病理检查取材方法

出处:按学科分类—医药、卫生 科学普及出版社《麻风病实验室工作手册》第67页(2709字)

病理检查是麻风病的诊断、分型、疗效观察和防止复发的重要手段之一。要达到此目的,采取标本时,必须严格遵守以下技术细则。

一、活检部位的选择

1.选择最明显的活动性损害。在不同形态或不同发展程度的麻风皮损中,应选择范围大、活动性强、具有代表性的典型浸润、斑块、斑疹,并应在稍靠近中心部位取材。

2.对中心消退而边缘高起的损害,应选择皮损的边缘处取材,不带正常皮肤。

3.对疗效观察病例,应在原取材的皮损附近取材,以利对比。

4.对观察是否治愈病例,应选择以往浸润重而细菌消失最晚的皮损取材。

5.不在四肢套状麻木区及所谓自然“免疫区”、如肘窝、窝及腋下部处取材。

6.尽可能不选面部、关节及磨擦部位。

二、采取活检的方法

(一)皮肤活检

有两种方法:

1.割切法:

(1)局部消毒麻醉。对色素减退斑应先用胆紫标记定位。明确取材部位后,按外科消毒法进行局部消毒,酒精干后,用2%普鲁卡因注射液(最好内含0.001%的肾上腺素),在要切取的标本外围作环形浸润麻醉,约1~2毫升,针尖勿刺入要取的标本内,以免造成组织水肿及破损。然后铺上消毒孔巾,待2~3分钟,使麻醉剂充分发生作用。

(2)标本采取。左手食指和拇指将皮肤稍微张开,用灭菌手术刀作两条半月形的切口,标本应长10毫米,宽4~5毫米,深达皮下脂肪层,标本纵轴应与皮纹平行,切口与皮面成直角,使标本上下宽度均等。然后用灭菌镊子轻轻将标本一端提起,用手术刀或剪刀将附着的组织切断,标本应带脂肪组织。若要作两种切片检查时,则切取的标本应稍大些,采下后用利刀片将其分成两半。

(3)缝合切口。用消毒镊子将皮肤切口吻合,缝合1~2针,然后用75%酒精清洁伤口,盖上消毒纱布,包扎。嘱患者保护伤口清洁,避免污染,5~7天拆线。

2.钻孔法。活检用5毫米钻孔器采取。需要将组织分成两份分别做检查者,则用6毫米钻孔器。常规消毒,麻醉。然后将钻孔器紧贴在活检部位扭转,使钻孔器深入至皮下脂肪层后,拔出钻孔器,用缝针或小镊子轻轻提起组织,用剪刀将附着的皮下脂肪组织切断。通常缝一针皮肤,或放一点碘仿,可不缝合,常规包扎即可。

(二)神经活检

腕部的挠神经皮支最适合作活检,因这条神经常受损伤,且位置表浅,技术操作较简单。这条神经由十几条神经束组成,切取一两束神经纤维,不会明显影响功能,况且这条神经只含有感觉和自律神经纤维。不过神经活检要由有经验的外科医生进行。没有必要时,尽量不要切取神经标本,尤其应避免切取含有运动神经纤维的神经束。

割取方法 局部皮肤消毒,铺巾。然后用触摸的方法确定神经的位置,用2%普鲁卡因注射液在神经周围1~2厘米范围内进行皮肤及神经周围浸润麻醉,等待5分钟,让麻醉剂起作用后,在要割取神经的上方皮肤切开1~2厘米长的切口,避开附近的静脉,进行钝性分离,找出神经,用等腰三角形的塑料片(用75%酒精浸过)或用消毒的弯形血管钳置于该神经之下。然后在神经外膜作一纵切口,用极尖细的镊子提起神经切取标本,切取的标本大小不要超过该神经直径的30%。神经割出后,将神经标本伸直放在硬纸上,并加以固定。伤口一般缝合2~3针。用75%酒精清洁伤口,盖上消毒纱布,包扎。嘱患者保护伤口清洁,5~7天拆线。

三、固定

固定的目的是保持组织和细胞的形态和特征,防止组织自溶。当组织离体后,应立即放入已盛有5~8毫升的10%中性福尔林液的小瓶内,勿污染瓶子周围。用钻笔写上姓名。勿用圆珠笔或脱色水笔写。标本瓶子和送检单上均要编上号码,以便校对。

固定液 目前还没有适合于多种目的的固定液,一般仍以福尔马林作固定液。它渗透力强,固定厚度适当的组织,较为均匀,能使组织硬化,并增高组织弹性,对组织切片的某些化学成分及脂肪的保存,神经、髓鞘的固定和抗酸染色都较好。但福尔马林久存后会氧化产生甲酸,呈酸性,不宜固定标本。组织固定时间稍久,会使组织呈弱酸性,影响染色性,也会使胶原纤维及细胞皱缩。故此,固定组织标本时要用pH值为7.0的10%福尔马林液。

中性福尔马林固定液配制:

福尔马林(39~40%甲醛溶液) 100毫升

磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O) 3.5克

磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O) 6.5克

蒸馏水 900毫升

酒精 也有人将酒精作为固定液使用。它能固定组织,也有脱水作用,且来源容易。但用酒精固定组织,可使组织强烈收缩,脆化,不利于制片,也使细胞变形,核着色欠佳,并能溶解血色素,而使红细胞褪色。故此,一般不宜用酒精固定组织标本。

四、详细填写病理送检单

五、包装和邮寄

组织放进固定瓶后,用胶盖塞妥。如需邮寄则要用胶布封瓶口一圈,上面再横加一小条胶布。如用软性材料如泡沫塑料包裹组织瓶,要塞紧,连病理送检单一起装入小木箱内。钉箱时用力应适当,以免振破瓶子。

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