滤纸片扩散法

出处:按学科分类—农业科学 中国农业出版社《兽医微生物实验诊断手册》第126页(781字)

一、滤纸片的准备

选用优质滤纸(如新华1号定性滤纸),用5号或6号铅字涂以黑色油墨,印上药物名称,再用打孔机打成直径为6mm的圆纸片,各数100片为一组放入试管中,121℃20min灭菌,烘干。

二、药液的配制

常用药物的配制方法及所用浓度(表8-5)。

表8-5 药物滤纸片的制备及含药浓度

注:干燥抗菌药物滤纸片有商品供应(上海医学化验所)。测定联合药敏试验的滤纸条需自制。

三、含药滤纸片的制备

将灭菌滤纸片用无菌镊子摊布于灭菌平皿中,每100片加药液1ml,不时翻动,使滤纸片将药液均匀吸净,于37℃温箱中烘干,时间不宜过长,以免某些抗菌药失效。贮于青霉素小瓶中,置冷暗干燥处保存。

四、培养基选择

同试管稀释法(将液体培养基制成固体培养基即成)。

五、菌液准备

同试管稀释法(但原液不再进行稀释)。

六、试验方法

1.用无菌棉拭,沾取少量菌液,均匀涂布于合适的平板培养基上;待稍干后,用无菌镊子将各种药敏纸片分别平贴在平板培养基表面,每一平板大约可贴4~6种药敏纸片,纸片之间应保持一定距离。

2.置37℃培养8~12h,观察结果。

七、结果观察和报告

观察药敏纸片周围有无抑菌圈,用透明尺或卡尺量取抑菌圈直径(包括滤纸片)大小,参照表8-6,报告试验菌对药物的敏感度。

表8-6 各种抗菌药物的抑菌圈与敏感标准

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