热力灭菌效果的监测方法

出处：按学科分类—医药、卫生 广西师范大学出版社《医院临床消毒实用手册》第73页（2581字）

一、压力蒸气灭菌效果监测方法

1．化学检测法

(1)化学指示管(卡)监测法：将既能指示蒸气温度，又能指示温度持续时间的化学指示管(卡)放入大包和难以消毒部位的物品包中央，经一个灭菌周期后，取出指示管(卡)，根据其颜色及性状的改变判断是否达到灭菌条件。

(2)化学指示胶带监测法：将化学指示胶带粘贴于每一待灭菌物品包外，经一个灭菌周期后，观察其颜色的改变，以指示是否经过灭菌处理。

对预真空和脉动真空压力蒸气灭菌，每日进行一次B-D试验。

(3)结果判定：检测时，所放置的指示卡(管)、胶带的性状或颜色均变至规定的条件，判为灭菌合格；若其中之一未达到规定的条件，则灭菌过程不合格。

(4)注意事项：监测所用化学指示物须经卫生部批准，并在有效期内使用。

2．生物检测法

(1)指示菌株：指示菌株为耐热的嗜热脂肪杆菌芽孢(ATCC7953或SSIK31株)，菌片含菌量为5．0×10⁵cfu／片～5．0×10⁶cfu／片。

(2)检测方法：将两个嗜热脂肪杆菌芽孢菌片分别装入灭菌小纸袋内，置于标准试验包中心部位。

在下排气压力蒸气灭菌器灭菌柜室内，排气口上方放置一个标准试验包(由3件平纹长袖手术衣，4块小手术巾，2块中手术巾，1块大毛巾，30块10cm× 10cm8层纱布敷料包裹成25cm×30cm×30cm大小)；预真空和脉动真空压力蒸气灭菌器灭菌柜室内，排气口上方放置一个标准测试包(16条全棉手术巾每条41cm×66cm，将每条手术巾的长边先折成3层，短边折成2层，然后叠放，做成23cm×23cm×15cm大小的测试包)；手提压力蒸气灭菌器用通气贮物盒(22cm×13cm×6cm)代替标准试验包，盒内盛满中试管，指示菌片放于中心部位的两只灭菌试管内(试管口用灭菌牛皮纸包封)，将贮物盒平放于手提压力蒸气灭菌器底部。

经一个灭菌周期后，在无菌条件下，取出标准试验包或通气贮物盒中的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中，经56℃±1℃培养7d(自含式生物指示物按说明书执行)，观察培养基颜色变化。检测时设阴性对照和阳性对照。

(3)结果判定：每个指示菌片接种的溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基都不变色，判定为灭菌合格；指示菌片之一接种的溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基，由紫色变为黄色时，则灭菌过程不合格。

(4)注意事项：监测所用菌片须经卫生部认可，并在有效期内使用。生物指示物监测应一月一次。

3．物理检测法(热电偶检测法)

一般新式压力蒸气灭菌器都带有热电偶和温度记录仪。

检测方法：同干热灭菌效果监测方法中热电偶检测法。

二、干热灭菌效果监测方法

1．化学检测法

(1)检测方法：将既能指示温度，又能指示温度持续时间的化学指示卡(管)3～5个分别放入待灭菌的物品中，并置于灭菌器最难达到灭菌的部位，经过一个灭菌周期后，取出化学指示卡(管)，根据其颜色及性状的改变判断是否达到灭菌条件。

(2)结果判定：检测时，所放置的指示卡(管)的颜色及性状均变至规定的条件，则判为达到灭菌条件；若其中之一未达到规定的条件，则判为未达到灭菌条件。

(3)注意事项：检测所用的化学指示剂需经卫生部认可，并在有效期内使用。

2．物理检测法(热电偶检测法)

(1)检测方法：检测时，将多点温度检测仪的多个探头分别放于灭菌器各层内、中、外各点。关好柜门，将导线引出，由记录仪中观察温度上升与持续时间。

(2)结果判定：若所示温度(曲线)达到预置温度，则灭菌温度合格。

3．生物检测法

(1)指示菌株：枯草杆菌黑色变种芽孢(ATCC9372)，菌片含菌量为5．0×10⁵cfu／片～5．0×10⁶cfu／片。

(2)检测方法：将枯草杆菌芽孢菌片分别装入灭菌中试管内(1片／管)。灭菌器与每层门把手对角线内外角处放置两个含菌片的试管，试管帽置于试管旁，关好柜门，经一个灭菌周期后，待温度降至80℃时，加盖试管帽后取出试管。在无菌条件下，加入普通营养肉汤培养基(5mL／管)，以36℃±1℃培养48h，观察初步结果，无菌生长管继续培养至第七日。

(3)结果判定：若每个指示菌片接种的肉汤管均为澄清，判为灭菌合格；若指示菌片之一接种的肉汤管混浊，判为不合格。对难以判定的肉汤管，取0．1mL接种于营养琼脂平板，用灭菌L棒涂匀，以36℃±1℃培养48h，观察菌落形态，并做涂片染色镜检，判断是否有指示菌生长。若有指示菌生长，判为灭菌不合格；若无指示菌生长，判为灭菌合格。

(4)注意事项：检测所用的指示菌片需经卫生部认可，并在有效期内使用。