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基因定位

书籍:方法大辞典

出处:按学科分类—自然科学总论 山东人民出版社《方法大辞典》第260页(1015字)

基因所属连锁群或染色体的测定,以及基因在染色体上位置的测定,统称为基因定位。

是遗传学研究中的一项基本工作。通过基因定位可有助于基因功能的研究以及染色体行为的了解。1913年C·B·布里季斯首先在果蝇中证实了白眼基因是在x染色体上。

同年A·H·斯特蒂文根据两个基因之间距离愈远则交换频率愈高这一假设,首先在果蝇中进行了基因定位工作。

测定基因所属连锁群或染色体的主要方法有以下几种:(1)系谱分析法是早期人类遗传学研究中根据家系的遗传分析来判断基因所属染色体。一般只能确定基因所属于性染色体或常染色体,但不能分析其属于哪一种常染色体。

(2)非正倍体测定法根据常染色体隐性突变型纯合体与野生二倍体杂交的子一代与隐性亲本回交后子代中野生型与突变型之比例来判断基因所属哪个染色体。(3)四分体分析通过有性孢子微生物双基因杂交后子代中出现亲代二型(PD)、非亲代二型(NPD)以及四型(T)的比例分析两个基因是否连锁。

(4)连锁群法着丝粒距离测定,体细胞杂交合纯合二倍体频率的多少均可判断基因所属连锁群。

(5)染色体易位的基因定位易位可以使染色体上的基因改变连锁关系,利用染色体易位可判断基因的连锁关系。

基因在染色体上位置的测定主要有以下几种方法:(1)重组频率的基因定位同一染色体上两个基因之间距离愈远,则发生交换的机会愈多,杂交子代中重组体也愈多,反之则少。计算出杂交子代重组体出现的多少,就可以知道有关基因的距离,从而确定出基因的位置及基因的顺序,这是最基本的定位法,以1%重组体定为一个图距单位,也称为一个分摩。

这一原理同样适用于单位体微生物中的杂交、转化与转导。还包括1913年斯特蒂文特道创的三点测验法,50年代泰科尔沃发现的体细胞杂交有丝分裂定位法等。(2)根据并发事件的基因定位 由位置邻近的基因所表现出来的某些相关性来推测基因的位置,例如共转导法。

(3)根据基因行为定位,例如细菌的中断杂交及自然梯度转移基因定位法。

(4)测定绝对位置的基因定位方法,有通过细胞遗传学方法测定的基因实际位置所绘制的基因染色体图即细胞学图,以及用限制图谱和变化图谱绘制的染色体物理图谱。(5)利用DNA重组体技术法测定基因文库中各个DNA片段结合染色体显带技术后来确定基因在染色体上的实际位置。

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