细菌的培养法

出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《鸡病诊断技术手册》第95页（1000字）

根据待检材料及培养目的不同，采用不同方法进行培养。

(1)需氧培养法本培养法又称一般培养法，将已接种分离好的平板、斜面，直接置于37℃温箱中培养18－24小时，一般需氧菌、兼性厌氧菌均可于培养基上生长，但难于生长的细菌需培养较长时间。

(2)二氧化碳培养法 二氧化碳培养法是将某些细菌，如嗜血杆菌等，置于二氧化碳环境中进行培养的方法。常用蜡烛法，将接种好的琼脂平板放入磨口标本缸或干燥器内，缸盖及缸口涂以凡士林，取蜡烛一支放在缸内点燃，烛火需距缸口10厘米(勿靠近缸壁，以免烤热缸壁而炸裂)。封密缸盖。当缸内氧气减少，蜡烛自灭，此时缸内约含5%－10%二氧化碳。最后连同容器一并置于37℃温箱培养。

(3)厌氧培养法 厌氧菌生长不需要氧气，当游离氧存在时，能使其死亡，培养厌氧菌时，都应将培养环境或培养基中氧气除去或将氧气型物质还原降低其氧气还原电势。厌氧培养方法很多，常用的有以下几种：

①低亚硫酸钠法。每1000毫升空气用30克低亚硫酸钠(Na₂S₂O₄)和等量的碳酸钠化合时，可将容器中之氧气吸收，反应式如下：

Na₂S₂O₄+Na₂CO₃+O₂→CO₂+Na₂SO₄+Na₂SO₃

具体操作：将已划线接种好的琼脂平板培养基，放在1000毫升磨口标本缸或干燥器内，分别称取低亚硫酸钠和碳酸钠各30克于一个空平皿内，搅拌均匀，滴加少量水后，迅速放入缸内盖好缸盖，缸口四周用胶泥封密，置37℃培养2－4天后观察结果，本法简单，易分得单个菌落。

②疱肉培养基。用于待检材料的增菌培养，也可用于厌氧菌的纯培养和菌种保存。本培养基中的肉渣含有不饱和脂肪酸，能吸收环境中的氧气；肉渣中还含有谷胱甘肽，可发生氧化还原反应，使环境中氧化势能降低；加之培养基的液面用凡士林或液体石蜡封闭使与空气隔绝而造成缺氧环境。利用这种培养基进行培养时，应在接种前将培养基加热沸15－30分钟，取出即放冷水内，以驱除残存于培养基中的氧气。