RAPD检测技术

出处:按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农作物品种鉴定手册》第63页(1611字)

利用随机核苷酸序列作为引物,同经裂解的单链DNA结合,扩增基因组DNA的随机片段,再用琼脂凝胶电泳,溴乙链染色,就可在紫外灯光下,观察电泳谱带的差异,区分不同种或品种。

基本方法是人工合成引物→DNA热循环扩增反应(DNA多聚酶模板,在Tris-HCl、KCl、MaCl2、dNTP等条件下)70-95℃1-5分钟→35-55℃1-2分钟→70-72℃0.5-2分钟,→37℃或70℃5-10分钟→1.4-3.0%琼脂凝胶电泳→溴乙链染色5-10分钟→放在紫外灯光下观察鉴定品种电泳谱带的差异。

【参考文献】:

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