促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH)

出处:按学科分类—工业技术 企业管理出版社《精细化学品制备手册》第311页(1383字)

制法

提取LH和FSH共有2种方法。即从垂体中提取和从绝经期妇女促性腺激素(HMG)精品中分离。这里主要介绍从猪垂体中提取LH和FSH。

(1)原料处理 猪宰杀后,将垂体完整取出(垂体多可先洗净,干燥后粉碎成粉状,放入冰箱保存备用),投入丙酮中,浸泡24h再更换丙酮,共换3次以上,至垂体变硬为止。然后细心剥离,分出前叶,置瓷盘中于干燥箱中干燥,然后磨粉,过40目筛,水分应低于6%。

(2)提取 将前叶干粉倒入搪瓷缸中,加入10倍质量的提取液(6份10%乙酸铵溶液加5份95%乙醇,用乙酸溶液调节pH值至5.1),在搅拌条件下,提取10h左右,然后用离心机分离,收集离心液。残渣再用5倍质量上述提取液提取1次,合并两次离心液。

(3)沉淀 将离心液移入陶瓷缸中,在搅拌下缓慢加入-10~-15℃的95%乙醇,用酒精比重计测量至乙醇浓度达76%~80%,于40℃以下放置2d,然后滤出乙醇液(回收乙醇)。用吊布吊干沉淀,用冷的95%乙醇洗2次,抽干后立即真空干燥,得类白色全激素干粉(收率6%~7%)。

(4)分离LH和FSH 将干粉溶于20倍质量的0.1mol/L硫酸铵溶液中,然后补加固体硫酸铵至1.25mol/L,弃去沉淀。上清液用8%的氢氧化钠调节pH值为7.2~7.5,在搅拌下缓慢加入硫酸铵粉末至2.0mol/L,静置后分离,上清液为FSH,沉淀为LH。

(5)LH的制备 将沉淀溶于10质量倍蒸馏水中(pH值为7.4~7.5),用新配制的5%偏磷酸调节pH值至4.2,用离心机除去催乳激素等沉淀,立即将离心液调节pH值至7.4~7.5,加硫酸铵到7kg,静置过夜。然后收集沉淀物。将沉淀物按湿状态时的质量溶于1~1.5倍蒸馏水中,倒入透析袋中透析过夜,除去硫酸铵,最后倒出透析液,冷冻干燥,即得LH产品。

(6)FSH的制备 将(4)中的上清液用6%左右的盐酸调节pH值至5.0,补加硫酸铵7kg,静置过夜。然后收集沉淀物,按湿状态时的质量加入1~1.5倍的蒸馏水,使沉淀物完全溶解,装入透析袋中透析过夜,最后将透析液冷冻干燥,即得FSH产品。产品保存在-20℃的冰箱中。

LH生物活性测定采用雄性大白前腺叶增重法。

FSH生物活物测定采用雌幼大白鼠卵巢增重法。

促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH)都是由脑垂体前叶分泌的激素,它们都由α、β两条肽链组成,α、β链都由氨基酸残基构成。在临床上LH和FSH用途广泛,可治疗妇女的不孕症、多囊卵巢病和男性精子减少症,广泛应用于治疗习惯性流产和性机能障碍。在畜牧水产业上用于治疗家畜不妊娠,提高受胎率及淡水养催情繁殖。

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