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传染性喉气管炎

书籍:禽病手册

出处:按学科分类—农业科学 中国农业出版社《禽病手册》第272页(6054字)

传染性喉气管炎是由疱疹病毒Ⅰ型引起鸡的一种急性、接触性上呼吸道传染病。其特征为呼吸困难,咳嗽,咳出带血渗出物,喉部、气管黏膜肿胀、出血和糜烂。

本病传播快,死亡率高,已遍及世界许多养鸡国家和地区。

本病毒虽然只有一个血清型,但不同毒株间的毒力和致病性差异较大,给本病的控制带来一定难度。

一、诊检要点

(一)临床表现

潜伏期6~12天,人工气管内接种2~4天发病,本病特征症状为呼吸极度困难。病鸡表现精神沉郁,采食、饮水减少,少数鸡突然死亡,病鸡伏地伸颈、张口呼吸。表现流泪,流涕及呼吸有湿性啰音,摇头咳嗽,摇头欲咳出黏液状,有的鸡咳血,在嘴角沾有血液。严重时在鸡笼上、地上和水槽和料槽等部位可见到咳出的血痰。呼吸窘迫的鸡有时有喘鸣声,病鸡往往因过量分泌物积聚在喉头而窒息死亡。死鸡多呈仰卧状,鸡拉黄绿色稀薄粪便。鸡冠和肉髯呈紫色。感染毒力较弱的ILTV时,病鸡主要表现眼结膜炎,先有部分病鸡眼睛流泪,伴有结膜炎,鼻腔流出半透明渗出物,发病后期病鸡眼睑、眶下窦肿胀,眼睛分泌物由浆液性到脓性,后期病鸡日趋严重导致失明,产蛋鸡表现体弱和产蛋率降低,能引起雏鸡和育成鸡死亡,也能引起蛋鸡产蛋减少和死亡。一般经过10~14天全群恢复健康,但病程也可长达4~6周。

雏鸡发病,临床症状不典型。病鸡有呼吸道症状,眼流泪,死亡率5%~10%左右。病鸡多因呼吸困难窒息死亡。产蛋鸡发病,蛋壳褪色,软壳蛋增多。死亡率在3%~15%之间。

(二)病理变化

严重病死鸡嘴角和羽毛有血痰玷污。病鸡眼部肿胀,眼可挤出白色胶胨样物,眼结膜有出血性炎症。鼻腔内有血液或黏液,眶下窦肿胀,切开可见干酪样渗出物。鸡喉头和气管从浆液性炎症到出血性炎症,黏膜变性增厚和坏死,气管内有带血黏液,活鸡较轻。病程短、急性死亡鸡气管中上部黏膜有充血和出血点,病死鸡气管内有大量带血黏液或血凝块,支气管、肺和气囊也可出现炎症病变。病程长的病例喉头有干酪样栓塞,气管黏膜表面有黄白色干酪样假膜,剥去假膜后可见到溃疡面,个别鸡肺内积有血液或黏液,有的有局灶性肺炎。心冠脂肪及心内外膜有出血点。胸腹气囊皆有混浊,严重者气囊上有黄白色干酪样物。肝、脾略有肿大,其他无异常。发病产蛋鸡卵巢异常,出现软卵泡、出血卵泡或卵巢萎缩等。某些轻微病例,病变仅表现为结膜和眶下窦的水肿和出血。

感染初期显微镜检查,可见喉头和气管黏膜上皮细胞水肿和纤毛消失。2~3天后,黏膜层和黏膜下层出现淋巴细胞、组织细胞和浆细胞浸润,接着就是细胞破坏引起黏膜层和黏膜下层分离,继而引起出血。感染后12小时,可在气管、喉头黏膜上皮细胞内发现典型的嗜酸性核内包涵体。病鸡出现症状后48小时包涵体数量达到最多,同时出现多核巨细胞。发病4天后包涵体数量显着减少,病死鸡包涵体数量就更少了。

(三)流行特点

鸡是ILTV的主要自然宿主,野鸡也可自然感染。本病一年四季均可发生,但春、秋冬季交替时和冬季多发,各种日龄的鸡均可感染,尤其以成年鸡多见,表现特征症状。病鸡和带毒鸡是本病的主要传染源,康复鸡和强毒免疫鸡可长期带毒和排毒,排毒时间最长可达480天以上。本病潜伏期通常为2~6天,易感鸡群发生强毒株感染时潜伏期可缩短为1~2天,毒力较弱的毒株潜伏期可长达10~12天,本病发病率可达90%~100%,死亡率从5%~70%不等,平均为5%~20%。主要通过呼吸道和眼睛引起感染。健康鸡可通过呼吸道和眼睛接触和吸入含有病毒的分泌物、饲料、垫草饮水及用具等感染发病。本病一旦传入鸡群,则迅速传开。飞沫传播是本病的基本传播方式。人、野鸟、类、犬以及病毒污染的用具都可机械传播本病。感染ILTV的鸡胚在孵出前死亡。到目前为止尚无证据表明ILTV可垂直传播给雏鸡。

鸡群拥挤、通风不良、饲养管理差、维生素缺乏、寄生虫感染等均可促进本病的发生和流行。

一个鸡场没有发生本病时,不要用疫苗免疫。一旦发生本病,以后的鸡群就要全部免疫,但选用不恰当的疫苗或毒力太强的疫苗会诱导发病。

(四)实验室检查

1.病毒分离 应取发病早期的病鸡的喉头、气管黏膜的组织悬液经绒毛尿囊膜接种9~12日龄SPF鸡胚。视病毒含量和毒力强弱的不同,鸡胚于接种后3~10天死亡。但用病料接种的初代鸡胚往往不死亡。随着传代次数的增加,鸡胚存活时间越来越短,逐渐呈现规律性死亡。取死亡鸡胚的绒毛尿囊膜并混以尿囊液,经研磨、离心后取上清作为下一代接种物。接种后48小时可在鸡胚的绒毛尿囊膜上观察到散在的、边缘隆起、中央凹陷的痘斑样坏死灶。强毒株引起的痘斑坏死灶直径可达4~5毫米,弱毒株引起的坏死灶要小得多。以包涵体染色法检查坏死灶周围的组织,可发现典型的嗜酸性核内包涵体,鸡胚不仅用于病毒分离和传代,也可用于中和试验和毒力测定。

2.病毒鉴定 ILTV可在鸡胚肝细胞、肾细胞以及呼吸道上皮细胞和肺细胞内增殖,接种后3~5天产生典型的疱疹病毒性细胞病变,细胞呈灶状圆缩,形成多核巨细胞,直至脱落。在这些细胞培养中只传二代就能检测到ILTV。对感染的细胞培养物作包涵体染色,可检出典型的包涵体。取喉头或结膜置于洁净载玻片上,压上压片,挤压,分开后浸入甲醇中固定3~5分钟,姬姆萨染色2小时。自来水冲洗后,以无水甲醇脱色至品红色为止,冲洗后干燥、镜检。早期核内包涵体呈紫色或周围有晕轮的粉红色。也可作病理切片做出快速诊断。

根据临床症状和喉头及气管的病变可迅速做出诊断,与此同时,可用发病后2~3天病鸡的气管上皮作涂片,经姬姆萨染色检查嗜酸性核内包涵体,也可作为确诊的依据。检查核内包涵体还可用石蜡包埋、HE染色的传统方法,有资料表明,包涵体的检出率低于病毒分离率。Keller等(1962)对60份样品进行检查,包涵体的检出率为57%,而病毒分离率则为72%。用气管渗出物可组织悬液经气管内接种易感鸡和免疫鸡,也是一种可靠的诊断方法。

3.血清学试验 常用的有琼脂扩散试验法(AGP)、荧光抗体法(FA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)及中和试验(VN)。

(1)琼脂扩散试验(AGP):此法快速简便,但易感性不如FA、ELISA及VN。可用出现大片痘斑病变的鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)匀浆离心后的上清液,也可以用病变气管、喉头及渗出物来制备抗原。用1.5%琼脂、8%NaClpH7.2的PBS,内加0.01%的NaN3(或0.01%的硫柳汞)防腐,阳性抗原与阳性血清之间应在24小时内出现沉淀线。可用阳性抗原检查抗体也可用阳性血清检查病毒分离物。

(2)病毒中和试验(VN):此法既可检查ILT的特异抗体,也可检查ILT病毒抗原。血清分别与10倍系列稀释的病毒混合,室温作用1小时后接种9~11日龄的鸡胚CAM上或鸡胚肾细胞。在哪一个稀释度上病毒被中和时鸡胚CAM上无痘斑变化,证明此时血清的中和滴度为多少,在鸡群未免疫时从血清中查到抗体表明曾经发过或正在发病。此法可检出自然发病或人工感染鸡血清中的抗体。血清中和试验有“固定病毒-稀释血清法”和“固定血清-稀释病毒法”。检查鸡血清中是否有ILTV中和抗体常用“固定血清-稀释病毒法”。将已知ILTV悬液稀释为5个不同稀释度(10-2~10-6),每个稀释度的病毒与等量待检血清原液混合均匀,置37℃作用1~2小时以保证病毒和抗体充分中和。将经过血清中和的不同稀释度的病毒经绒毛尿囊膜接种9~12日龄SPF鸡胚4枚,每枚接种0.2毫升,同时以已知阴性血清作对照。5~6天后检查鸡胚绒毛尿囊膜上是否形成痘斑样坏死灶和水肿病变。以出现病变的血清中和病毒的最高稀释度为该病毒的中和感染价,然后计算出待检血清的抗体中和价。计算公式如下:

抗体中和价(用对数表示)=病毒和阴性血清的中和感染价-病毒和待检血清的中和感染价

检查ILT常用的血清学方法还有荧光抗体检查法(FA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)法和间接血凝试验法。

4.动物回归试验 接种易感鸡时可用气管内注入或喷雾法,试验鸡的呼吸道症状及死亡情况与病毒株的毒力及鸡的年龄、易感性及接种途径有关,接种后2~7天内可出现典型症状,并能从鸡体内分离到病毒。将有典型痘疹病变的鸡胚尿囊膜用研钵研碎,加3倍量生理盐水和双抗制成匀浆,接种健康公鸡,每鸡气管接种0.2毫升,可在2~4天均出现与自然发病鸡相同的症状。

5.类症鉴别要点

(1)白喉型鸡痘:气管黏膜增厚,有痘斑,不易剥离。皮肤型鸡痘在鸡体其他部位也可看到痘斑。

(2)传染性鼻炎:特征为流鼻液,脸部浮肿,使用抗生素有良好效果。

(3)卡氏住白细胞原虫病:发病有季节性,多在8~10月份时发病,严重时有口中流血的病鸡,且也有呼吸道症状,但咳嗽没那么严重,剖检病死鸡肝、脾肿大,在脏器表面、管腔外侧、脂肪等有出血囊或出血点或坏死灶,使用磺胺类药物治疗有效。

(4)禽流感:不同日龄鸡都会有发病,但以产蛋鸡发病较重,多见产蛋下降和较低的死亡率,但有并发症时死亡率较高,见有肿头,鸡冠和肉垂发绀,张口喘气,咳嗽,剖检气管充血和出血,内有黏液,少有血性黏液,也无咳血的鸡,腺胃出血,乳头有脓性分泌物,肠道出血,蛋鸡有卵黄性腹膜炎,肉鸡表现肝周炎,腹膜炎,心包炎。ILT无禽流感的出血性肠炎、腹膜炎、输卵管炎及脏器出血变化。

(5)新城疫:有呼吸道症状,气管充血或出血,但气管内一般无血性栓塞或黄白色干酪样物,新城疫有肠道和腺胃和肌胃及盲肠扁桃体的特殊性病理变化,死亡率高,在发病中后期有扭头,仰脖,瘫痪等神经症状。

二、防治

(一)治疗

本病无治疗方法,使用抗菌药物只是为了控制继发感染。防治本病有效的方法是加强管理和接种疫苗。

(1)对呼吸困难的鸡可用氢化可的松和青霉素、链霉素混合喷喉,缓解呼吸道症状,可大大降低死亡率。

(2)饲料或饮水中添加抗生素或肌肉注射抗生素以防止慢性呼吸道病、传染性鼻炎、大肠杆菌病等继发感染。

(3)饲料中多维素加倍,或在饮水中加电解多维消除应激反应。并且可单独在饲料中拌肝油,以促进气管上皮的完整性。

(4)发病早期用传染性喉气管炎活苗紧急接种,涂肛免疫最好,可控制疫情发展。

(二)预防

加强饲养管理,减少鸡的密度,防止病原侵入,一旦发病,病毒在鸡场不易根除。注意鸡舍的消毒卫生,可用0.3%过氧乙酸或者0.1%百毒杀喷雾消毒,每2天一次,同时注意鸡舍的保暖,克服保暖和通风换气的矛盾,减少鸡的密度,及时清粪和加强用具消毒。

新进鸡群可放入数只易感(哨兵)鸡与其同养,观察2周,不发病,证明不带毒时,方可混群饲养。病愈耐过康复鸡有一定的带毒、排毒时间,不得与易感鸡混养。要单独饲养。

由于康复鸡和接种疫苗特别是接种强毒疫苗的鸡可长期带毒、排毒,因此要避免易感鸡群与带毒鸡接触。受到污染的用具、饲料、人员等是传播本病的重要途径,生产中应给予足够重视。康复鸡免疫力至少可持续一年,甚至终生。疫苗接种的免疫期为半年到一年不等,视疫苗的毒力、接种量、接种途径的不同而异。ILTV疫苗的接种途径有泄殖腔涂抹、点眼、饮水、气雾、羽毛囊接种等。早期采用强毒涂抹泄殖腔预防本病。将自然发病的喉气管分泌物以50%甘油生理盐水作5~10倍稀释后涂抹于泄殖腔黏膜,4~7天后泄殖腔黏膜出现水肿或出血性炎症。这种方法虽然经济、有效,但危险性大,可造成强毒株长期存在,现在不主张使用了。使用弱毒疫苗免疫接种是控制本病的重要手段,常用的接种手段是点眼。这种方法不受鸡日龄的限制,但接种后少数鸡的眼睛出现炎症反应。气雾免疫虽有较好效果,但在幼鸡和青年鸡有可能引起强烈的疫苗反应甚至死亡,因此应当慎用。饮水免疫简单易行,但效果不稳定,故不太提倡使用饮水方法;要取得满意效果,一要使病毒维持足够浓度,二要保证水的质量,可在水中加入0.5%~1%的脱脂奶粉。小鸡应在断水后1~2小时接种,成鸡应断水4小时,4日龄以上的鸡均可使用饮水方式。

鸡群免疫后对ILTV的抵抗力以细胞免疫为主,母源抗体似乎不影响疫苗的免疫应答,但必须避免其他疫苗与ILTV活疫苗同时或在相近时间内使用。有实验表明,鸡只接种ILTV活疫苗后8天内使用新城疫疫苗,则ILTV疫苗的免疫应答明显受到新城疫疫苗的抑制。

由于鸡只接种ILTV活疫苗后可长期带毒、排毒,因此在非疫区应禁止使用。ILTV灭活疫苗可在生产中使用,相信这种疫苗对控制本病流行会发挥较大作用。

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