概述

出处:按学科分类—医药、卫生 中国科学技术出版社《临床厌氧菌检验手册》第60页(769字)

在临床检验和医学微生态的研究工作中,经常分离到细菌,接触到菌种。菌种是一种重要的生物资源。菌种的保存不仅有利于重现已经做过的研究,证实发现新的菌属和菌种,而且也是研究、推广、开发和实际应用科研究成果的基础。因此,菌种保存工作在细菌学中至关重要。

菌种保存的基本要求是:①菌种保存应尽可能地长时间保留其活力;②菌种保存时应尽量避免发生质的变异;③因细菌的种类不一,保存的难易也不同,最好对不同菌属、菌种,选择最有效的多种保存方法。

厌氧菌不同于需氧菌或兼性菌。厌氧菌在大气中不能存活。氧气(或分子氧)对厌氧菌有毒性,这与厌氧菌中细胞色素氧化酶、触酶、过氧化物酶、超氧化物歧化酶等缺如或活性低,以及菌细胞中主要结构(如DNA和mRNA)对分子氧的敏感程度、胞内酶的位置、毒性产物(如H2O2)形成量等有关。

同时,厌氧菌的发育还直接受环境中的氧化还原电势(Eh)的影响,厌氧菌中不少菌种只有在低Eh环境中才能发育,所以在厌氧菌的分离、培养时,即要除去小环境中的分子氧,又要尽可能设法降低培养基的Eh。对于厌氧菌的保存,也必须注意厌氧菌不具有细胞色素酶,不能以分子氧作为最终电子受体,且由于分子氧对其具有毒性这一重要特点,在做厌氧菌的保存工作时必须注意排除分子氧。就目前有关菌种保存的文献来看,厌氧菌菌种保存工作仍然是一个难题。尤其是国内厌氧菌的保存技术条件尚受一定限制,故不免出现有的厌氧菌菌种保存不佳的情况。这不仅给实验室诊断和研究工作带来困难,而且成为厌氧技术推广的障碍。以下就笔者工作的点滴体会,结合有关文献,论述厌菌保存较为有效的方法。

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