免疫学诊断
出处：按学科分类—农业科学 中国轻工业出版社《肉类工业手册》第799页（1742字）
1．原理
本反应是一种单向扩散法，即以相应动物的特异蛋白(血清)作抗原接种家兔，然后分离兔的血清即特异抗体。用这种已知的抗血清测未知的肉样浸出液(抗原)。凡能在10min以内以1∶1000的稀释度与同源抗原呈现显着沉淀反应的抗血清的，即认为是适用的。
2．器材
(1)灭菌剪刀，镊子，电炉，琼扩打扎器，恒温箱。
(2)锥形瓶(250mL)，玻璃小漏斗，吸管(2mL)，毛细管，载玻片，中性滤纸。
3．试剂
(1)欲测动物的蛋白原沉淀素血清。
(2)灭菌生理盐水，硝酸(相对密度1．2)，琼扩反应用琼脂平板。
4．操作方法
(1)待检肉浸出液的制备 将除去脂肪和结缔组织的肌肉剪碎，按1∶10的比例放入灭菌生理盐水内，浸泡1～3h，不断搅拌，将浸出液通过两层滤纸或石棉过滤。按下述方法测定其稀释度；于1mL的浸出液内加入1滴相对密度1．2的硝酸，并煮沸之，如出现轻度乳白色，证明其中含有1∶1000的蛋白质，说明适于反应之用。如发生混浊或沉淀，证明蛋白质含量高于1∶300，应作适当稀释。若无乳白色而完全透明，则说明其中含蛋白质过少，须将盐水的比例减少(1．5～3)，重新制造浸出液。如果肉浸出液呈蔷薇色，则应将其置于70℃水浴上加热30min后过滤之。
(2)反应方法
①沉淀管法：取沉淀小试管，分别加入0．1mL特异沉淀素血清(勿使产生气泡)，用毛细吸管取得等量检肉浸出液，沿管壁徐徐流下重叠于各管的血清层上，在室温下静置15～30min后，对光观察结果。呈阳性者于两液面之间出现白色沉淀轮环。然后振摇混合，于次日检查管底有无沉淀。
②平板法：在载玻片上置数滴特异血清，并放入恒温箱内干燥(载玻片可放于干燥处长期保存)。进行检验时，将数滴透明抗原(肉浸液)加在干燥的血清上，用玻璃棒搅拌，此后将玻片放入湿饭盒内(用湿纱布垫在盒底即可)，置于37℃温箱中30min，取出后，在300倍显微镜下观察。阳性反应可见混浊的云雾层物。
琼扩反应
1．原理
本反应是一种双相扩散，不仅能检测单一肉种，还能同时与有关抗原作比较，便于分析混合肉样的抗原成分，比单相扩散更为敏感。琼扩反应在形成沉淀线以后不再扩散，并可保存作为永久性记录。
2．器材、试剂
同沉淀反应法。
3．操作方法
(1)待检肉浸出液的制备 同沉淀反应法。
(2)反应方法 在直径为9cm的琼脂平板上打孔，中间一个孔，周围6个孔，孔间距离为4mm，孔直径为4mm。将制备好的被检肉浸出液，分别注入外周的5个孔内，第6个孔注入已知肉浸出液作为阳性对照，中央孔加入已知特异性抗血清。每次加样时，均以刚好加满为宜。加样完毕后，将琼脂平板置于盛有湿纱布带盖搪瓷盘或其它密闭容器内，放入25℃恒温箱或15℃室温下让其扩散。点样后8～72h内观察结果。阳性反应：在中央孔和外周孔之间形成一白色沉淀线。