铁的测定
出处：按学科分类—医药、卫生 中国科学技术出版社《食物营养分析实用手册》第45页（3014字）
人和动物机体内，存在于血红蛋白、肌红蛋白、血红素酶类(细胞色素，细胞色素氧化酶，过氧化酶，过氧化氢酶等)的铁占总量的70%。其余30%存在于肝、脾、肾、心和骨髓中。
铁是机体不可缺少的微量元素之一，如果体内缺铁或不足，可导致缺铁性贫血。
方法－：
硫氰酸盐比色法测定铁的含量
在酸性溶液中，铁离子与硫氰酸钾作用，生成血红色的硫氰酸铁。溶液颜色的深浅与铁离子的浓度成正比，可进行比色测定。
试剂
(1)2%高锰酸钾溶液；
(2)20%硫氰酸钾溶液；
(3)2%过硫酸钾溶液；
(4)浓硫酸；
(5)铁标准溶液。
其中铁标准溶液的配制：称取0．0498克硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)，溶于100毫升水中，加浓硫酸5毫升，微热，溶解后随即加入2%高锰酸钾溶液至最后1滴红色不褪色为止。用水稀释至1000毫升，摇匀。此液每毫升含10微克铁(10微克／毫升)。
操作步骤
1．样品处理
(1)干法处理：称取均匀样品20．0克，置坩埚中，在微火上炭化后，移入500℃高温电炉中灰化成白色灰烬。难灰化的样品可加入10%硝酸镁溶液2毫升作助灰剂。如果样品在高温炉中不易烧成白色时，可冷却后加数滴浓硝酸使残渣润湿，蒸干后再行灼烧。灰化后的灰分用1∶1盐酸2毫升，水5毫升加热煮沸，冷却后移入100毫升容量瓶中，用水定容至刻度(必要时可进行过滤)。
(2)湿法处理：称取均匀样品20克，置500毫升凯氏烧瓶中，加浓硫酸10毫升，浓硝酸20毫升，先以小火加热，待剧烈作用停止后，加大火力并不断滴加浓硝酸直至溶液透明不再转黑为止。(每当消化溶液颜色变深时，立即添加硝酸，否则难以消化完全)。最后继续加热数分钟至有浓白烟逸出，冷却后再加入10毫升水，继续加热至冒白烟为止，冷却，移入100毫升容量瓶中，用水定容至刻度，备用。
2．标准曲线的绘制：准确吸取0．0，0．2，0．4，0．6，0．8，1．0毫升的铁的标准溶液，分别置25毫升比色管中，各加入5毫升水，再加入浓硫酸0．5毫升，加入2%过硫酸钾溶液0．2毫升，加入20%硫氰酸钾溶液2毫升，混匀后用水稀释至25毫升，混匀，于721型分光光度计，在485nm波长处进行比色测定。
以光密度为纵坐标，铁含量为横坐标，绘制标准曲线
3．样品的测定：准确吸取样品液5～10毫升，置25毫升比色管中，加5毫升水，0．5毫升浓硫酸，以下操作同标准曲线的绘制。
根据光密度从标准曲线查得相应的铁含量。
4．计算：
式中：A：标准曲线查得并计算出每毫升样品液含铁量(微克)；
C：样品提取液总体积(毫升)；
W：样品重(克)；
1000：换算微克为毫克；
100：换算为百分含量。
方法二：邻菲罗啉比色法测定铁含量
样品液中的三价铁在酸性条件下还原为二价铁，然后与邻菲罗啉作用生成红色物质，可进行比色测定。
试剂
(1)10%盐酸羟胺溶液；
(2)1∶9盐酸溶液；
(3)50%醋酸钠溶液；
(4)0．12%邻菲罗啉溶液：称取0．12克邻菲罗啉置于烧杯中，加入60毫升水，加热至80℃左右使之溶解，移入100毫升容量瓶中，加水至刻度，摇匀。
(5)铁标准溶液：准确称取纯铁0．1000克，溶于10毫升10%硫酸中，加热至铁完全溶解，冷却后移入100毫升容量瓶中，加水至刻度，此贮备液每毫升含铁1毫克(1毫克／毫升)。
(6)铁标准工作液(2微克／毫升)：吸取贮备液1毫升，置500毫升容量瓶中，定容至刻度。
操作步骤
1．样品的处理：称取均匀样品10．0克，置瓷坩埚中，在小火上炭化后，移入550℃马福炉中灰化成白色灰烬，取出，冷却，加入2毫升1∶1盐酸，在水浴上蒸干，再加入5毫升水，加热煮沸后移入100毫升容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
2．样品测定：吸取样品液5～10毫升，置50毫升比色管中，加入1毫升1∶9盐酸溶液，1毫升10%盐酸羟胺溶液，1毫升0．12%邻菲罗啉溶液，用50%醋酸钠溶液调节至pH3～5，然后用水稀释至50毫升，摇匀，以空白溶液调零，于721型分光光度计在510nm波长处，测其光密度。
3．标准曲线的绘制：准确吸取铁的标准工作液(2微克／毫升)0．0，1．0，2．0，3．0，4．0，5．0毫升，分别加入50毫升比色管中。加水至5毫升，然后按样品测定进行操作。测其各浓度标准溶液的光密度。
以光密度为纵坐标，各管铁含量为横坐标，绘制标准曲线。
4．计算：
式中：A：标准曲线查得的并计算每毫升样品液含铁量(微克)；
C：样品液总体积(毫升)；
W：样品重(克)；
1000：换算微克为毫克；
100．换算为百分含量。