端2cm的基线上，用微量注射器于板中间点4μL样品溶液，两侧各点2μL、3μL糖精钠标准液。
4．2．3 展开与显色：将点样后的薄层板放入预先盛有展开剂(2．6．1或2．6．2)的展开槽中，展开槽周围贴有滤纸，待溶剂前沿上展至10cm以上时，取出在空气中挥干，喷显色剂其斑点成黄色，背景成蓝色。样品中糖精钠的量与标准斑点深浅比较定量(用2．6．2展开剂时，糖精钠的比移值为0．31，环己基氨基磺酸为0．47，苯甲酸为0．61，山梨酸为0．73)。
5．分析结果的表述
式中 x——样品中糖精钠的含量，g／kg或g／L
m1——测定用样液中糖精钠的质量，mg
m2——样品质量(体积)，g(mL)
V1——样品提取液残留物加入乙醇的体积，mL
V2——点样液体积，mL
(三)离子选择电极测定方法
1．原理
糖精钠选择电极是以季铵盐所制PVC薄膜为感应膜的电极，它和作为参比电极的饱和甘汞电极配合使用，以测定食品中糖精钠的含量。当测定温度、溶液总离子强度和溶液接界电位条件一致时，测得的电位遵守能斯特方程式，电位差随溶液中糖精离子的活度(或浓度)改变而变化。
被测溶液中糖精钠含量在0．02～1mg／mL范围内。电极值与糖精离子浓度的负对数成直线关系。
2．试剂和溶液
2．1 乙醚 使用前用盐酸(6mol／L)饱和。
2．2 无水硫酸钠。
2．3 6mol／L盐酸 取100mL盐酸，加水稀释至200mL，使用前以乙醚饱和。
2．4 0．06mol／L氢氧化钠溶液 取2．4g氢氧化钠加水溶解并稀释至1000mL。
2．5 100g／L硫酸铜溶液 称取硫酸铜(CuSO4·5H2O)10g溶于100mL水中。
2．6 40g／L氢氧化钠溶液。
2．7 0．02mol／LNaOH溶液 将2．4稀释而成。
2．8 1mol／LNaH2PO4·2H20溶液 取78g磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O)溶解后转入500mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。
2．9 总离子强度调节缓冲液 87．7mL磷酸二氢钠溶液(1mol／L)与12．3mL磷酸氢二钠溶液(1moL／L)混合即得。
2．10 糖精钠标准溶液 准确称取O．0851g经120℃干燥4h后的糖精钠结晶移入100mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀备用。此溶液每毫升相当于1．0mg糖精钠(C6H4CONNaSO2·2H2O)。
3．仪器
3．1 精密级酸度计或离子活度计或其他精密级电位计 准确到±1mV。
3．2 糖精选择电极。
3．3 217型甘汞电极 具双盐桥式甘汞电极，下面的盐桥内装入含有1%琼脂的氯化钾溶液(3mol／L)。
3．4 磁力搅拌器。
3．5 透析用玻璃纸。
3．6 半对数纸。
4．测定方法
4．1 样品提取。
4．1．1 液体样品 浓缩果汁、饮料、汽水、汽酒、配制酒等。准确吸取25mL均匀试样(汽水、汽酒等需先除去二氧化碳后取样)，置于250mL分液漏斗中，加2mL6mol／LHCl溶液，用20mL，20mL，10mL乙醚提取3次。合并乙醚提取液，用5mL经盐酸酸化的水洗涤1次，弃去水层，乙醚层转移至50ml容量瓶，用少量乙醚洗涤原分液漏斗合并入容量瓶，并用乙醚定容至刻度，必要时加入少许无水硫酸钠，摇匀，脱水备用。
4．1．2 含蛋白质、脂肪、淀粉量高的食品：糕点、饼干、酱菜、豆制品、油炸食品，称取20．00g切碎样品，置透析用玻璃纸中，加50mL0．02mol／LNaOH溶液，调匀后将玻璃纸口扎紧，放入盛有200mL0．02mol／LNaOH溶液的烧杯中，盖上表面皿，透析24h，并不时搅动浸泡液。量取125mL透析液，加约0．4mL6mol／LHCl溶液使成中性，加20mL硫酸铜溶液混匀，再加4．4mL氢氧化钠溶液(40g／L)，混匀。静置30min，过滤。取100mL滤液于250mL分液漏斗中，以下按4．1．1自“加2mL6mol／LHCl……”起依法操作。
4．1．3 蜜饯类：称取10．0g切碎均匀样品，置透析用玻璃纸中，加50mL0．06mol／LNaOH溶液，调匀后将玻璃纸扎紧，放入盛有200mL0．06mol／LNaOH溶液的烧杯中，透析，沉淀，提取按4．1．2操作。
4．1．4 糯米制食品：称取25．00g切成米粒状小块均匀样品，按4．1．2操作。
4．2 测定。
4．2．1 标准曲线的绘制：准确吸取0．0，0．5mL，1．0mL，2．5mL，5．0mL，10．0mL糖精钠标准溶液(相当于0．0，0．5mg，1．0mg，2．5mg，5．0mg，10．0mg糖精钠)，分别置于50mL容量瓶中，各加5mL总离子强度调节缓冲液，加水至刻度，摇匀。
将糖精选择电极和甘汞电极分别与测量仪器的负端和正端相连接，将电极插入盛有水的烧杯中，按其仪器的使用说明书调节至使用状态，在搅拌下用水洗至起始电位(例如某些电极起始电位达－320mV)。取出电极用滤纸吸干。将上述标准系列溶液按低浓度到高浓度逐个测定，得其在搅拌时的平衡电位值(－mV)。
在半对数纸上以毫升(毫克)为纵坐标，电位值(－mV)为横坐标绘制标准曲线。
4．2．2 样品的测定：准确吸取20mL4．1下的乙醚提取液置于50mL烧杯中，挥发至干残渣，加5mL总离子强度调节缓冲液。小心转动，振摇烧杯使残渣溶解，将烧杯内容物定量转移入50mL容量瓶中，原烧杯用少量水多次漂洗后，并入容量瓶中，最后加水至刻度摇匀。依法测定其电位值(－mV)，查标准曲线求得测定液中糖精钠毫克数。
5．分析结果的表述
式中 x——样品中糖精钠含量，g／kg或g／L
m1——测定液中糖精钠的质量，mg
m2——样品的质量或体积，g或mL
V1——乙醚提取液的体积，mL
V2——分取乙醚提取液的体积，mL
6．干扰
本法对苯甲酸钠的浓度在200～1000mg／kg时无干扰；山梨酸的浓度在50～500mg／kg，糖精钠的含量在100～150mg／kg范围内，约有3%～10%的正误差，水杨酸及对羟基苯甲酸酯对本法的测定有严重干扰。
(四)导数光谱分析法(参考方法)
1．原理
利用糖精钠的4阶导数，在波长232．2nm和224．8nm出现糖精钠的特征吸收峰而进行定量。
2．试剂和溶液
2．1 乙醚。
2．2 6moL／LHCl溶液 取100mL盐酸，加100mL水即得。
2．3 100g／L硫酸铜溶液 称取硫酸铜(CuSO4·5H2O)10g溶于100mL水中。
2．4 200g／L氢氧化钠溶液 称取氢氧化钠20g溶于100mL水中。
2．5 20g／L碳酸氢钠溶液 称取2g碳酸氢钠溶于100mL水中。
2．6 1．0g／L糖精标准溶液 称取0．1g糖精，加2%碳酸氢钠溶解至100mL。
2．7 无水硫酸钠 分析纯。
3．仪器
紫外分光光度计(附导数光谱)。
4．测定方法
4．1 样品处理。
4．1．1 液体样品：饮料、樱桃罐头汁、酱油、葡萄酒等，参照国家标准分析方法的提取方法取2．00mL(样品含CO2，加热除去；含乙醇，用NaOH调至碱性，在沸水浴上加热除去)，置25mL比色管中，加0．40mL6mol／LHCl溶液，用6．0mL、4．0mL、4．0mL乙醚提取3次，合并乙醚，用1．0mL盐酸酸化的水洗涤1～3次，弃去水层，乙醚通过无水硫酸钠置100mL三角烧杯中，水浴挥干，加2%NaHCO310～50mL溶解残渣待用。
4．1．2 半固体、固体样品：半固体(如果茶)称取10．0g，固体样品经粉碎，称取5．0g，置50．0mL比色管中，加水至30．0mL，加10mL10%CuSO4·5H2O，用NaOH调至碱性，加水至50．0mL，混匀，静止30min，用滤纸过滤，取滤液5．0mL置25．0mL比色管中，加0．40mL6mol／LHCl溶液，加乙醚10．0mL，10．0mL，5．0mL提取3次，合并乙醚提取液，用2．0mL盐酸酸化的水洗涤1～3次，弃去水层，乙醚通过无水Na2SO4脱去杂质，置100mL三角瓶中水浴挥干，用2%NaHCO3定容至10～50mL，待用。
4．1．3 标准曲线的制备及样品测定：用2%NaHCO3溶液配制0．000，0．005g／L，0．010g／L，0．020g／L，0．030g／L，0．040g／L糖精钠标准液。按仪器测定条件记录标液和样品的4阶导数光谱，以波长232．2nm附近的吸收强度定量。
5．分析结果的表述
式中 x——样品中糖精钠含量，g／kg或g／L
m1——样品测定液中糖精钠的含量，g／L
V1——样品定容体积
m2——样品体积(mL)或质量，g