制片方法

出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农作物品种鉴定手册》第66页（873字）

1．表皮细胞切片的制作 先将种子放入指形管里，加水浸2－4小时，取出用解剖针和镊子剥下种皮，然后浸入10%硝酸溶液里脱色30分钟，取出种皮平铺在载玻片上，表面朝上，滴上一滴10%甘油，加上盖玻片，上面放上二层滤纸，用指头压下，并用铅笔橡皮头轻轻敲，排除玻片之间汽泡，尽可能使表皮平展，再移到显微镜下或透射光下观察，可先在低倍下观察网纹，然后放在高倍(132倍)下观察栅栏层细胞腔，并绘图，按细胞形态的差异鉴定品种。

2．种皮横切片的制作 先将种子放入潮湿条件下24小时，使种皮软化，再放入96%酒精中浸2小时进行脱水，然后将种子埋入石蜡块。其具体方法是取一长方形小纸盒，细心地将其内部涂上甘油，然后将溶解的石蜡注入小盒内，为了加快石蜡冷却，可将盛有石蜡的纸盒放入水中。当石蜡刚变硬，即将小纸盒拿去。再在石蜡块上，用针作一与种子长度相等的凹缝，小心地将种子插入其中，并用热针以溶解石蜡将种子封闭。

当石蜡凝结后，可用刀片或切片机制作切片。用切片机切片时，切片厚度以0．005－0．03mm为宜。或者用刀片作切片时，将刀片轻轻滑动，要使切出的切片尽可能薄些。

为了使切片与石蜡分离，须用在水中、醚中、甲苯或二甲苯中湿润过的毛笔，粘起切成的切片放于载玻片上的一滴甘油内，盖上盖玻片，然后将制成的切片置于显微镜下观察。

【参考文献】：

〔1〕刘长江(1984)，十字花科芸薹属和欧白芥属种子形态及鉴别方法的研究，《种子》杂志，1∶26－30。

〔2〕(苏)菲尔索娃着(1956)，种子检验和研究方法，农业出版社。

〔3〕中村俊一郎(1982)，农林种子生理学讲座(29)，农业と园芸，57∶(5)∶109－110。