烟酰胺的测定

出处：按学科分类—工业技术 中国轻工业出版社《食品添加剂分析检验手册》第284页（1778字）

化学名：3－吡啶甲酰胺

又名：尼克酰胺，抗糙皮病维生素，维生素pp

结构式：

分子式：C₆H₆N₂O

相对分子质量：122．13

一、烟酰胺的鉴别

取本品约0．1g，加水5mL溶解后，加氢氧化钠试液5mL，缓缓煮沸，即发生氨臭(与烟酸的区别)。继续加热至氨臭完全除去，放冷，加酚酞指示液1～2滴，用稀硫酸中和，加硫酸铜试液2mL，即缓缓析出淡蓝色的沉淀；滤过，取沉淀炽灼，即发生吡啶的臭气。

取本品，加水制成每1mL中含20μg的溶液，照分光光度法测定，在262nm的波长处有最大吸收峰，在波长245nm处有最小吸收峰，吸光度245nm与吸收度262nm的比值应为0．63～0．67。

二、烟酰胺含量的测定

取本品约0．1g，精密称定，加冰醋酸20mL溶解后，加醋酐5mL与结晶紫指示液1滴，用0．1mol／LHClO₄滴定液滴定至溶液显蓝绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。每毫升0．1mol／LHClO₄滴定液相当于12．2mg烟酰胺(C₆H₆N₂O)。

三、食品中烟酰胺的测定

1．试剂和溶液

1．1 高氯酸 60%，特级。

1．2 高氯酸－甲醇溶液 95mL0．003mol／LHClO₄氯酸溶液中，加5mL甲醇。

1．3 0．003mol／LHClO₄ 0．5mL高氯酸加水成1000mL。

1．4 烟酰胺。

1．5 甲醇 液相色谱用。

2．仪器

Extrelut柱 装有填充剂11g，预先装好，样品前处理用柱。同烟酸测定高压液相色谱法。

3．测定方法

3．1 样品溶液的制备。

3．1．1 液体食品：准确称取相当烟酰胺约0．2～1mg的样品10g以下，放入100mL容量瓶中，加40mI40～50℃水，振摇混匀，放冷，加入50mL0．1mol／LNaOH溶液，混合后加水定容至100mL。准确吸取此液10mL，使其吸附于Extrelut柱中，放置约10min后，用200mL乙酸乙酯洗脱。洗脱液在约60℃水浴上减压蒸干，加入10mL高氯酸－甲醇溶液，在超声波发生器中使残渣溶解，用高氯酸。甲醇溶液定量地转移入20mL容量瓶中，加高氯酸。甲醇溶液准确成20mL。过0．45μm滤膜，滤液作为样品溶液。

3．1．2 固体食品：准确称取相当烟酰胺0．2～1mg的样品2g以下，加30mL40～50℃水均质。加入50mL0．1mol／LNaOH溶液，充分搅拌，定容至100mL，过滤。准确吸取此液10mL，使其吸附于Extrelu柱中，以下操作同液体食品，作为样品溶液。

3．2 测定。 准确吸取样品溶液10mL，注入高压液相色谱仪中，根据所得峰高，在标准曲线上求出样品溶液中的烟酰胺浓度(μg／mL)，按式(9－70)求出样品中烟酰胺的含量(mg／100g)。

4．分析结果的表述

式中 ρ－样品溶液中烟酰胺浓度，μg／mL

m－取样量，g