小麦籽粒、植株和土壤中残留量检测方法

出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农药残留量实用检测方法手册第3卷》第425页（2825字）

北京市农林科学院植物保护环境保护研究所 陈家梅 戴荣彩 夏福利 王漫琳

小麦籽粒、土壤用二氯甲烷提取，植株用丙酮提取，柱层析净化，液相色谱法(UV)测定。

1．主要仪器及设备

液相色谱仪 紫外检测器(UV)

旋转蒸发器

振荡器

超声波清洗器

真空泵

层析柱 Φ12mm×200mm

2．主要试剂

丙酮、石油醚、二氯甲烷、甲醇、乙腈、盐酸、氢氧化钠、无水硫酸钠、氯化钠、中性氧化铝、弗罗里硅土、SPE-C₁₈柱

甲醇碱溶液 甲醇／0．05mol／L氢氧化钠(30∶70，V／V)

乙腈碱溶液 乙腈／0．025mol／L氢氧化钠(30∶70，V／V)

酰嘧磺隆标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 植株

称取5g茎叶于500mL具塞三角瓶中，加入50mL丙酮水溶液，浸泡过夜，振荡提取30min，抽滤、洗涤。合并滤液用旋转蒸发器浓缩至近干。加10mL0．05mol／L氢氧化钠用超声波溶解残留物，并用此溶液定容至25mL。

3．1．2 麦粉

称取10g麦粉于500mL具塞三角瓶中，加入90mL丙酮水溶液，浸泡过夜，振荡提取30min，抽滤，用旋转蒸发器蒸去丙酮。

3．1．3 土壤

称取20g样本于500mL具塞三角瓶中，加入90mL丙酮／水(9∶1，V／V)浸泡过夜，振荡提取30min，抽滤，在旋转蒸发器上蒸去丙酮。

3．2 净化

3．2．1 植株

吸取10mL定容后的提取液于50mL离心管内，离心分离(4000r／min)，吸出上清液。再用5mL0．05mol／L氢氧化钠溶液洗涤残渣，离心分离。合并上清液。

用5mL甲醇和10mL0．05mol／L氢氧化钠溶液预淋SPE-C₁₈柱。将合并后的上清液转入柱中，用真空泵从柱底部抽干C₁₈柱，弃去抽出液。用20mL甲醇碱溶液洗脱，收集全部洗脱液至150mL分液漏斗中，调节pH3～3．5，用25mL、10mL二氯甲烷萃取，合并二氯甲烷相，经无水硫酸钠脱水后，用旋转蒸发器浓缩至干，用乙腈碱溶液溶解并定容至1mL。

3．2．2 麦粉

将残余水溶液转入250mL分液漏斗中，加入10mL0．05mol／L氢氧化钠溶液、50mL饱和氯化钠溶液和10mL石油醚，振荡2min，弃去石油醚相。调节pH3～3．5后，分别用25mL、10mL二氯甲烷萃取，合并二氯甲烷相，经无水硫酸钠脱水后，用旋转蒸发器浓缩至近干。

在层析柱中依次填充无水硫酸钠、5g中性氧化铝、5g弗罗里硅土、0．2g活性炭／助滤剂545(1∶5，W／W)和无水硫酸钠。用少量甲醇／二氯甲烷(8∶92，V／V)淋洗液预淋净化柱。将提取浓缩液转入柱顶，再用70mL淋洗液洗脱，收集全部洗脱液，用旋转蒸发器浓缩至近干，用乙腈碱溶液定容至2．5mL。

3．2．3 土壤

将残余水溶液转入150mL分液漏斗中，加入10mL0．05mol／L氢氧化钠溶液、10mL石油醚，振荡2min，弃去石油醚相。调节pH3～3．5，用25mL、10mL二氯甲烷萃取，合并二氯甲烷相，经无水硫酸钠脱水后，用旋转蒸发器浓缩至近干。以下柱净化步骤同麦粉，定容至4mL。

3．3 液相色谱法测定

检测器 UV

波长 238nm

色谱柱 ZorbaxODS4．6mm×250mm×5μm

柱温 50℃

流动相A 1．61g四丁基溴化铵溶于900mL水中，调pH5，加100mL乙腈

流动相B 1．61g四丁基溴化铵溶于500mL水中，调pH5，加500mL乙腈

流速 1．0mL／min

流动相梯度程序：

4．结果计算

外标(峰高)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 0．8×10^－9g。

最低检测浓度 麦粉0．01mg／kg，茎叶0．02mg／kg，土壤0．008mg／kg。

回收率 麦粉、茎叶、土壤中添加酰嘧磺隆0．05～1．00mg／kg时，平均回收率为89．9%～98．2%，见表3-4-1。

相对标准偏差 1．9%～12．6%，见表3-4-

表3-4-1 小麦籽粒、植株和土壤中酰嘧磺隆添加回收率及相对标准偏差实验结果