棉籽、植株和土壤中残留量检测方法
出处:按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农药残留量实用检测方法手册第3卷》第239页(2262字)
天津市农业科学院中心实验室 郭永泽 张玉婷 刘凤来 宋淑荣 石守良
棉籽用丙酮提取,植株与土壤用丙酮/甲醇提取,弗罗里硅土柱层析净化,液相色谱法(UV)测定。
1.主要仪器及设备
高效液相色谱仪 紫外检测器(UV)
旋转蒸发器
空气浴振荡器
样本粉碎机
2.主要试剂
丙酮(重蒸)、甲醇(重蒸)、二氯甲烷(重蒸)
弗罗里硅土(Florisil) 80~100目,130℃烘5h,加5%水减活
颗粒活性炭 盐酸洗,煮沸1h,冷却后洗至中性
水 重蒸馏两次,0.45μm滤膜过滤
萎锈灵标准品、福美双标准品
3.检测步骤
3.1 土壤
3.1.1 提取
称取20g样本于三角瓶中,加50mL丙酮/甲醇(1∶1,V/V),振荡提取2h。用装有无水硫酸钠的漏斗过滤。滤渣用150mL丙酮/甲醇(1∶1,V/V)洗涤3次,合并滤液浓缩至近干。用甲醇/丙酮(10∶1,V/V)定容至4mL,待测。
3.2 植株
3.2.1 提取
称取20g切碎的样本于三角瓶中,加75mL丙酮,振荡提取2h,过滤。滤渣用50mL二氯甲烷分3次洗涤。合并滤液转移到分液漏斗中,加30mL3%氯化钠溶液,用50mL×3二氯甲烷萃取。合并二氯甲烷相,浓缩。
3.2.2 柱层析净化
在层析柱中依次装入2cm无水硫酸钠、6g弗罗里硅土、2g活性炭、1g助滤剂和2cm无水硫酸钠。用150mL二氯甲烷洗脱,收集全部洗脱液,浓缩近干,用甲醇/丙酮(10/1,V/V)溶液定容至4mL,待测。
3.3 棉籽
3.3.1 提取
称取20g粉碎样本于三角瓶中,加50mL丙酮/甲醇(1∶1,V/V),振荡提取2h,用装有30g无水硫酸钠的漏斗过滤。滤渣用150mL丙酮/甲醇(1∶1,V/V)溶液洗涤3次。合并滤液,浓缩。
3.3.2 净化
在层析柱中依次装入2cm无水硫酸钠、6g弗罗里硅土、1g活性炭和2cm无水硫酸钠。将浓缩液转移到柱中,用150mL丙酮/甲醇(1∶1,V/V)溶液淋洗并收集洗脱液,浓缩至近干,用甲醇/丙酮(10∶1,V/V)溶液定容至4mL,待测。
3.4 液相色谱法测定
检测器 UV
波长 254nm
色谱柱 KromasilC18,4.6mm×250mm,5μm
柱温 30℃
流动相 甲醇/水(60∶40,V/V)
流速 1mL/min
保留时间 萎锈灵6.80min,福美双5.36min
4.结果计算
外标(峰面积)-标准曲线法定量
5.灵敏度、准确度和精确度
最小检出量 萎锈灵4.6×10-10g,福美双7.9×10-10g。
最低检测浓度 萎锈灵0.036mg/kg,福美双0.062mg/kg。
回收率 棉花植株、土壤和棉籽中添加萎锈灵和福美双0.05~5.00mg/kg时,平均回收率分别为萎锈灵86.0%~93.3%,福美双83.3%~90.8%。见表2-3-1。
相对标准偏差 0.9%~5.7%,见表2-3-1。
表2-3-1 棉花植株、土壤和棉籽中萎锈灵、福美双添加回收率及相对标准偏差实验结果