酶的使用安全要则

出处：按学科分类—工业技术 四川大学出版社《化学试剂技术管理应用手册》第253页（1296字）

1．为了保持酶的稳定性，必须储存于商品状况(冻干，悬浮硫酸铵)，不要稀释，按商品标签指定温度储存。

2．酶溶液和试验用缓冲液，必须用玻璃蒸馏器蒸馏的纯水。旧的过滤器或反渗透器纯水，可能含有痕量有机物，它可抑制酶的活力。

3．酶应储存于0℃～4℃，用时才用冷缓冲液或蒸馏水稀释。当存放酶溶液或悬浮体于工作台时，要保存于冷浴或冰盒。

4．稀释的酶溶液一般不稳定，应在使用前1至2小时内稀释用量，故酶不要稀释后长期存放。

5．不要振摇悬浮体(如硫酸铵)，这样会因氧化而使酶变性。慢慢旋转或在桌面上转动，可使其再成悬浮体，可以用吸管吸出悬浮体使用。酶悬浮体也可直接用于试验。

6．不要冻结悬浮体，在高盐状况下冻结和融化会使酶变性和损失活性。

7．瓶装冻干的酶(如酶因子的辅酶和辅酶Ⅱ)必须使其达到室温，可以防止水气结于粉末，以减少损失活性或解裂。若系吸湿性酶，由此可以全部损坏。

8．不要再冻结或融化已稀释的酶和冻干体溶液，每次只储少量溶液于+4℃。不同的酶稳定度差别较大。

9．要小心使用去污剂和保护剂，因它们可影响酶的活性，如叠氮钠抑制含血红素的酶(如过氧化酶)，去污剂浓度过高，可形成微胶粒，使酶夹沉和变性。

10．酶必须小心使用，防止有任何污染，用新的干净吸管吸取分装，绝不允许把未用完的酶放回母瓶。带手套，防止蛋白酶的污染，因手指常带有去氧核糖核酸酶、核糖核酸酶和抑制剂。不许用口吸吸管吸取。

11．把酶缓冲液的pH值调到使用的温度值，许多缓冲液pH值随温度变化很快[Tris，甘氨酰替甘氨酸，glycylglycine，Bes，Aces，Tes，二(乙-羟(基)替甘氨酸，Bicine，N-Z-羟乙基呱嗪-NZ-L烷磺酸Hepes]。如Tris缓冲液，温度升10℃，pH值减少0．3单位，Tris缓冲液在25℃时，pH值7．5，在4℃时，pH值8．1，或在37℃时，pH值7．2．温度每改变10℃，其pH值改变的缓冲液有：Aces为－0．2℃，Bes为－0．16℃，Biine为－0．18℃，Glycy1g1ycine为－0．28℃，Hepes为－0．14℃，Tes为－0．20℃。

12．由于酶含有Tyrosine和Tryptophane，在280nm光谱，广泛用于快速测定酶溶液的蛋白含量，若酶中含以上二种氨基酸很低，则280nm吸收不明显。(如Superoxide Dismutase，超氧物歧化酶。)