血清甘油三脂简易测定法

出处:按学科分类—医药、卫生 中国科学技术出版社《食物营养分析实用手册》第65页(1033字)

血清甘油三脂用正庚烷——异丙醇混液抽提,用KOH溶液皂化,再进一步用过碘酸钠试剂氧化甘油生成甲醛,甲醛与乙酰丙酮试剂反应形成二氢二甲基吡啶黄色衍生物。可进行比色测定。

试剂

(1)正庚烷/异丙醇=2/3.5(V/V);

(2)0.04M硫酸溶液;

(3)异丙醇;

(4)皂化试剂:称6克KOH溶于60毫升蒸馏水中,再加异丙醇40毫升,混合,置棕色瓶中保存;

(5)氧化试剂:称650毫克过碘酸钠溶于100毫升蒸馏水中,加入77克醋酸铵,溶解后再加入60毫升冰醋酸,加水至1000毫升,置棕色瓶中保存;

(6)乙酰丙酮试剂:取0.4毫升乙酰丙酮加蒸馏水稀释至1000毫升,置棕色瓶中保存;

(7)标准液:准确称取三油酸甘油脂1克于100毫升容量瓶中,加正庚烷——异丙醇溶液至刻度(此液1毫升含10毫克样品)。临用时再以正庚烷——异丙醇稀释10倍。即得1毫升含1毫克三油酸甘油脂。此为应用液。冰箱保存。

操作步骤

1.样品处理:取3支试管,分别标以空白管、标准管、样品管。

空白管加入蒸馏水0.1毫升,标准管加入标准液0.1毫升,样品管加入血清0.1毫升,然后3支管分别各加入正庚烷——异丙醇1毫升。3支管再各加入0.04MH2SO40.3毫升。加毕剧烈振摇15秒钟。然后静置分层,吸上层液置另3支同样编号的试管中,各管均加异丙醇1毫升及皂化试剂0.2毫升,立即摇匀,65℃保温5分钟。

各管再加入氧化剂1毫升及乙酰丙酮试剂1毫升,充分混匀,65℃水浴保温15分钟,用冷水冷却,比色,以空白管调零,在420nm波长下,测其光密度值。

2.计算:

分享到: