(3)马铃薯、植株和土壤中残留量检测方法
出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农药残留量实用检测方法手册第3卷》第321页（5174字）
山西省农业科学院植物保护研究所 秦曙 王霞 朱九生 周华 乔雄梧
一、代森锰锌残留量检测
样本中的代森锰锌在加热的密闭顶空瓶中，遇盐酸／氯化亚锡时，反应生成的CS2气体被瓶中的正己烷相吸收，形成CS2的正己烷溶液，气相色谱仪(FPD-S)测定有机相中CS2的量，代表代森锰锌的残留量。
1．主要仪器及设备
气相色谱仪 火焰光度检测器(FPD-S)
电热恒温水浴锅
分散器
高速万能粉碎机
50mL顶空瓶 具聚四氟乙烯／硅橡胶密封垫(20mm)和密封铝盖(20mm)
实验室玻璃仪器
2．主要试剂
正己烷(色谱纯)、二硫化碳、氯化亚锡(SnCl2·2H2O)、浓盐酸、抗坏血酸
氯化亚锡／5mol／L盐酸溶液每100mL 5mol／L盐酸中含氯化亚锡(SnCl2·2H2O)2g
代森锰锌标准品
3．检测步骤
3．1 提取
3．1．1 土壤
称取混匀的土壤5．0g于50mL顶空瓶中，加5mL水、0．05g抗坏血酸、10mL氯化亚锡／5mol／L盐酸、5．0mL正己烷，使用压盖器迅速将瓶口用聚四氟乙烯／硅橡胶密封垫(20mm)和密封铝盖(20mm)密封，放入85℃水浴中2h，每隔15min摇1次，到规定时间后，拿出冷却至室温，吸取上层有机相测定。
3．1．2 马铃薯秧、马铃薯块
马铃薯块切碎混匀、马铃薯秧剪碎混匀。称取混匀样本10．0g于50mL顶空瓶中，加0．05g抗坏血酸、20mL氯化亚锡／5mol／L盐酸、10．0mL正己烷，使用压盖器迅速将瓶口用聚四氟乙烯／硅橡胶密封垫(20mm)和密封铝盖(20mm)密封，放入85℃水浴中2h，每隔15min摇1次，到规定时间后，拿出冷却至室温，吸取上层有机相测定。
3．2 气相色谱法测定
检测器 FPD-S
色谱柱 玻璃填充柱，1．5m(长)×3mm(内径)，10%SE-30／Chromosorb W(AW-DMCS)(60～100目)
检测温度 柱温60℃；进样口150℃；检测器150℃
载气 高纯氮 50mL／min
燃烧气 空气1．3kg／cm2，氢气0．9kg／cm2
进样量 2μL
保留时间 0．60min
4．结果计算
外标(峰面积)-标准曲线法定量
5．灵敏度、准确度和精确度
最小检出量 二硫化碳8×10－11g。
最低检测浓度 代森锰锌0．1mg／kg，二硫化碳0．03mg／kg。
回收率 准确称取代森锰锌标准品5．0mg左右，用100mL纯净水分数次将其洗入高颈烧杯中，然后放在T25分散器上匀浆2min，在液体不停旋转下，快速吸取定量溶液至空白样本中。
马铃薯秧、马铃薯块及土壤中添加代森锰锌0．1～2．0mg／kg时，平均回收率为土壤70．7%～99．6%，马铃薯块98．2%～101．1%，马铃薯秧101．7%～102．8%。详见表2-20-7。
相对标准偏差 1．9%～12．2%，见表2-20-7。
表2-20-7 土壤、马铃薯块和马铃薯秧中代森锰锌添加回收率及相对标准偏差实验结果
6．马铃薯、植株和土壤中代森锰锌(CS2)气相色谱测定谱图
见图2-20-5。
图2-20-5 马铃薯、植株和土壤中代森锰锌(CS2)气相色谱测定谱图
二、乙撑硫脲(ETU)残留量检测
样本用甲醇提取，氧化铝柱层析净化，液相色谱法(UV)测定。
1．主要仪器及设备
液相色谱仪 紫外检测器(UV)
旋转蒸发器
循环水多用真空泵
分散器
高速万能粉碎机
层析柱 长10cm，内径1cm
实验室玻璃仪器 用前需经硅烷化处理
2．主要试剂
甲醇(优级纯)、乙醇、丙酮、二氯甲烷(重蒸)、氯化钠、氨水、纯净水
5%二甲基二氯硅烷正己烷溶液
1%和25%乙二醇丙酮溶液
淋洗液 二氯甲烷／乙醇(95∶5，V／V)
中性氧化铝 100～200目，130℃烘烤4h，干燥器中保存
Celite 545助滤剂
上试102酸洗白色担体 40～60目，pH6～8
乙撑硫脲(ETU)标准品
3．检测步骤
3．1 提取
3．1．1 土壤、马铃薯块
称取20．0g混匀的土壤或经切碎混匀的马铃薯块于250mL三角瓶中，加10mL水，用氨水调节pH11～12。加入2．5g氯化钠、2．5g助滤剂和40mL甲醇，超声波提取5min，减压抽滤，用30mL甲醇分次冲洗样本瓶和布氏漏斗。调整pH7～9，定容至100mL，混匀。取该溶液50mL于圆底烧瓶中，加入3滴1%乙二醇丙酮溶液，用旋转蒸发器(60℃)浓缩至约5mL，加入3g担体，迅速振荡，直至所有团块全部散开，待净化。
3．1．2 马铃薯秧
称10．0g经万能粉碎机粉碎后的马铃薯秧于250mL三角瓶中，加10mL水，用氨水调节pH11～12。加入2．5g氯化钠、2．5g助滤剂和40mL甲醇，超声波提取5min，减压抽滤，用30mL甲醇分次冲洗样本瓶和布氏漏斗。调整pH7～9，定容至100mL，混匀，取该溶液20mL于150mL分液漏斗中，分别用30mL、20mL、20mL石油醚洗涤，弃去石油醚相。水相放入圆底烧瓶中，加入3滴1%乙二醇丙酮溶液，用旋转蒸发器(60℃)浓缩至约3mL，加入3g担体，迅速振荡，直至所有团块全部散开，待净化。
3．2 柱层析净化
3．2．1 土壤
层析柱下塞脱脂棉，称取5g氧化铝，湿法装入柱中，用30mL二氯甲烷／乙醇(95∶5，V／V)预淋，然后向经提取浓缩后的烧瓶中加入10mL淋洗液，摇匀后倒入柱中，淋出液弃去。用50mL淋洗液分3次漂洗烧瓶并加入柱中，收集，向接收液中加入3滴25%乙二醇丙酮溶液，用旋转蒸发器(60℃)浓缩至约2mL，氮气吹干，用甲醇／水(3∶7，V／V)定容至2．5mL，待测定。
3．2．2 马铃薯块、马铃薯秧
柱下塞脱脂棉，称取5g氧化铝，湿法装入柱中，分别用20mL二氯甲烷／乙醇(95∶5，V／V)、10mL二氯甲烷预淋。然后向经提取浓缩后的烧瓶中加入10mL二氯甲烷，摇匀后倒入柱中，再用20mL二氯甲烷、10mL淋洗液漂洗烧瓶并加入柱中，弃去。用50mL淋洗液分3次漂洗烧瓶并加入柱中，收集。向接收液中加入3滴25%乙二醇丙酮溶液，用旋转蒸发器(60℃)浓缩至约2mL，氮气吹干，用甲醇／水(3∶7，V／V)定容至2．5mL，待测定。
3．3 液相色谱法测定
检测器 UV
波长 254nm
色谱柱 Kromasil C18，250mm×4．6mm×5μm
流动相 甲醇／水(30∶70，V／V)
流速 0．4mL／min
进样量 20μL
保留时间 7．02min
4．结果计算
外标(峰面积)-标准曲线法定量
5．灵敏度、准确度和精确度
最小检出量 1．0×10－9g。
最低检测浓度 0．05mg／kg。
回收率 土壤、马铃薯块和马铃薯秧中添加ETU0．05～1．00mg／kg时，平均回收率为83．7%～91．8%、78．9%～102．7%和75．2%～87．2%。见表2-20-8。
相对标准偏差 3．7%～19．1%。见表2-20-8。
表2-20-8 土壤、马铃薯块和马铃薯秧中ETU添加回收率及相对标准偏差实验结果
6．马铃薯、植株和土壤中乙撑硫脲(ETU)液相色谱测定谱图
见图2-20-6。
图2-20-6 马铃薯、植株和土壤中乙撑硫脲(ETU)液相色谱测定谱图