黄瓜和土壤中残留量检测方法
出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农药残留量实用检测方法手册第3卷》第384页（1999字）
浙江省农业科学院农产品质量标准研究所 徐浩
样本用丙酮提取，乙酸乙酯液-液分配，中性氧化铝柱层析净化，液相色谱法(UV)测定。
1．主要仪器及设备
高效液相色谱仪 紫外检测器(UV)
组织粉碎机
台式恒温振荡器
旋转蒸发器
恒温水浴锅
层析柱 Φ10mm×140mm
2．主要试剂
丙酮、乙酸乙酯、石油醚
中性氧化铝(层析用)加5%水减活
嘧霉胺标准品
3．检测步骤
3．1 提取
称取30g黄瓜样本(土壤50g)置于250mL具塞三角烧瓶中，加入80mL、50mL、50mL丙酮，振荡提取(120r／min，恒温40℃)3次，每次30min，过滤。合并滤液于500mL平底烧瓶中，用旋转蒸发器(40℃)蒸去丙酮。
3．2 净化
3．2．1 液-液分配
将蒸残液倒入500mL分液漏斗中，用20mL乙酸乙酯分数次洗涤烧瓶并转移入分液漏斗中。加入80mL5%氯化钠溶液(土壤加50mL)，萃取。分出水相再用20mL乙酸乙酯萃取1次，弃去水相。合并乙酸乙酯相，经无水硫酸钠脱水后，用旋转蒸发器(70℃)减压浓缩至干。
3．2．2 柱层析净化
在层析柱中依次加入3g中性氧化铝和少许无水硫酸钠，用石油醚(60～90℃)预淋。用20mL石油醚／乙酸乙酯(200∶1，V／V)分数次转移残留物于柱上，弃去。用50mL石油醚／酸乙酯(50∶1，V／V)淋洗并洗脱。弃去前10mL，收集后40mL洗脱液。用旋转蒸发器上浓缩至干，用甲醇定容，待测。
3．3 液相色谱、法测定
检测器 UV
波长 278nm
色谱柱 YMC-Pack C8，150mm×4．6mm×5μm
柱温 室温
流动相 甲醇／水(4∶1，V／V)
流速 0．5mL／min
进样量 20μL
保留时间 6．2min
4．结果计算
外标(峰高)-标准曲线法定量
5．灵敏度、准确度和精确度
最小检出量 2．0×10－9g。
最低检测浓度 黄瓜0．03mg／kg，土壤0．02mg／kg。
回收率 黄瓜和土壤中添加嘧霉胺0．20～10．00mg／kg时，平均回收率分别为84．8%～97．8%和87．4%～97．4%。见表2-27-1。
相对标准偏差 1．4%～5．3%，见表2-27-1。
表2-27-1 黄瓜和土壤中嘧霉胺添加回收率及相对标准偏差实验结果
6．黄瓜和土壤中嘧霉胺液相色谱测定谱图
见图2-27-1。
图2-27-1 黄瓜和土壤中嘧霉胺液相色谱测定谱图