孢子繁殖技术

出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《花卉育苗技术手册》第279页（2293字）

(一)孢子的采集及贮藏 大多数蕨类植物的孢子在夏末到秋天成熟，少数蕨类全年产生孢子。孢子一般从叶下部往上部逐渐成熟，因此宜采收叶片中下部的孢子，同时还要选择在无灰尘脏物的干净叶片上采集。对珍稀种类或抽生叶片少的也可用刀刮下孢子囊。剪下叶片保存于温暖干燥的环境中，孢子很快会脱落下来。

采收的孢子一般应尽快播种，因为它们的寿命多数很短，绿色孢子约2～3天，也有少数的可达3～6个月。非绿色孢子寿命长，但发芽率、发芽势均随着时间的延长而降低。如不能及时播种，放在4℃冰箱中冷藏，可大大延长孢子的寿命。

(二)孢子的去杂及消毒 将脱落的孢子倒入对折的纸槽中，把纸轻轻倾斜，大的碎片比孢子移动快，杂质和孢子逐渐分离。有条件的用100～150目细筛筛，筛出的就是孢子，它比上面的方法好。

将选出的孢子用一小块滤纸包成1厘米²大小的小包，用线扎紧，放入5%的次氯酸钠或次氯酸钙溶液中消毒5～10分钟，然后用无菌水冲洗1～2次。对于还有孢子没扩散的叶片可放入次氯酸钠溶液中消毒，取出干燥后再收集孢子。或用70%酒精浸15～30秒，完全浸润后立即取出放入0．1%升汞水溶液中消毒3分钟，用无菌水洗4～5次，在无菌培养皿中小心打开滤纸包准备播种。

(三)孢子有土育苗技术 一般用2份泥炭土和1份素沙混配播种床土，或腐叶土6份、壤土2份、河沙2份。上述物质均需过细筛，蒸汽灭菌30分钟以上，然后装入灭菌的容器中，如瓦盆、育苗盘等。为刺激孢子萌发，一般播种前用50毫克／升的赤霉素溶液处理15分钟，已处理的用喷壶喷在基质上。没处理的撒播，播后不盖土，用平板玻璃盖上。一般每平方厘米播3000个左右孢子较适宜。

播后控温24～25℃，播种初期一般保持10天左右黑暗以利孢子萌发。之后每天光照12小时，光照度控制在2000～5000勒克斯，多数种类2000勒克斯，空气相对湿度80%以上。多数蕨类约经1个月的培养，孢子萌发并长出幼小的配子体，也叫原叶体。如果配子体太密应移植。接着长成扁平心脏形或带状的配子体，在配子体的腹部长出颈卵器和精子器，每天喷雾2次，连续1周，精子借水游动出来与卵结合形成合子。受精卵经过多次分裂形成胚，胚是幼孢子体的雏形，初期附在配子体上，靠吸收配子体的养料生活，当幼孢子体长出次生根和2～3片幼叶时，幼苗开始独立生活，配子体相应枯萎。从播种到长出第1片真叶一般需2～3个月，个别品种需8～18个月，如乌毛蕨需12～18个月。幼孢子体过密的分成若干小块，分别栽于与播种同样的培养土上，仍保持较高湿度。当叶片长3～5厘米、具4～8片叶时，经炼苗后可定植容器中。

孢子萌发是有土育苗成功的关键，萌发的成功与否对于非专业人员来说也是非常不可预见的。萌发的关键是湿度，往往湿度不够。但水分过多又会引起腐烂及霉菌的产生。所以孢子有土育苗要精心管理，细致操作，反复摸索经验。

(四)孢子培养基育苗技术 用1／2MS(铁用量不变)加0．25%～0．5%粉末状活性炭培养基，或其他培养基。也可用下述配方配制培养基：硝酸钙1克、磷酸二氢钾0．25克、七水硫酸镁0．25克、氯化钾0．12克、三氯化铁12．5毫克、硼酸2．86毫克、氯化锌0．22毫克、五水硫酸铜0．08毫克、钼酸0．02毫克、氯化锰0．08毫克、琼脂8克、蒸馏水1000毫升，pH5．5～6。

将经消毒的培养基倒入已消毒的120毫米的培养皿中，然后将已消毒的孢子均匀播在上面。播后可将培养皿放在光线充足、通风良好的窗台附近。有条件的控温21～25℃，光照12～16小时，光照度500～1000勒克斯。1个月后，每隔7天加入适量的完全营养液，供配子体发育需要。播后5～6天孢子开始萌发，大部分萌发需8～20天，种类之间差别甚大。经过一段时间形成配子体，一般播后32～48天，在配子体腹面产生精子器，约43～65天产生颈卵器，种类之间差异较大。在一次的培养材料中精子器、颈卵器出现的时间可持续1～2个月，1个配子体约有精子器15个以上。受精后颈卵器一般为褐色。自受精后约30～45天，幼孢子体的第1片子叶肉眼可见。随着幼孢子体的不断生长，长出2～3片幼小的真叶，根数增多，茎初步出现，但极短，配子体逐渐衰老死亡。

对于特殊的蕨类需特殊处理，如国家一级保护植物桫椤孢子有近1年的休眠期，据中国科学院昆明植物研究所程治英研究，需用50毫克／升的赤霉素处理2～5分钟打破休眠，琼脂用量为0．5%，培养基用1／10MS，糖的浓度越低萌发率越高，葡萄糖优于蔗糖，连续黑暗孢子也不萌发。使用1／10MS加2%～5%蔗糖，加1毫克／升动力精和0．4毫克／升2，4－D有利苗的生长。

(五)自播苗利用技术 产生孢子的蕨类植物，当其孢子散落后，如果遇到合适的环境条件，会自行繁殖，形成新的植株。在挖取时，剪去老叶，留新的嫩叶，用湿的报纸或布包裹，运回上盆栽植。如果长途运输，用水藓包好装箱。挖野生苗繁殖带原苗产地土壤栽培最易成活。