母蛾镜检

出处：按学科分类—农业科学 农业出版社《中国蚕桑技术手册》第175页（2687字）

通过母蛾镜检，淘汰有毒(微粒子病)蚕种，是预防微粒子病的最根本、最有效的方法，各级蚕种必须按规定袋蛾，严格检种(母蛾检验)。

(一)集团蛾镜检法

是采用集团磨蛾机磨蛾、每个标本由双人对检的新型检种法，具有省力、高效、检验正确等优点，江苏、浙江、四川等重点蚕区已全面采用。

1．劳力组合 以磨蛾机为单位配备人员，9人1组：编号1人，拆盒倒蛾2人，磨蛾1人，过滤、沉淀、离心1人，振荡、制作标本1人，镜检2人，洗涤1人。

2．编号 根据送蛾清单核对各批(段)的蛾盒数。原种以上各级蚕种的全部母蛾均要检验，可按各批蛾盒号顺序编号。杂交种的母蛾抽样检验，以批为单位，将蛾盒按号顺序排列，从两端向中间隔号抽取的蛾盒作第1样本，从中间向两端抽取的蛾盒作第2样本，第1样本应包括始、末号蛾盒；4只样本蛾盒为1组，按蛾盒号顺序顺排列。

3．拆盒倒蛾 原种以上各级蚕种的母蛾，拆盒时先逐张登记无母蛾的卵圈，作为淘汰蚕种的依据。母种、原原种以14蛾，原种以28蛾为1检验单位(即1蛾盒为1单位)，蛾盒拆开后按蛾盒上的蚕种张号，从左到右、由小到大依次倒入磨蛾罐内，每罐倒1盒。杂交种以30只母蛾为1检查单位，每罐1盒(30只母蛾)，4盒1组，组内顺序从左到右由小到大，盒内的母蛾必须全部倒入磨蛾罐内，如发现某1蛾盒内的母蛾不足30头，应以同批母蛾补足。拆盒用的刀、钳子等工具，每拆1盒即要调换，一批(段)结束，将刀、钳全部洗净、消毒后再用。

4．磨蛾 将磨蛾罐按顺序送至磨蛾台，每罐注入0．5%碳酸钾液80－100ml，磨蛾机每分钟转速8000－9000转，经1－2分，将磨碎液用脱脂棉或双层纱布过滤3分钟，滤液注入离心管内。

5．离心沉淀 离心管内液量不能过满，每管液量力求相等，离心机中如离心管不足，对称管内可加入清水，以保持离心平衡。离心机转速每分钟2600次，经约3分钟的离心沉淀，舍弃上清液，保留沉淀液，以28－30蛾为1检查单位的蛾液沉淀量，一般约有0．8－1ml。

6．振荡 制作标本：在沉淀液中注入2%的氢氧化钾液0．5－1ml，振荡1分钟后制作标本，母种、原原种、原种每1检查单位制6个标本，要分6次制作；杂交种每1检查单位制4个标本，分4次制作。

7．镜检 用600倍以上的显微镜检验(最好用位相差显微镜)，每个检查单位的标本由2个镜检员对检。原种以上各级蚕种，1个检查单位每个镜检员检3个标本，普通种1个检查单位每个镜检员检2个标本，镜检时每个标本不少于5个视野。

8．洗涤 操作中的各种用具，如磨蛾罐、漏斗、离心沉淀管、纱布、玻棒等，每使用1次均须清洗后再用，当检出微粒子病蛾时更要仔细洗涤，尤其是磨蛾罐及罐内磨刀洗涤时间需延长15－20秒。

(二)普通镜检法

1．准备 配足人员，分拆蛾、磨蛾、点板、洗板安排人力，准备好乳钵、乳棒、蛾钳、显微镜等检种用具，配制磨蛾碱液。

2．拆蛾 将乳钵顺号排好，蛾盒顺号分放在乳钵边，顺号钳出母蛾，对号放入乳钵，1蛾盒一把钳，遇有空圈或1号2蛾时，当即记于蛾盒上，以备统计查核。

3．磨蛾 每个钵孔注入碱液1－1．5ml，用乳棒对准蛾腹用力研磨，磨烂研细蛾体，不使蛾液外溅混入他孔。

4。点板 用乳棒蘸取乳孔底层蛾液，对号(检板号与乳钵孔号相符)点(滴)在载玻片上，每点标本液直径0．6－0．7cm，浓淡适度无杂质。母种、原原种须点2板，由2人对检；原种、普通种点1板，由1人镜检。所点标本送镜检台待检。

5．镜检 调整好显微镜的位置和光线，视野呈晴空蔚蓝色为宜。母种、原原种对检，原种、普通种单检。初检、复检均用600－800倍显微镜检视送检标本，观察时要上下、左右、中间顺序移动标本，看清上浮、下沉物，每个标本看5－10个视野，当发现可疑物或微粒子孢子时，进行复检。镜检中发现微粒子孢子作“+”号，无毒作“－”号，空圈作“0”号记入镜检登记表中，镜检员签名负责。

发现有微粒子孢子或可疑物的乳钵、乳棒需经漂白粉液消毒后复用，玻片投入消毒液中浸渍消毒。经镜检无毒后，方可洗涤，将乳钵、乳棒、大小玻片等用清水洗后复用。

(三)注意事项

1．母蛾送检 即时浸酸种的母蛾，应在蚕种送达浸酸场所的同时，送到指定的检种室。冷藏浸酸种、春制和秋制越年种的母蛾，在蛾盒干燥处理完毕后，根据检种室的通知及时送达检种室。检种室应由专人负责验收送检蛾盒，按送蛾清单核对场名、品种、批(段)次及各批蚕种的应送母蛾盒数，登记入册，当发现某场送检数量不足时，应立即通知该场补送。

2．消毒 检种室的环境及地面，一般每周消毒1次，当检出微粒子病蛾时，当日需消毒1次，消毒剂用含1%有效氯的漂白粉液。

3．蛾盒等的处理 检种后的空蛾盒及不需检验的蛾盒等废弃物，应由检种室及时烧毁；每日工作结束后，应把当日用过的一切用具清洗干净，蛾体等废弃物倒入消毒池或深埋，杜绝病原扩散。

4．微粒子病毒率的计算

5．严格执行检种的有关规定 各省(区)蚕业生产主管部门针对当地的具体情况，分别制定了各自的《蚕种检验办法》或《蚕种检验制度》，对母蛾微粒子病的检查均有详细的规定和说明，具有行政法规的效力，必须严格贯彻执行。