甲病毒属
出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《兽医微生物实验诊断手册》第676页（2844字）
本属原称虫媒病毒A群，所有成员都能在昆虫体内增殖。具有凝集鹅、鸽和新生雏鸡红细胞的能力，但血凝素易于失活，且血凝反应发生在较窄的pH范围内。甲病毒共有一种可溶性的A抗原，可用补体结合试验和琼脂扩散试验测出。属内“种”的鉴定，主要依靠中和试验，包括交叉免疫保护试验和空斑抑制试验。本属病毒能适应许多种细胞培养，在大多数脊椎动物细胞培养中产生病变，在非脊椎动物细胞中多数不产生病变。
一、东部型和西部型马脑脊髓炎病毒(Eastern and western equine encephalomyelitis virus，EEEV和WEEV)
这两种病毒对人畜均有较高的病原性，除美洲外，在欧、亚马匹中也发现过阳性血清反应，故仍受到高度重视。该病毒可在一些野鸟、小啮齿动物、爬行类和两栖类动物引起隐性感染。均由蚊子叮咬才偶尔引起马和人的感染，马是靶宿主，经常发生大规模的流行，但发病率一般不超过20～30%。东部型的死亡率可高达90%，西部型约20～30%，有时高达50%。这两种病毒引起的症状类似，但在免疫学上是不同的。
(一)样品采集 患畜急性期和恢复期的血、马和其他宿主的脑以及蚊组织，必须新鲜，最好扑杀濒死期患畜，立即取出脑组织，迅速冷藏，并尽快送至实验室，必要时浸泡于50%中性甘油盐水中。实验室收到标本后，用0．5%乳蛋白水解物(以Hanks液配制)磨成10%乳剂，2000r／min离心15min，取上清液加入青、链霉素。早期患畜的血液用以分离病毒时，用肝素抗凝，切勿用枸橼酸钠，以免脑内注射时引起惊厥。
(二)病毒分离
1．细胞培养 以原代鸭胚(鸡胚)细胞和仓鼠肾细胞为最敏感，将待检材料在维持液内作成10-2～10-5稀释，按常规接种，观察5天，发现有细胞病变时即可收获，供进一步传代或鉴定用。接种高浓度病毒有时反而不产生细胞病变。由于披膜病毒对酸敏感，可在细胞培养过程中定期追加适量碳酸氢钠液，使pH值保持在7．6～7．8左右。
2．鸡胚接种 可将0．1～0．2ml待检材料接种于9～10日龄鸡胚绒尿膜上，也可注入尿囊腔内。鸡胚通常．在18～48h内死亡，胚体和绒尿膜内经常含有大量病毒。
3．实验动物
(1)小白鼠 可用3周龄小白鼠(乳鼠更为敏感)作脑内接种。作皮下——脑内同时接种时，用左手拇指和食指按住乳鼠，右手持注射器由背部稍偏中线处进针到皮下，注射0．3ml，再继续向前刺入大脑半球，接种0．02ml。脑内和腹腔内(0．2～0．3ml)同时接种，效果更好。接种后每天观察1～2次，直至第10天。小白鼠常在3～5天内发病，表现被毛逆立，弓背、畏寒(钻入垫料中)、离群、抽搐、痉挛并死亡。
(2)豚鼠 选用150～200g幼豚鼠，脑内接种0．1～0．2ml，通常于3～4天内发病死亡。也可作皮下和腹腔注射，但分离率不如脑内。
(3)新生雏鸡 刚出壳的雏鸡极为敏感，特别是在脑内接种，是初次分离的理想工具，能从越冬动物血液和蚊体内分离到微量病毒。
4．病毒抗原的检出 濒死期或死亡动物的脑组织作为抗原，用标准免疫血清进行常规的补体结合试验，检查其抗原性。也可用放射免疫测定法。
(三)血清学试验 血凝抑制抗体与中和抗体的出现较早，一般在发病后7天检出，并可持续几个月之久。补体结合抗体出现较晚，必须在发病后10天以上才能检出，维持时间较短，约几个星期。抗体检测主要用于流行病学调查。对于临床病例的诊断，则应采取急性期和恢复期的双份血清，比较两者的抗体效价。
二、委内瑞拉马脑脊髓炎病毒(Venezuelan equine encephalomyelitis virus，VEEV)
本病毒主要发现于南美、中美以及美国南部。马属动物最易感，人比较易感，实验室工作人员常可发生气溶胶感染。在病马的鼻、眼、口腔分泌物，尿和乳汁中均可发现病毒。能通过接触感染。由于人与马在感染后都会发生高滴度的病毒血症，而病毒能在蚊体内增殖，因此蚊子的叮咬可使本病在人、马中扩散。
本病毒可分为四个抗原型(I-IV)，第Ⅰ型又包括四个亚型(A-D)，其中以IA-C毒力最强。
(一)样本采集 病初采血液、死后取脑和脾。在调查疫原地野鼠的带毒状态时，采其脑、脾、肝、肾等混合乳剂。
1．细胞培养 仓鼠肾、鸡胚或鸭胚原代细胞，Vero、BHK21等细胞系均可作病毒分离。细胞通常在接毒后48小时左右出现细胞病变。
2．鸡胚 接种7～9日胚龄的卵黄囊内或9～12日胚龄的绒尿膜上。鸡胚通常在48h内死亡，死亡的鸡胚出血。
3．实验动物
(1)新出壳雏鸡脑内接种，可提高病毒分离率。
(2)乳小鼠、幼豚鼠作脑内或脑内一皮下接种，是较常用的病毒分离方法。
4．强弱毒株的区分 要鉴定分离株是强毒抑或弱毒，可人工接种马匹观察发病情况。此外强毒株的血凝价在pH6时明显上升。强毒株在Ver0细胞培养上形成小空斑，弱毒株形成边缘不清晰的大空斑。
(二)血清学试验 特异性抗原检测的意义和方法，同东部型和西部型马脑脊髓炎病毒。
三、生理基森林病毒(Semliki forest virus)
本病毒与疾病的关系尚未确定，从很多种蚊虫和某些没有临床症状的鸟类和动物中分离出来。本病毒见于非洲，东南亚和南欧可能也有存在。
接种鸡胚可使其死亡，能在狗、猪、仓鼠、豚鼠和鸡的细胞培养上生长并形成空斑。当以各种途径人工接种小白鼠，或以脑内接种豚鼠、兔和猴，均可引起脑炎。
在血凝抑制试验中，它与本属其他病毒有交叉反应。