注意事项

出处:按学科分类—医药、卫生 中国科学技术出版社《临床厌氧菌检验手册》第130页(411字)

(1)蛋白质通过物理吸附,覆盖在聚苯乙烯表面,其覆盖量取决于蛋白质浓度、pH值、温度、时间及离子强度。高pH值和相对低的离子强度缓冲液,一般有利于蛋白质覆盖在聚苯乙烯表面。覆盖量随蛋白质浓度和覆盖时间增加而增加,在通常应用覆盖的蛋白质浓度下,一般在37℃3小时内达到最大覆盖量。

(2)标记抗体应选最适浓度,在这种浓度下阳性和阴性血清应有明显区别。浓度过高易出现假阳性,浓度过低影响灵敏度。

(3)反应时间 对于抗体测定,抗血清和抗体达到最大反应在25℃需4~5小时,增加温度可缩短反应时间。

(4)非特异性吸附严重影响实验的准确性,用含吐温-20(Tween-20)的PBS或生理盐水洗去或阻断非特异性吸附的蛋白质比较有效。

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