愈伤组织的干燥贮存法
出处：按学科分类—生物科学 农业出版社《植物细胞培养手册》第289页（2322字）
干燥法的基本想法来源于细胞的全能性。每个植物细胞都有发育成完整的植株的潜能，那么可以设想，每个愈伤组织可以移到贮藏种子相同的环境中而得到贮存。
胚胎细胞是有分生能力的。但在成熟过程中，它逐渐失去水分。这一过程是由激素调控，同时便于贮藏的化学物质也常有积累，可在培养器中模拟进行。由于还不能对成熟细胞进行化学鉴定，因此对成熟过程还未很好认识。影响成熟的激素包括ABA和乙烯，其他激素也很重要。贮藏物质包括糖类，脂类和蛋白质，同样受到影响。
1．预处理 在一些研究中，曾分析过培养基中ABA和蔗糖浓度的影响，ABA在细胞中作为许多反应的抑制剂，尤其是那些由GA所影响的生化过程。ABA和利福平都能降低RNA聚合酶活性，但两者作用不同。用利福平预处理并不影响细胞的生活力，而ABA的作用机制仍是个谜。
将蔗糖浓度增到0．15M或更高，对干燥愈伤组织的存活有积极作用，蔗糖可能作为低温防护剂改变细胞中水分结构，或者间接地增加干物质含量，从而提高存活率。
研究表明最适的预处理是12-20天。显然，生化变化的多少取决于有效的预处理。核酸、蛋白质等在失水情况下，并不失去其所携带的信息，并且它们的保存也不需结晶水。这些特性将引起生理生化研究的注意。
尽管禾本科植物的愈伤组织并不需要预处理也能存活，但对多数双子叶植物来说，预处理必不可少。
2．干燥 在干燥和贮藏过程中，必须避免愈伤组织的污染，用以下两种方法之一可达到这一目的。第一种方法，是将愈伤组织块放在灭菌的明胶胶囊(0．5cm3)中，然后密封，这一胶囊可在未经灭菌的实验室中放置几天进行干燥。胡萝卜愈伤组织经4-7天干燥，其生活力并未受到影响。第二种方法：是将愈伤组织块放在灭菌的滤纸上，然后放在空气流动箱内，用灭菌的空气进行干燥，最后将干燥的愈伤组织块保存在灭菌容器中。
3．贮藏 干燥愈伤组织的贮藏与冷冻法不同，并不需要很低温度。贮藏条件可依相应种子贮藏条件来选择，需要适当的低温度和低湿度，而一般应用零度以上低温。周围环境中氧的含量也将影响存活率，但这方面尚未进行深入研究。对于干燥愈伤组织来说，储藏条件并不十分严格，储藏时也不象冷冻法那样需消耗较多能量。
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