组织培养技术

出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《花卉育苗技术手册》第283页（757字）

外植体使用茎尖或极幼嫩的叶，这些材料非常幼嫩，在表面消毒时消毒剂的浓度不宜太大，时间不宜太长。将外植体在70%酒精中快速浸蘸，然后立即放在0．01%～0．05%的升汞溶液或2%的次氯酸钠溶液中消毒3～5分钟，然后用无菌水冲洗3～5次。

培养基用MS加170～200毫克／升的磷酸二氢钠。如生长不理想，可只用MS或减量的MS，如还不理想，可试用B₅、Knudson、Nistch等培养基。培养基加1～5毫克／升的6－苄基腺嘌呤或动力精。

将外植体植于培养基上，控制温度23℃左右，分化阶段光照度500～1000勒克斯，苗生长阶段提高光照度，约2000勒克斯左右，一般不超过3000勒克斯，光照时间12～16小时。

试管苗的生长和生根可用1／2MS加0．5%～1%粉末状活性炭的琼脂培养基，蔗糖浓度1%～2%。当试管苗长到3～4厘米以上时移栽到经消毒清洁的细河沙中。移栽前要洗净琼脂。河沙要过细筛，可用纱窗布制作筛子。沙洗净后用50%多菌灵可湿性粉1000倍液浸泡1天，再用清水彻底洗去多菌灵药液。移栽后用玻璃或塑料薄膜覆盖。开始在培养室中进行，或直接在荫蔽的温室中进行。幼苗生长早期用0．1%的尿素和磷酸二氢钾溶液作根外追肥，逐渐增加见光量。

上面介绍的方法不一定适合每一种蕨类，试验时应根据具体情况作修改，组织培养时可查阅具体种类适宜的培养方法。这方面文献很多，如桫椤、二叉鹿角蕨、苹果蕨、镰叶肾蕨、茎立鹿角蕨、波斯顿蕨等都有组织培养成功的文献，限于篇幅本书不作具体介绍。