蔗糖的测定

出处：按学科分类—医药、卫生 中国科学技术出版社《食物营养分析实用手册》第80页（1498字）

蒽酮比色法可测定饲料中蔗糖含量，而且可以在葡萄糖、果糖、蔗糖、淀粉存在下不经分离进行测定，这是因为稀碱与糖液共热时，可破坏果糖、葡萄糖，而蔗糖不被破坏。

此法操作简便，显色稳定，测定范围为5～80微克。但测定时要严格控制反应条件，反应温度和显色时间均影响显色度。

试剂

(1)蒽酮试剂：称0．4克蒽酮溶于100毫升88%硫酸中，流水冷却，当天配制使用。

(2)88%硫酸：市售分析纯浓硫酸(97%)，84份体积与16份体积水混合，置磨口瓶中。

(3)2N氢氧化钾溶液：称112．20克氢氧化钾溶于水中，并定容至1000毫升。

(4)蔗糖标准液：称分析纯蔗糖250毫克，用蒸馏水(或75%乙醇)溶解，并定容至250毫升容量瓶中(此液1毫克／1毫升)。

用移液管吸取以上溶液10毫升，定容至100毫升容量瓶中，此为100微克／毫升的标准蔗糖溶液。

操作步骤

1．标准曲线的绘制：取6支试管，分别加入蔗糖标准液0，0．20，0．40，0．60，0．80，1．00毫升。用蒸馏水补齐至2毫升。各试管含蔗糖量分别为：0，20，40，60，80，100微克。各试管中分别加入蒽酮试剂6．00毫升。混匀并立即置沸水浴中加热5分钟，取出立即在流水中冷却并不断摇动。在721型分光光度计中，以640nm波长测定其光密度，以光密度为纵坐标，蔗糖含量为横坐标，绘制标准曲线。

2．样品液的制备：称取干燥粉碎的样品0．2克。加5毫升蒸馏水在研钵中研磨，再以5毫升蒸馏水将研磨后的样品转移至离心管中，3000转／分离心5分钟，将上清液移入50毫升容量瓶中。将沉淀物用5毫升蒸馏水洗两次，每次均离心，将上清液合并于容量瓶中，并定容至50毫升。此为样品提取液。

3．样品的测定：取样品提取液10毫升，加入2NKOH2毫升，置沸水浴中10分钟，取出冷却至室温，加水稀释至50毫升，混匀。精确吸取稀释液2毫升于试管中，按标准曲线制备步骤加蒽酮试剂显色测定。根据测出的光密度值在标准曲线上查出蔗糖含量。

4．计算：

式中：A：从标准曲线上查得样品液蔗糖含量(微克)；

W：样品重量(克)；

2：样品稀释液体积(毫升)；

50：样品稀释液总体积(毫升)；

50：样品液总体积(毫升)；

10：用于氢氧化钾水解的样品液体积(毫升)；

10⁶：换算克为微克；

100：换算为百分含量。