寄生性鱼病标本收集

出处:按学科分类—农业科学 科学普及出版社《淡水养实用技术手册》第564页(2243字)

(1)原生动物性鱼病标本 收集、保存这类鱼病标本,要迅速处理病鱼材料,因大多数原生动物在鱼死后就开始崩解死亡。收集时最好能将在同一条鱼上发现的一种寄生虫,同时用三种不同的方法(即涂片、4%福尔林保存、固定切片用的器官组织)收集三套标本。如材料少,应先收集涂片标本,对于孢子虫类则应先收集福尔马林保存的标本。

涂片法:用镊子取少许粘液(或组织),在清洁的玻片上涂成薄片。然后把盖玻片涂面向下,平放在固定液里,必须使盖玻片浮在液面1分钟左右,再把盖玻片反过来,涂面向上沉入器皿底部固定15-20分钟。一般鞭毛虫宜用何氏液固定,纤毛虫宜用肖氏液固定,也可都采用葡翁氏液固定。如立即制成标本,就可进行染色,如不立刻制作,可放在酒精里保存。方法是:把涂片放在50%酒精中,1-2小时后最好更换酒精一、二次,除去固定液,最好放在70%酒精中保存。

(2)鱼类蠕虫标本

单殖吸虫 需在解剖镜下用解剖针将虫体从鳃上挑下来;绦虫和棘头虫往往头部钻入寄主的组织里,应用解剖针把虫体所附着的周围组织弄掉;复殖吸虫和线虫可直接用吸管吸出,放在盛有清水的玻皿里。

①用甘油胶胨或聚乙烯醇或贝氏胶把虫体封固。

②指环虫、三代虫等用4%的福尔马林溶液固定,双身虫用70%酒精固定。

③如来不及逐个把虫体取出,可将整个鳃或鳃片用5%福尔马林溶液保存。

复殖吸虫

①成虫和幼虫。收集复殖吸虫,无论从体表、体腔内、器官组织或器官里找到的寄生虫,用细镊子、解剖针或吸管把虫取出,先取出肉眼可见的种类,然后在放大镜下取出较小的种类。取出吸虫的孢囊时,要小心地把它从寄主组织内挑出,并放在玻片上,把膜压破。如果幼虫仍在孢囊中取不出来,可用吸管注水冲出。

收集的寄生虫,要把虫体上的粘液和组织的碎片等冲洗干净,否则虫体上的脏东西固定后无法冲去。用吸管冲洗时,要防止吸管把寄生虫带到另一个培养皿中去。

复殖吸虫的固定比较麻烦,要把吸虫在伸展状态时固定,应用两块载玻片,将洗干净的寄生虫,用吸管移置到载玻片上,如是小的吸虫,同一载玻片,可将许多个放在一起,用另一张盖玻片盖上,将虫体压平,再用线将两玻片轻轻地捆扎好,放在盛有70%酒精的培养皿里,让固定液徐徐透入里面。这样就同时固定许多虫体,待玻片里面的虫体内部完全表现白色,即表示固定液已透入虫体各组织,这时即可把线解开,取下盖玻片,用酒精将虫体冲下,保存在另一盛有70%酒精的标本管理,如寄生虫多,来不及采用上述方法固定,可直接保存在70%的酒精或葡翁氏液中。

②孢囊。小心地将吸虫的孢囊,它从寄主组织中取出,放在玻片上水滴里;用解剖针把孢囊膜撕破,或轻压盖玻片把膜压破,使幼虫出来,然后按上法固定。如数量多,可直接用酒精保存,或将整个组织保存。

绦虫

①把虫体从组织或器官中取出。在肠里或有些器官里的绦虫,头部钻进组织里面不易脱下来,取时常把虫体撕断,操作时要小心。可将虫体拉直,再轻轻拉一下,虫体即可从肠粘膜层里自行脱下。如果仍脱不下来,就要用解剖针将虫体所附着的周围组织撕破,再以吸管用力喷水,把虫的头部冲出,或浸在生理盐水或自来水里刺激虫体,让头部脱出。

②整体固定。为了使虫体从收缩变成伸展状态,在固定前,可把虫体放在水里,待虫体充分伸展时,再用固定复殖吸虫的办法,把虫体压在两块玻片里。但绦虫身体往往很长,因此在未压时,要把虫体尽量摆好,使它保持自然状态,压好后,注入70%的酒精,其余手续都和固定复殖吸虫相同。固定好的虫体,应保存在70%的酒精里。

③取虫体的头部1-2节,并在体前部和体后部各取下1-2个节片,用上法进行固定。

棘头虫 收集和固定方法和复殖吸虫相同。但要使吻部压出

线虫 固定时,一般先放在60-70℃的70%热酒精中烫直,再用70%酒精保存。而嗜子宫线虫或棍形线虫可用巴氏液直接固定和保存。

蛭类 用4-5%的福尔马林溶液固定保存。大多数标本用70%酒精麻醉固定和保存。

(3)甲壳动物和软体动物标本

软体动物幼虫 收集到的幼虫,可用70%酒精固定和保存。

甲壳动物 蚤、鯴、鱼怪等都用70%酒精或3-4%的福尔马林溶液固定,再用70%酒精保存。锚头蚤保存方法同上,但要注意勿拉断头部

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