菌种保藏技术

出处：按学科分类—自然科学总论 山东人民出版社《方法大辞典》第262页（816字）

按人们的不同要求把从自然界分离的野生型纯种和经过人工选育的优良菌种，使其长期存活，不丢失，不污染杂菌、不发生或少发生变异，保持菌种原有的各种生理和遗传性状的不同方式的菌种保藏方法，称为菌种保藏技术。

保藏的基本原理是使微生物生命活动处于半永久性的休眠状态，使微生物的新陈化谢作用限制在最低范围内。干燥、低温和隔绝空气是保证获得这种状态的主要措施。有针对性的创造干燥、低温和隔绝空气的外界条件，是微生物菌种保藏的基本手段。

根据菌种的不同和保藏条件的不同，常用的保藏技术有以下几种：(1)斜面传代法 适用于各类微生物的短期保存，把微生物接种到所需斜面培养基上适温培养，长出菌落后置4℃冰箱或冷库保藏，保存期一般是3－6个月。(2)矿油保藏法 适用于酵母菌和不易形成孢子真菌的保存。在长好菌的斜面上灌上无菌、去水的无色中性液体石蜡油(比重0．865－0．890)至斜面顶部(约试管长的1／3)，4℃低温、干燥保藏。矿油可防止培养基失水，干燥又隔绝空气，使菌种代谢速率降低，便于长期保存，保存期一般是2－10年。(3)沙管保藏技术 适用有孢子微生物(放线菌、真菌、芽孢细菌)的保存，是把培养好的微生物孢子接入处理过的、灭菌的沙土管中，干燥后置于4℃低温保藏，保藏期一般是几年至十几年。

(4)冷冻真空干燥法 将培养好的微生物制成菌悬液，然后加入一定的保护剂进行冷冻，真空干燥，低温或室温保存，适用于各类微生物，具有大最保藏、存活期长，不污染等优点，是理想的微生物保藏方法之一。

(5)液氮超低温保藏法 是把微生物培养物制成菌悬液置于保护剂中预冻后在液氮超低温(－196℃)中保藏的技术。这是最理想、最先进的菌种保藏技术，国外某些菌种保藏机构已作为常规方法应用，适用于各类微生物的保存，具有长期保藏、变异很小的优点。但设备昂贵，且须可靠的液氮来源。