抗坏血酸(维生素C)含量的测定(2，6－二氯靛酚钠滴定法)

出处：按学科分类—农业科学 中国轻工业出版社《果蔬保鲜手册》第118页（1859字）

1．方法原理

抗坏血酸(维生素C)是水果和蔬菜中所特有的，并有还原型和脱氢型2种。还原型抗坏血酸分子结构中有烯醇(COH=COH)存在，故为一种极敏感的还原剂，它可失去两原子氢而氧化为脱氢型抗坏血酸。利用染料2，6－二氯靛酚钠作为氧化剂，可以氧化抗坏血酸而其本身亦被还原成无色的衍生物。

2，6－二氯靛酚钠盐(C1₂H₆O₂NCl₂Na)易溶于水，其碱性或中性水溶液呈深蓝色，在酸性介质中呈浅红色。用蓝色的碱性染料标准溶液，对含维生素C的酸性浸出液进行氧化还原滴定，染料被还原为无色，当到达滴定终点时，多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色，根据染料用量就可计算样品中还原型抗坏血酸含量。

2．仪器与试剂

(1)仪器。高速组织捣碎机(8000～12000r／min)、分析天平、10mL和25mL酸式滴定管、100mL容量瓶、50mL和100mL三角瓶、50mL和250mL烧杯、漏斗等。

(2)抗坏血酸(纯)、2，6－二氯靛酚钠盐、2%草酸、白陶土。①抗坏血酸标准溶液(1mg／mL)：称取100mg(准确至0．1mg)抗坏血酸，溶于2%草酸中并定容至100mL。现配现用。②2，6－二氯靛酚钠(2，6－二氯靛酚吲哚酚钠盐)溶液：称取52g碳酸氢钠(NaHCO₃)溶解在200mL沸水中，然后再称取50mg2，6－二氯靛酚钠溶于上述碳酸氢钠溶液中。冷却定容至250mL，过滤至棕色瓶内，保存在冰箱中。每次使用前，用抗坏血酸标准溶液标定其滴定度。即吸取1mL抗坏血酸标准溶液于50mL三角瓶中，加2%草酸溶液10mL，摇匀，用2，6－二氯靛酚钠溶液滴定至溶液呈粉红色15s不退色为止。同时，另取10mL2%草酸溶液做空白试验。

式中 T——每毫升2，6－二氯靛酚钠溶液相当于抗坏血酸的毫克数

ρ——抗坏血酸的浓度，mg／mL

V——吸取抗坏血酸的体积，mL

V₁——滴定抗坏血酸溶液所用2，6－二氯靛酚钠溶液的体积，mL

V₂——滴定空白所用2，6－二氯靛酚钠溶液的体积，mL

3．操作步骤

(1)样液制备。①新鲜果蔬样品制备：称取具有代表性样品的可食部分100g，放入组织捣碎机中，加2%草酸浸提剂100mL迅速捣成匀浆。称10～40g浆状样品，用2%草酸浸提剂倒入100mL容量瓶中，并用2%草酸溶液稀释至刻度(若有泡沫可加入2滴辛醇除去)，摇匀放置10min过滤。若滤液有色，可按每克样品加0．4g白陶土脱色后再过滤。②多汁果蔬样品制备：如西瓜、葡萄、柑橘等多汁样品，可以通过压汁后，用棉花快速过滤，直接量取10～20mL汁液(含抗坏血酸1～5mg)，立即用2%草酸浸提剂定容至100mL，待测。

(2)测定。吸取5mL或10mL待测液放入100mL三角瓶中，用已标定过的2，6－二氯靛酚钠溶液滴定，直到溶液呈粉红色15s不退色为止。同时做空白试验。

4．结果计算

式中 V——滴定样液时消耗染料溶液的体积，mL

V₀——滴定空白时消耗染料溶液的体积，mL

T——2，6－二氯靛酚钠染料滴定度，mg／mL

A——稀释倍数

m——样品质量g

注：本方法适用于水果、蔬菜及其加工制品中还原型抗坏血酸的测定(不含二价铁、二价锡、一价铜、二氧化硫，亚硫酸盐或硫代硫酸盐)，不适用于深色样品。