食品中磷酸及其盐类的测定方法
出处：按学科分类—工业技术 中国轻工业出版社《食品添加剂分析检验手册》第25页（6316字）
化学名：磷酸(Phosphoric Acid)，又名正磷酸
结构式
分子式：H3PO4
相对分子质量：98．00
磷酸盐：
化学名：磷酸二氢钠(Sodium Dihydrogen Phosphate)
结构式
分子式：NaH2PO4
相对分子质量：137．99
一、磷酸二氢钠的鉴别
1．本品的水溶液加碳酸钠即泡沸
2．本品的水溶液显钠盐及磷酸盐的鉴别反应
2．1 取铂丝 用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即显鲜黄色。
2．2 取供试品的中性溶液 加醋酸氧铀锌试液，即生成黄色沉淀。
2．3 取供试品的中性溶液 加硝酸银试液，即生成浅黄色沉淀。分离，沉淀在氨试液或稀硝酸中均易溶解。
2．4 取供试品溶液 加氯化铵镁试液，即生成白色结晶性沉淀。
2．5 钼供试品溶液 加钼酸铵试液与硝酸后，加热即生成黄色沉淀。分离，沉淀能在氨试液中溶解。
二、磷酸二氢钠含量测定
取本品约2．5g，精密称定，加水10mL溶解后，加氯化钠饱和溶液20mL与酚酞指示液2～3滴，用1mol／LNaOH滴定液滴定。每毫升1mol／LNaOH滴定溶液相当于120．0mgNaH2PO4。
化学名：磷酸氢钙(Calcium Phosphate，Dibasic)
见钙盐
化学名：磷酸氢二铵(Ammonium Phosphate，Dibasic)，又名第二磷酸铵
分子式：(NH4)2HPO4
相对分子质量：132．06
化学名：磷酸氢二钾(Potassium Phosphate，Dibasic)，又名第二磷酸钾
分子式：K2HPO4
相对分子质量：174．18
化学名：磷酸二氢钾(Potassium Phosphate，Monobasic)，又名酸性磷酸钾
分子式：KH2PO4
相对分子质量：136．09
化学名：一元磷酸钙(Calcium Phosphate，Monobasic)，又名酸性磷酸钙
分子式：Ca(H2PO4)2·H2O
相对分子质量：252．07
化学名：磷酸钙(Calcium Phosphate，Tribasic)，又名磷酸三钙
分子式：Ca3(PO4)2
相对分子质量：310．18
化学名：磷酸一钠(无水)(Sodium Phosphate，Monobasic anhydrous)，又名第一磷酸钠(无水)
分子式：NaH2PO4
相对分子质量：119．98
化学名：磷酸氢二钠(无水)(Sodium Phosphate，Dibasic anhydrous)，又名第二磷酸钠(无水)
分子式：Na2HPO4
相对分子质量：141．96
化学名：磷酸三钠(无水)(Sodium Phosphate，Tribasic，anhydrous)，又名第三磷酸钠(无水)
分子式：Na3PO4
相对分子质量：163．94
化学名：磷酸二氢铵(Ammonium Phosphate，Monobasic)，又名酸性磷酸铵
分子式：NH4H2PO4
相对分子质量：115．03
化学名：磷酸钾(Potassium Phosphate，Tribasic)，又名第三磷酸钾
分子式：K3PO4·0～3H2O
化学名：磷酸二钠(结晶)(Sodium Phosphate，Dibasic)，又名第二磷酸钠(结晶)
分子式：Na2HPO4·12H2O
相对分子质量：358．14
化学名：磷酸三钠(Sodium Phosphate，Tribasic))，又名第三磷酸钠(结晶)
分子式：Na3PO4·12H2O
相对分子质量：380．14
三、食品中磷酸及其盐类的测定方法
原子吸收法
1．原理
食品中磷酸及其盐类，依原子吸收光谱法测定五氧化二磷来定量。按需要乘以系数分别求出磷酸盐量。由于食品中存在天然的磷酸和磷酸盐，所以测定值应为食品中天然和添加的磷酸(及盐类)总量。
2．试剂和溶液
2．1 氨缓冲液 把0．01mol／LNH3和0．01mol／LNH4Cl混合而调至pH9．3。
2．2 离子交换柱 将40g阴离子交换树脂用湿式法灌入柱内(柱内径1．2cm，长60cm)。
2．3 阴离子交换树脂 售品(例：Dowtx1×4100～200目等)。供各种磷酸测定用。
2．4 氯化铵 优级纯。
2．5 0．01mol／LNH4Cl溶液 在535mg氯化铵中加入1000mL水溶解。
2．6 氯化钾 优级纯。
2．7 氯化钾－氨缓冲液(pH9．3) 在15g氯化钾中加入氨缓冲液1000mL溶解。
2．8 过氯酸60% 优级纯。
2．9 2．5mol／L(HClO4)溶液 于21．3mL过氯酸中加水定容至100mL。
2．10 乙酸丁酯 优级纯。
2．11 三氯醋酸 优级纯。
2．12 钼酸铵 优级纯。
2．13 5%钼酸铵溶液 5g钼酸铵加水100mL溶解。
3．仪器
原子吸收光谱仪。
4．操作步骤
4．1 样品溶液的制备。
4．1．1 液体食品：准确称取样品约10g，加入50mL(1→10)三氯乙酸溶液，搅拌均匀，溶液呈透明无色或者颜色很浅时，加入0．1mol／LNH3液调至pH9．3，作为样品原液。若溶液混浊时，过滤，容器和残留物用40mL(1→10)三氯乙酸液洗涤，合并滤液和洗液，加入0．1mol／LNH3液，调至pH9．3，作为样品原液。若溶液颜色很深时，加入0．1～0．5g活性炭，混匀，过滤，容器和残留物用40mL(1→10)三氯乙酸液洗涤，合并滤液和洗液，加入0．1mol／L NH3，调至pH9．3，作为样品原液。
4．1．2 固体食品：准确称取样品约10g，加入50mL(1→10)三氯乙酸液，搅匀。溶液无色或颜色很淡时，过滤，容器和残留物用40mL(1→10)三氯乙酸洗涤，合并滤液和洗液，加入0．1mol／LNH3，调至pH9．3，作为样品原液。溶液颜色很深时，可加入0．1～0．5g活性炭，混匀，过滤，容器和残留物用40mL(1→10)三氯乙酸液洗涤，合并滤液和洗液，加入0．1mol／LNH3，调至pH9．3，作为样品原液。
4．2 样品液配制 在预先准备好的离子交换柱中用水定量注入样品原液，以1mL／min流速(下同)通过柱后，用100mL氨缓冲液[1]洗涤，再通过200mL氯化钾－氨缓冲液[2]，收集流出液并加热浓缩至约20mL。用水移入25mL容量瓶中，用水定容至25mL。准确吸取该液5mL，放入分液漏斗，准确加入5mL2．5mol／L(HClO4)、2mL5%钼酸铵及10mL醋酸丁酯[3]，激烈振摇，除去水层，分离提取醋酸丁酯层，作为样品液。
4．3 标准溶液配制 准确称取磷酸一钾1．917g，加水溶解，定容至1000mL。准确吸取该液1mL，加水定容至1000mL，作为标准液(该液含五氧化二磷10μg)。准确吸取标准液1mL、2mL、3mL、4mL，放入分液漏斗，分别加水定容至5mL。各准确加入5mL2．5mol／L(HClO4)和2mL5%钼酸液及10mL醋酸丁酯，激烈摇匀。除去水层，分层提取醋酸丁酯层，作为标准曲线用标准液(此液分别含五氧化二磷1μg／mL、2μg／mL、3μg／mL、4μg／mL)。
5．测定方法
5．1 测定条件 原子吸收光谱仪。测定条件如下：
光源：钼空心阴极灯
燃烧炉：缝隙燃烧炉
燃料气：一氧化二氮－乙炔，N2O5L／min；C2H24L／min
测定波长：313．4nm
5．2 标准曲线的制作 分别取标准曲线用标准液，测定原子吸光度，以峰高绘制标准曲线。
5．3 分析结果的表述 取检液测定原子吸光度，测得的峰高由标准曲线上求得样品溶液中五氧化二磷浓度，按式(1－16)计算五氧化二磷含量(g／kg)[4]。
式中 ρ——样品溶液中五氧化二磷浓度，μg／mL
m——样品质量，g
磷酸含量(g／kg)=五氧化二磷含量(g／kg)×1．381
磷酸二氢铵含量(g／kg)=五氧化二磷含量(g／kg)×1．621
磷酸二铵含量(g／kg)=五氧化二磷含量(g／kg)×1．861
磷酸一钾含量(g／kg)=五氧化二磷含量(g／kg)×1．918
磷酸二钾含量(g／kg)=五氧化二磷含量(g／kg)×2．454
磷酸氢钙含量(g／kg)=五氧化二磷含量(g／kg)×1．776
磷酸钙含量(g／kg)=五氧化二磷含量(g／kg)×2．185
磷酸二氢钙含量(结晶)(g／kg)=五氧化二磷含量(g／kg)×2．200
磷酸二氢钠含量(无水)(g／kg)=五氧化二磷含量(g／kg)×1．691
磷酸氢二钠含量(结晶)(g／kg)=五氧化二磷含量(g／kg)×5．046
磷酸氢二钠含量(无水)(g／kg)=五氧化二磷含量(g／kg)×2．000
磷酸三钠含量(结晶)(g／kg)=五氧化二磷含量(g／kg)×5．356
磷酸三钠含量(无水)(g／kg)=五氧化二磷含量(g／kg)×2．310
注：[1]样品中共存的糖、无机盐等，用水洗去除。
[2]本操作中仅流出正磷酸。
[3]水解生成的磷酸和钼酸铵形成络合物，可溶于有机溶剂。
