糙米、植株、土壤和田水中残留量检测方法
出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农药残留量实用检测方法手册第3卷》第556页（2839字）
湖南农业大学农业环境保护研究所 杨仁斌 郭正元 肖曲 贺德春 龚道新
样本用二氯甲烷提取，弗罗里硅土柱层析净化，液相色谱法(紫外)测定。
1．主要仪器及设备
高效液相色谱仪 紫外检测器(UV)
旋转蒸发器
组织捣碎机
恒温水浴振荡器
层析柱 1．5cm i．d．×30cm
2．主要试剂
甲醇(光谱纯)、二氯甲烷、浓硫酸、无水硫酸钠、硼砂、碳酸氢钾、碳酸钠
弗罗里硅土 经650℃烘4h，加5%水减活
二氯喹啉酸标准品
3．检测步骤
3．1 提取
3．1．1 土壤
称取50g样本置于具塞三角瓶中，用60mL0．01mol／L硼砂溶液和80mL甲醇振荡提取，抽滤。
3．1．2 糙米
称取50g粉碎的糙米样本置于具塞三角瓶中，用80mL甲醇及60mL0．01mol／L硼砂溶液振荡提取，抽滤。将滤液转移至分液漏斗中，用50mL二氯甲烷洗涤，弃去二氯甲烷相。
3．1．3 植株(稻秧和稻草)
称取20g经粉碎的稻草样本置于具塞三角瓶中，用100mL饱和碳酸钠溶液和100mL二氯甲烷于40℃恒温振荡提取30min，抽滤。滤液转移至分液漏斗中，弃去二氯甲烷相。
3．2 净化
3．2．1 液-液分配
3．2．1．1 田水
量取300mL经过滤的水样于分液漏斗中，用硫酸调节pH1～2，用70mL、50mL、30mL二氯甲烷萃取3次。合并二氯甲烷相并经无水硫酸钠脱水，浓缩至1mL，用氮气流吹干。用甲醇／水(0．25 %醋酸)(45∶55，V／V)定容后，待测。
3．2．1．2 土样
滤液转移至分液漏斗中，用硫酸调节pH1～2，并用50mL、30mL、20mL二氯甲烷萃取3次。合并二氯甲烷相，用50mL、40mL、30mL饱和碳酸氢钠溶液反萃取3次。合并碳酸氢钠溶液，用浓硫酸调节pH1～2，再用50mL、30mL、20mL二氯甲烷萃取3次。合并二氯甲烷相，经无水硫酸钠脱水，浓缩至1mL，用氮气流吹干，用流动相①定容后，待测。
3．2．1．3 糙米和植株
提取液用浓硫酸调节pH1～2，用50mL、30mL、20mL二氯甲烷萃取3次。合并二氯甲烷相，用50mL、40mL、30mL饱和碳酸氢钠溶液反萃取3次。合并碳酸氢钠溶液，用浓硫酸调节pH为1～2，再用50mL、40mL、30mL二氯甲烷萃取3次。合并二氯甲烷相，经无水硫酸钠脱水，浓缩至1mL左右。
3．2．2 柱层析净化
将装有5g弗罗里硅土的层析柱用甲醇／二氯甲烷(1∶9，V／V)预淋。样本浓缩液上柱后，用甲醇／二氯甲烷(4∶6，V／V)洗脱，收集50mL洗脱液，浓缩至少量，氮气流吹至近干，用光谱纯甲醇定容后，待测。
3．3 液相色谱法测定
检测器 UV，240nm
色谱柱 ODSHypersil，250mm×4．0mm×5μm不锈钢柱
柱温 30℃
流动相① 甲醇／水(含0．25%醋酸)(45∶55，V／V)，流速0．8mL／rnin
流动相② 甲醇／水(45∶55，V／V)，流速0．8mL／min
进样量 20μL
保留时间 流动相①3．01min，流动相②1．62min
4．结果计算
外标(峰面积)-标准曲线法定量
5．灵敏度、准确度和精确度
最小检出量 3×10－9g。
最低检测浓度 糙米、稻草0．02mg／kg，植株0．05mg／kg，土壤0．025mg／kg，田水5．0×10－5mg／L。
回收率 糙米、植株、田水和土壤中添加二氯喹啉酸0．05～2．00mg／kg，平均回收率分别为84．0%～92．1%、78．3%～88．8%、86．0%～95．5%和81．7%～103．4%。见表3-33-1。
相对标准偏差 3．6%～11．9%，见表3-33-1。
表3-33-1 水、土壤、糙米和植株中二氯喹啉酸添加回收率及相对标准偏差实验结果
6．糙米、植株、土壤和田水中二氯喹啉酸液相色谱测定谱图
见图3-33-1。
图3-33-1 糙米、植株、土壤和田水中二氯喹啉酸液相色谱测定谱图