概述
出处:按学科分类—医药、卫生 中国科学技术出版社《临床厌氧菌检验手册》第72页(1048字)
厌氧菌的培养分离周期较长,临床上对厌氧菌不要求做常规药敏实验。临床厌氧菌感染的抗菌药物治疗一般是凭经验决定。临床判断为厌氧菌感染,往往不等细菌的培养分离与药敏实验完成,治疗必须立即开始。但是在严重的厌氧菌感染的病例,如心内膜炎、脑脓肿、肺脓肿、脓性胆管炎,以及某些需较长时期治疗的感染,如骨髓炎等,测定厌氧菌对抗菌药物的体外敏感度和选择适宜的药物治疗,均具有重要的意义。
随着生物物理、分子化学、放射免疫以及电子计算机的不断发展及其在临床实验中的实用,测定药敏的方法不断增多,如扩散法、稀释法、光密度计法、固体免疫荧光法等。上述这些方法,有的对培养基要求比较严格,有的自动化仪器价格昂贵,在一般的实验室中难以推广应用。尽管药敏方法很多,最常用的药敏测定方法主要有两种,即稀释法与扩散法。
1.药物测定方法 琼脂扩散法是将含抗生素的药物纸片或纸条,或抗生素药液加于洞穴中,置于已接种的被检菌的平板上,药物向琼脂内扩散,抑制细菌的生长,从而出现抑菌环或带。抑菌环的大小与细菌对药物的敏感度呈正相关。一般分为敏感、中敏感或耐药三级。对于中敏的菌株必须加大剂量才能达到抑制或杀灭致病菌的作用。而稀释法是将抗菌药物稀释为不同的浓度,作用于不同的被检菌株,定量的测定药物对细菌的最低抑菌浓度(MIC)或最低杀菌浓度(MBC)。
2.药敏测定的原理 测定抗菌药物在体外对病原微生物的生长有无抑制的方法,称为“药物敏感试验”,有的以抑制细菌生长为评定结果的标准,有的则以杀灭细菌为标准。
(1)稀释法:以一定浓度的抗菌药物与含有被试菌株的培养基进行一系列的不同倍数稀释经培养后观察最低的抑菌浓度(minimal inhibitory comcentration即MIC)。
(2)扩散法:将浸有一定含量的抗菌药物纸片贴上涂有细菌的琼脂平板上,抗菌药物在琼脂内向四周扩散,其浓度呈梯度递减,敏感细菌在纸片周围一定距离内的生长受到抑制。稀释法测得的MIC的对数与从扩散法中得到的抑菌圈直径成直线关系。通过这两种方法相对应地测试一定数量的菌株,可以得到一条代表这种关系的回归线,从实验中所得抑菌圈的大小,即可推知药物的MIC。