制片方法
出处:按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农作物品种鉴定手册》第66页(873字)
1.表皮细胞切片的制作 先将种子放入指形管里,加水浸2-4小时,取出用解剖针和镊子剥下种皮,然后浸入10%硝酸溶液里脱色30分钟,取出种皮平铺在载玻片上,表面朝上,滴上一滴10%甘油,加上盖玻片,上面放上二层滤纸,用指头压下,并用铅笔橡皮头轻轻敲,排除玻片之间汽泡,尽可能使表皮平展,再移到显微镜下或透射光下观察,可先在低倍下观察网纹,然后放在高倍(132倍)下观察栅栏层细胞腔,并绘图,按细胞形态的差异鉴定品种。
2.种皮横切片的制作 先将种子放入潮湿条件下24小时,使种皮软化,再放入96%酒精中浸2小时进行脱水,然后将种子埋入石蜡块。其具体方法是取一长方形小纸盒,细心地将其内部涂上甘油,然后将溶解的石蜡注入小盒内,为了加快石蜡冷却,可将盛有石蜡的纸盒放入水中。当石蜡刚变硬,即将小纸盒拿去。再在石蜡块上,用针作一与种子长度相等的凹缝,小心地将种子插入其中,并用热针以溶解石蜡将种子封闭。
当石蜡凝结后,可用刀片或切片机制作切片。用切片机切片时,切片厚度以0.005-0.03mm为宜。或者用刀片作切片时,将刀片轻轻滑动,要使切出的切片尽可能薄些。
为了使切片与石蜡分离,须用在水中、醚中、甲苯或二甲苯中湿润过的毛笔,粘起切成的切片放于载玻片上的一滴甘油内,盖上盖玻片,然后将制成的切片置于显微镜下观察。
【参考文献】:
〔1〕刘长江(1984),十字花科芸薹属和欧白芥属种子形态及鉴别方法的研究,《种子》杂志,1∶26-30。
〔2〕(苏)菲尔索娃着(1956),种子检验和研究方法,农业出版社。
〔3〕中村俊一郎(1982),农林种子生理学讲座(29),农业と园芸,57∶(5)∶109-110。