菠萝蛋白酶(从菠萝皮中提取)

出处:按学科分类—工业技术 企业管理出版社《精细化学品制备手册》第324页(1432字)

制法

(1)高岭土吸附法

①压榨 把加工菠萝削下的新鲜菠萝皮按配方量洗净,用压榨机压出汁液,然后按汁液体积加入0.05%的苯甲酸钠防腐剂,置4℃冰箱或冷库中保存备用。

②吸附 将汁液移入搪瓷缸中,搅拌下加入质量分数4%的白陶土(即高岭土),在10℃左右吸附30min,然后静置过夜。次日吸去上层清液,收集下层白陶土吸附物。

③洗脱 在白陶土吸附物中加入7%氢氧化钠溶液,调节pH值至7.0左右,再加入吸附物质量分数50%的硫酸铵粉末,搅拌40min进行洗脱,然后压滤,弃去杂物,收集滤液。

④盐析 将压滤液收集到搪瓷桶中,用1∶3(质量比)的盐酸(即1kg浓盐酸加3kg水),调节pH值至5.0左右,搅拌下加入压滤液质量25%的硫酸铵粉末,待硫酸铵完全溶解后,置4℃过夜,于离心机上分出上层清液,收集下层盐析物,即得粗品。

⑤溶解 将粗品放入另一搪瓷桶中,加入10倍质量的自来水,用16%的氢氧化钠溶液调节pH值至7.0~7.5,搅拌使其溶解,然后过滤,除去杂质,收集滤液。

⑥沉淀干燥 在搅拌下用1∶3的盐酸调节上述滤液的pH值至4.0,然后静置使酶析出,于离心机上分出沉淀物,弃去离心液,沉淀冷冻干燥,即得菠萝酶精品。

(2)鞣酸吸附法

①压榨 将菠萝去皮,收集菠萝茎,切成小块用压榨机压出汁液。

②去杂质 将汁液移入搪瓷缸中,搅拌下加入汁液质量10%的固体氯化钠,然后置10℃条件下放13h左右,过滤分出滤液。残渣加入等体积水后,用柠檬酸调节pH值至4.5左右(先加10%固体氯化钠),搅拌均匀,浸泡40min,过滤分离出滤液(合并两次滤液)。

③沉淀 将澄清液移入搪瓷桶中,在搅拌条件下,按澄清液体积加入0.05%乙二胺四乙酸二钠盐、0.06%的二氧化硫、0.02%的维生素C(做稳定剂),及0.6%左右的鞣酸,放置4℃条件下静置,于离心机上分出沉淀物,弃去上清液。

④洗脱、干燥 将沉淀物放入搪瓷桶中,加入2~3倍体积的pH值4.5的维生素C溶液,搅拌洗脱40min,然后过滤,收集滤液,减压干燥,即得菠萝蛋白酶精品。

菠萝蛋白酶是一种蛋白质水解酶,呈无定形粉末,微有异臭,略溶于水,不溶于乙醇、丙酮、氯仿、乙醚。酶粉剂在冰箱中存放1年活力下降25%。该酶毒性较低,在生物体中具有溶解纤维蛋白及血凝块的作用。临床上用于治疗一些炎症,能迅速溶痂,对正常组织无害,不影响植皮,性质稳定,使用方便,适用于中小面积深度烧伤的治疗。制成的小儿复方菠萝酶片,对急慢性支气管炎、哮喘、多痰顽咳、百日咳、慢性支气管炎合并肺气肿等病症,均疗效明显。

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