禽腺病毒Ⅲ群感染
出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《禽病手册》第288页（6844字）
●减蛋综合征(Egg Drop Syndrome，EDS－76)
减蛋综合征，是由腺病毒(Ⅲ群)引起蛋鸡的一种传染病。其特征为产蛋下降、产畸形蛋，劣质、薄壳、软壳或无壳蛋。van Eck等(1976)在荷兰首次发现本病，故称为EDS－76。目前，本病已遍布欧美各国及其他养禽国家。
一、诊检要点
(一)临床表现
最初的症状出现短暂的腹泻，鸡群呆滞，继而有色蛋的色泽消失，紧接着产出薄壳、软壳或无壳蛋。薄壳蛋壳质粗糙，象砂纸样或一端蛋壳有粗颗粒。褐壳蛋则蛋壳褪色，变薄、变脆，蛋白呈水样，蛋黄色淡，蛋白中混有血液。产蛋后期发病，则产蛋大幅度下降。发病一般持续8～12周，产蛋可减少40%，但在产蛋上通常存在后期补偿作用，总的产蛋损失量一般为每只鸡10～16枚。若由于潜伏病毒活化而发病，产蛋下降常在产蛋率达50%和高峰期之间出现，蛋较小。若在潜伏的病毒活化前鸡体内已产生抗体，则临床症候群稍有差异，有的鸡群不能达到预期的生产性能，或产蛋期推迟。鸡群一旦发生EDS－76，整个生产周期很难恢复到正常水平或达到产蛋高峰。该病的暴发通常在产蛋初期或产蛋高峰期。
(二)病理剖检
无明显特征病变，在自然发病鸡群常可见卵巢静止不发育和输卵管萎缩。在产无壳蛋或异常蛋的鸡，可见其输卵管及子宫黏膜肥厚，子宫皱褶水肿，腔内有白色渗出物或干酪样物，有时可见卵泡软化。其他脏器无明显变化。
(三)流行特点
本病主要易感动物是鸡，但自然宿主是鸭或鹅。火鸡、珍珠鸡也可感染。鸡通过与感染的野生或家养水禽直接或间接接触而感染。任何年龄、品种鸡均可感染，褐壳蛋鸡感染后表现严重。实验感染7～17天后开始出现症状。病毒分布于各内脏器官，以输卵管、消化道、呼吸道、肝、脾的病毒滴度最高。幼龄鸡感染后不表现任何症状，只有至开产后，由于产蛋初期的应激反应，致使病毒活化而使产蛋鸡患病。6～8月龄为该病高发期。
该病的传播可分为四种类型：①通过鸡胚垂直传播；②通过共同包装、蛋盘、不洁运输或饲料等引起的水平传播；③家养或野生鸭、鹅，也可能由其他野生禽类通过粪便污染饮水将病毒传给母鸡；④经接种污染的疫苗传播。
感染后3～4天病毒不在肠黏膜复制，而在全身的淋巴组织，尤其在脾和胸腺中繁殖，并侵害输卵管伞部，7～20天后，在输卵管狭部蛋壳分泌腺表层上皮细胞核内大量复制病毒，导致炎症反应，形成核内包涵体，使卵排出和蛋壳形成机能等发生紊乱，最终引起产蛋率下降，出现无壳、软壳等各种异常蛋。
(四)实验室检查
1．病原分离与鉴定
(1)样品采集：从患鸡的输卵管、变形卵泡、无壳软蛋，泄殖腔、鼻咽黏膜，肠内容物、粪便和白细胞等采集病料，冰冻保存备用。
(2)样品处理：
①输卵管、卵泡、泄殖腔、鼻咽黏膜等。研磨，加PBS2～5倍稀释，制成混悬液后，反复冻融2～3次，以3000转／分离心20分钟，取上清，加入青霉素、链霉素，37℃作用30分钟后作为接种材料。
②肠内容物、粪便。加PBS稀释后搅拌混匀，离心取上清，按2000单位／毫升加入青霉素、链霉素，37℃作用30分钟后作为接种材料。
(3)接种鸭胚或鸡胚肾细胞：分离EDSV－76的最敏感系统是非EDSV－76感染群的发育鸭胚或鹅胚及其细胞培养物。鸭胚或鹅胚不仅易感，而且可以排除鸡的其他多种病毒的生长，接毒后孵育数天后观察细胞病变及核内包涵体。
在EDS－76抗体阴性鸭场，选10日龄左右发育良好的鸭胚4枚，绒毛尿囊腔接种经上述处理过的材料0．2毫升／枚；另取2枚接种PBS0．2毫升／枚，作对照。37℃孵育。弃48小时内死亡的鸭胚，无菌收获接种后48～120小时死亡和存活的鸭胚尿囊液。用1%的鸡红细胞悬液测其血凝性，若收获的尿囊液能凝集红细胞，而对照鸭胚尿囊液不能凝集红细胞，则病毒分离为阳性；若不能凝集红细胞，则用尿囊液0．2毫升／枚再接种鸭胚进行盲传2代(鸡胚应盲传5代)。样品在鸭胚中盲传3代仍不发生凝集者可判为阴性。
(4)病毒的鉴定：上述病鸡脾脏等病料及细菌培养物，经苏木精－伊红染色后，可见到核内包涵体。在超薄切片中，核内的病毒颗粒和1－Ⅲ型包涵体明显。
EDS－76病毒分离物的鉴定以交叉HI为主，也可辅以AGP、NT等试验或电镜鉴定。在HI中，如果分离物的血凝活性被EDS－76阳性血清抑制，则病毒分离阳性；反之，为阴性。为了鉴别诊断，可与ND、IB的阳性血清同时作交叉HI。具体术式及结果如表6－5所示。
表6－5
2．血清学检查
(1)血凝抑制试验(HI)：是诊断EDS－76最常用的方法之一。本法可用于鸡群感染调查、抗体监测和病毒鉴定。用鸭胚或鸭胚细胞制备抗原。
(2)琼脂扩散试验(AGP)：用于检测EDS－76抗原或抗体(在1%琼脂板上进行)。
(3)病毒中和实验(VN)：用100个TCID50的病毒量，37℃作用1小时，以鸭或鸡细胞培养物为指示系统进行的SN，可用于EDS－76抗原或抗体的检测。
(4)酶联免疫吸附试验(ELISA)：是目前监测EDS－76抗体较常用的方法。用灭活的EDS－76抗原包被微量板，然后洗涤，加入稀释的待检血清，洗涤去未结合的非特异性抗体和其他杂蛋白，加酶标记的抗鸡IgG抗体，用底物显色后，终止反应，测OD值。颜色的深浅与样品中抗EDS－76抗体的含量成正比。
(五)类症鉴别要点
·传染性支气管炎：有呼吸道症状，多产畸形蛋，且蛋的形状、大小发生变化，蛋壳粗糙不光滑，有的蛋清水样化。
·非典型新城疫：可见有绿色腹泻，蛋的变化多为软壳蛋。
·传染性脑脊髓炎、鸡败血支原体病及包涵体肝炎等：产蛋率下降，但蛋质量基本正常。
二、防治
(一)治疗
本病尚无有效的治疗方法。发病时，为防止混合感染，可喂给抗菌药物。
(二)预防
1．一般预防措施 无EDS－76的清洁鸡场，要防止从疫场引种。从其他场引种后，须隔离观察一定时间，确定无病后方可入场混养。为预防经蛋传播本病，应从未感染本病的鸡群中留用种蛋。
感染鸡场要严格执行兽医卫生措施。为防止病禽在低滴度、间歇性排毒过程中水平传播，场内感染或未感染鸡群应严格隔离，及时淘汰血清学阳性鸡，做好鸡舍及周围环境卫生消毒。粪便合理处理，防止饲养管理用具混用。产蛋下降期的种蛋和异常蛋不要留作种用。加强鸡群的饲养管理，喂给平衡日粮，保证必需氨基酸、维生素和微量元素的平衡。此外，诱导换羽可以促进产蛋量的恢复。为防止河塘湖泊水源地区，本病由水禽传向鸡群，应改用井水或加氯处理用水。
2．免疫预防 预防接种是本病的主要防治措施。国内外已研制出减蛋综合征油佐剂灭活苗，也有与鸡新城疫、传染性支气管炎、传染性法氏囊病等组成的联合疫苗。在开产前2～4周注射，可以有效防止EDS－76的出现。
3．发病后紧急处理措施 感染鸡场要严格执行兽医卫生措施。鸡舍及周围环境彻底地清扫和消毒。对污染的蛋盘、包装箱等要彻底消毒处理。孵化室、工作人员和运输工具分开，至少应将使用的蛋盘和孵化器分开，并将孵化时间错开。
产蛋下降期的种蛋和异常蛋不留作种用。
(本部分作者为王君玮)
【附】心包积水－肝炎综合征
(Hydropericardium-hepatopathy Syndrome，HHS)
心包积水－肝炎综合征(HHS)是侵害鸡的一种急性传染病，特征是心包积液和多灶性肝脏坏死，以及发病率和死亡率高。目前，引起HHS的病原尚未确定，但有证据表明，致病性Ⅰ群禽腺病毒可引起本病，有人已从病鸡分离到了禽腺病毒Ⅰ群血清4型并复制出了本病。
HHS最早于1987年发生于巴基斯坦卡拉奇附近的安格拉，故也曾称为安格拉病。在印度则称为利奇病。本病除上述二国外，墨西哥、智利、伊拉克、秘鲁、日本和俄罗斯均报道诊断存在HHS，且有扩大趋势。对世界养禽者来说，深入了解本病的发生和防治，已成了十分紧迫的事。
一、诊检要点
(一)病原学
尽管引起HHS的特异性病原尚未确定，但有证据表明，致病性Ⅰ群禽腺病毒可引起本病。德国自由大学M．Hess等从南美厄瓜多尔和巴基斯坦几例包涵体肝炎(IBH)／心包积水综合征(HPS)分离到了禽腺病毒，证明为血清4型，血清分型证实拉美分离株为禽腺病毒Ⅰ群血清4型。用SPF鸡胚和组织培养法对病毒进行评价。据测定，9日龄鸡胚经卵黄囊接种的病毒回收率高于经尿囊或绒毛尿囊膜接种的病毒回收率。病鸡肝和肺抽提物与特异性抗腺病毒血清琼扩试验阳性，肝匀浆抽滤后经卵黄囊内和绒毛尿囊膜接种8日龄SPF鸡胚，接种后4～7天内可致死鸡胚。电镜检查肝匀浆发现典型的六角形病毒粒子。免疫组织化学检查病鸡肝脏证实存在直径65～70纳米为六面体病毒颗粒。研究发现肝悬液以正常条件下用不灭活腺病毒的乙醚或氯仿处理后失去感染性，而在60℃条件下处理30分钟(一般可灭活腺病毒)仍有感染性，这与其他腺病毒很不相同。肝匀浆45000转／分离心90分钟，其沉淀悬浮液具感染性，而上清液却没有，但往其中加入引起包涵体性肝炎的腺病毒后又有感染性，从而认为引起本病的病原除主要是腺病毒外，还有其他病毒，并可能是一种RNA病毒，在鸡肾细胞和肝细胞制备物中可产生小合胞体。
俄罗斯学者研究发现发育中的鸡胚可用来增殖心包积水综合征病毒(HSV)。用感染HSV的鸡胚肝脏10%上清液传染1～3次，琼扩抗原效价较低(1∶4)，传6～7代抗原效价达1∶16。
巴基斯坦和墨西哥分别以血清4型禽病毒分离株(PARC－1株)和血清8型腺病毒分离株(DCV－94株)实验复制了本病，实验感染鸡表现包涵体性肝炎和心包炎积水。血清4型腺病毒对淋巴组织具有亲嗜性，可引起免疫抑制。
(二)临床症状、病理变化
报道显示HHS多发于肉仔鸡，肉种鸡或蛋鸡也有发生。鸡受感染时的日龄愈小，病情愈严重，受感染鸡可以不表现任何前驱症状，感染后3天内就急性死亡。该病发病急，潜伏期为48～72小时，病程一般为7天，病鸡表现精神不振，羽毛成束，食欲减退，排黄色黏液样粪便，胸部伏地，皮肤和结膜苍白。剖检可发现皮下脂肪黄染。肝肿大，充血，黄染。部分肝脏表面出血，病鸡由于肝脏受损，白蛋白生产减少进而导致低蛋白血症，这可能有利于心包积水形成。心脏呈典型积水性心包炎，心包积有2～5毫升清亮的草黄色渗出液，心肌松软，心尖和心耳偶有出血点。肺充血、水肿。肾苍白，明显肿大，有时有淤血点。脾脏肿大，法氏囊萎缩。组织学检查可见肝细胞核中有嗜碱性包涵体，脾脏和法氏囊中淋巴细胞大量减少。红细胞计数表明病鸡严重贫血，可能是并发感染CIAV或IBDV所致，并伴有白细胞减少。此外，病鸡乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、丙氨酸转移酶升高，这与肝、肾损伤一致。该病多发生于3～8周龄肉仔鸡，死亡率可高达70%。父母代和产蛋鸡较少发生，蛋鸡病死率为2．6%～15．2%。
本病组织学病变主要见于心脏、肝脏和肾脏。表现为水肿、变性和坏死，伴有轻度的单核细胞浸润和红细胞外渗。
(三)流行病学
由于有证据表明Ⅰ群禽腺病毒是HHS的病原，因此推测HHS可垂直和水平传播，虽然证实了成年种鸡的心包积水综合征，但遗憾的是还没有资料证明肉鸡后代经垂直途径受到感染而生产性能下降。
腺病毒可潜伏于种鸡中，到成熟时在免疫抑制或应激影响后可排出病毒。感染本病母鸡的后代3周龄后可排毒，直到14周龄。有实验证明，在饲养有各种日龄的鸡群或无良好生物安全设备的试验场，由带毒鸡引起的水平传播是主要的传播形式。由于病毒是在肠道内复制，排出的粪便可污染衣物、鞋类及运输车辆、工具等设施。因此，商品化生产的养鸡场易扩散传播本病。有的养鸡场，由于缺乏生物安全设施，各种日龄鸡混养和密切频繁接触及活禽贸易，均有利于病毒传播。另外，源于病鸡鸡胚制备的污染疫苗也是潜在的传染源。
(四)实验室诊断
依据心包积水和肝细胞内含嗜碱性核内包涵体的组织病理学变化，可以较有把握诊断为HHS，而确诊仍有赖于腺病毒分离，目前腺病毒分离采取两种方法：鸡胚肝细胞培养和经卵黄囊接种8日龄鸡胚，前者较后者敏感。据腺病毒的特征性致细胞病变作用(CPE)可确定组织细胞培养物中腺病毒的存在。此外，还可借助负染电镜技术和血清中和试验证实和鉴定病毒。
二、防治
对HHS目前尚无特异性治疗措施，但据报道，其在发病鸡群饮水中加2．5%碘附溶液，使其浓度为0．07%～0．1%，可减轻病情和降低病死率。
已流行HHS的国家，就是采取严格的生物安全措施也不能避免腺病毒的传播，而在经济上也不合算。有的国家引起HHS流行的重要原因是饲养多种日龄鸡、活鸡交易、饲料运输和雇员家中也饲养鸡。因此，建议对种鸡群必须要制定切实可行的生物安全计划，避免传染HHS，如种鸡场应远离商品代鸡场至少2千米，实行全进全出制度，进雏前鸡舍应彻底消毒。
有试用免疫接种防治HHS的报道，但用于种鸡及其后裔的疫苗须严格按标准生产，不得含腺病毒及鸡传染性贫血病毒(CIAV)等病原。巴基斯坦曾应用肝匀浆经1%甲醛灭活疫苗，田间试验证明可以保护肉仔鸡，以超声波处理SPF鸡肝匀浆并用0．1%甲醛处理制备的灭活疫苗效果更好。田间应用证实，免疫鸡群因HHS引起的死亡率为1．2%，而未免疫鸡群为20%，在墨西哥对5种上市的HHS疫苗评价认为福尔马林灭活的油佐剂苗保护率达100%。免疫途径以皮下接种为好，不推荐肌肉免疫接种。