霉菌的检验
出处:按学科分类—工业技术 中国轻工业出版社《焙烤工业实用手册》第641页(1385字)
1.培养基和试剂
(1)马铃薯葡萄糖琼脂(PDA),附加抗菌素,按本节九 (三)31规定。
(2)孟加拉红培养基:按本节九 (三)32规定。
(3)高盐察氏培养基:按本节九 (三)30规定。
(4)灭菌蒸馏水。
(5)乙醇。
2.检验程序
霉菌检验程序见图4-2-14。
图4-2-14 霉菌检验程序
3.操作步骤
(1)采样:取样时需特别注意样品的代表性和避免采样时的污染。首先准备好灭菌容器和采样工具,如粮食(包括粮库贮粮,粮店或家庭小量存粮)样品的采集,可根据粮囤或粮垛的大小和类型,分层定点取样,一般可分三层五点,或分层随机采取不同点的样品,充分混合后,取500g左右送检。小量存粮可使用金属小勺采取上、中、下各部位的混合样品。
海运进口粮的采样:每一船舱采取表层、上层、中层及下层4个样品,每层从五点取样混合,如船舱盛粮超过10000t,则应加采一个样品。必要时采取有疑问的样品送检。
谷物加工制品(包括熟饭、糕点、面包等)、发酵食品、乳及乳制品以及其他液体食品,用灭菌工具采集可疑霉变食品250g,装入灭菌容器内送检。
(2)以无菌操作称取检样25g(或25mL),放入含有225mL灭菌水的玻塞三角瓶中,振摇30min,即为1∶10稀释液。
(3)用灭菌吸管吸取1∶10稀释液10mL,注入管中,另用带橡皮乳头的1mL灭菌吸管反复吹吸50次,使霉菌孢子充分散开。
(4)取1mL1∶10稀释液注入含有9mL灭菌水的试管中,另换一支1mL灭菌吸管吹吸5次,此液为1∶100稀释液。
(5)按上述操作顺序做10倍递增稀释液,每稀释一次,换用一支1mL灭菌吸管,根据对样品污染情况的估计,选择了3个合适的稀释度,分别在做10倍稀释的同时,吸取1mL稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做2个平皿,然后将晾至45℃左右的培养基注入平皿中,待琼脂凝固后,倒置于25~28℃恒温箱中,3d后开始观察,共培养观察5d。
(6)计算方法:通常选择菌落数在10~150的平皿进行计数,同稀释度的2个平皿的菌落平均数乘以稀释倍数,即为每克(或毫升)检样中所含霉菌和酵母数。
(7)报告:每克(或毫升)食品所含霉菌和酵母数以个/g(个/mL)表示。