弹性蛋白酶(从猪胰脏中提取)
出处:按学科分类—工业技术 企业管理出版社《精细化学品制备手册》第320页(893字)
制法
(1)绞碎 取配方量的新鲜或冷冻胰脏,剪去脂肪组织,冲洗干净,切成小块,用绞肉机绞成胰糜,放入提取缸中。
(2)激活 往提取缸中加入少量氯化钙及胰酶悬浊液(含钙离子),用8%氢氧化钠溶液调节pH值至7.5~8.0,搅拌均匀,在20℃条件下搅拌激活2h。
(3)提取 往激活的胰糜中加入8倍体积的0.1mol/L、pH值4.5的乙酸缓冲液,在25℃搅拌提取2h,然后将粗提取液用80目尼龙筛网过滤,弃去残渣,收集滤液。
(4)吸附 将滤液移入搪瓷桶中,加入质量分数5%左右的经0.1mol/L、pH值4.5的乙酸缓冲液平衡过的Dialon Wklos弱酸性阳离子树脂,搅拌吸附4~6h(保持20℃左右),然后过滤除去滤液,收集吸附树脂,用水洗至洗出液变清为止。
(5)洗脱 将树脂放在另一搪瓷桶中,加入1.5倍体积的1.0mol/L、pH值7.5的乙酸铵缓冲液,搅拌洗脱1h,然后过滤收集洗脱液,树脂可再生后重新使用。
(6)沉淀 往洗脱液中加入3.5倍体积的预冷至10℃以下的丙酮,搅拌均匀,静置过夜,然后滤除丙酮液(回收丙酮),分出沉淀。
(7)干燥 将沉淀物分别用丙酮、乙醚各洗2次,干燥,即得弹性蛋白酶干粉。
得到的弹性蛋白酶或弹性酶又称胰肽酶E,它的功效在于可阻止主动脉和冠状动脉斑块形成,降低血清胆固醇,具有降压、扩张血管、增加心肌血流量和提高血中CAMP(环腺嘌呤单核甘酸)含量的作用。临床上用于治疗高脂血症,防止脂肪肝和动脉粥样硬化,对老年慢性支气管炎及硅肺等症亦有较好的临床效果。