水貂肠炎病毒

出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《兽医微生物实验诊断手册》第604页（938字）

本病毒是猫细小病毒的一个亚种，引起水貂胃肠粘膜出血和腹泻。发病率和死亡率较高，尤其在幼貂。

一、样品采集

发病初期或急性濒死期貂的胃肠道及其内容物以及粪便含毒量均很高。也可采取肝、脾、心、肺等组织。

二、病毒分离

(一)细胞培养 原代猫肾细胞、貂肾细胞和猫肺细胞系FLF-3及猫肾细胞系NLFK均可用于病毒分离。

1．取病重水貂肾作细胞培养，营养液为10%的Eagle氏MEM。

2．待长成单层后，用0．25%胰酶分散细胞，与制备的正常水貂肾细胞混合培养。培养瓶中置入盖玻片，培养4天后取出作包涵体检查，可见核内嗜碱性包涵体。

3．在继代猫肾细胞分装培养瓶后数小时，接种上述混合培养物。培养3天，取出玻片作HE染色，可见明显的核内包涵体，也可用荧光抗体检测病毒。有时可见细胞呈现较微的CPE，若作连续传代，则CPE更明显。

(二)动物试验 水貂最易感，口服或肌注病料悬液3～5ml后2～5天发病，表现典型症状，有时可导致死亡。也可接种幼猫，11～16天出现拒食、呕吐和腹泻等症状。

三、血清学试验

(一)HA和HI试验 可参照犬细小病毒的HA和HI试验，但稀释液的pH值最好在6．0～6．5。粪便样品无须经2-巯基乙醇处理。

(二)中和试验 待检血清作对倍稀释后与等量1×104TCID₅₀／ml的水貂肠炎病毒或猫泛白细胞减少症病毒混合，37℃感作1h后，接种于继代猫肾细胞或FLF-3细胞。用HE或荧光抗体染色法检测。

(三)琼扩试验 用0．03mol／L硼酸盐缓冲液(pH8．3)或0．015mol／L，pH7．3PBS配制1%琼脂糖，制板打孔加样，室温下孵育48～72h后，观察沉淀线。