费朗西斯氏菌属

出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《兽医微生物实验诊断手册》第350页（1938字）

本属细菌多形，在患病动物体内近似球状，在培养物中则呈球状、豆状、杆状等，大小0．2×0．2～0．7μm(土拉费朗西斯氏菌)或0．7×1．7μm(新杀费朗西斯氏菌)，有时成丝状。偶尔有小球状体能通过滤器。革兰氏阴性，无芽孢，无鞭毛，姬姆萨或美蓝可染成两极着色。需氧，普通培养基上不长，需要胱氨酸或半胱氨酸，接触酶弱阳性，氧化酶阴性，发酵碳水化物缓慢只产酸。两个种，土拉费朗西斯氏菌(F．tularensis)及多杀费朗西斯氏菌(F．novicida)。

土拉费朗西斯氏菌在普通培养基上不生长，需要胱氨酸或半胱氨酸。既含胱氨酸又含血液的培养基最好常用的培养基是胱氨酸-葡萄糖-血液琼脂，初次分离生长较慢，常需2～5天，形成细小、透明、粘性菌落。能发酵葡萄糖、麦芽糖、甘露糖、果糖、产酸不产气，但不发酵蔗糖，依此可与新杀费朗西斯氏菌区别。

本菌在自然界的主要宿主是野兔和其他啮齿动物如田鼠、水鼠、麝香鼠等，这些动物既是家畜和人的传染源，又是传递者，有自然疫源性，主要通过节肢动物，特别是蜱和虻等叮咬而传播，动物进入自然疫源地被蜱叮咬后发生感染。

1．样品采集 淋巴结、肝、脾的病灶，血，节肢动物。

2．荧光抗体技术将病变组织制成压印片，固定，用荧光标记抗体进行直接染色，镜检。

3．细菌分离，将病料接种于胱氨酸-葡萄糖血液琼脂，接种量要多，然后将培养基放入烛缸中37℃培养2～3天后，长成小的灰白色透明或半透明粘性菌落，挑取可疑菌落检查形态、生化反应，用血清凝集反应进行鉴定。

4．动物试验 脏器做成悬液，对豚鼠(或小白鼠)进行皮下注射或腹腔注射后，豚鼠常于4～14日死亡。可见接种部位发炎，全身淋巴结肿大，脾、肝、肺等可见白色小结节，脾常肿大。采取血液和病理组织分离细菌。

血清学和变态反应诊断 家畜发病后第二周，血清的凝集滴度显着升高且长期保持。采取可疑病畜病初与病后的血清与土拉费朗西斯氏菌做凝集试验，如凝集滴度升高，可诊断为本病。采血清作凝集反应可用于畜群的普检。本菌与布氏杆菌有共同抗原成分，凝集试验时可能发生交叉反应，但本菌抗原与布氏菌抗体凝集价很低，相差2～4倍，可以区别，如与变态反应同时进行、则可以提高诊断的准确性。

以土拉费朗西斯氏杆菌素，于动物尾根皱褶作皮内注射，剂量0．3ml，于注射后24h观察结果一次。阳性者有局部发红、弥漫性肿胀、皮肤紧结或疼痛等症状。但有一小部分病畜可不发生反应。

本菌特点在形态上多形且很细小，在生长上必需要胱氨酸或半胱氨酸。

本属有两个种，土拉费朗西斯氏菌(有两个生物型)及新杀费朗西斯氏。后者系从疫区水中分得，人工能使小白鼠、豚鼠感染，无天然病例的报道，见表13-9。

表13-9 弗朗西斯氏菌的种和型

注：糖发酵培养基中及其他生化培养基中均需加胱氨酸或半胱氨酸0．1%。

胱氨酸葡萄糖血液琼脂制法如下。

将灭菌过并已融解的营养琼脂100ml，置100℃水浴锅中，加入胱氨酸0．1g、葡萄糖1g，混匀并使之融解，维持100℃达1h，冷却至45℃，加入无菌脱纤维蛋白兔血8ml，维持在60℃水浴锅中达2h，倾注平皿或分装到试管，待凝固好后，置37℃温箱培养24h，取无菌者用。

此培养基供费朗西斯氏菌分离、生长用。

蛋白胨葡萄糖半胱氨酸琼脂制法如下。

将蛋白胨2g、氯化钠1g、葡萄糖0．1g、半胱氨酸0．1g溶于100ml水中，调pH至6．8，加入琼脂，煮沸1h(琼脂应彻底融好)，冷至45℃，倾注平皿或分装试管，37℃培养24h以检查是否有污染。无菌者可供费朗西斯氏菌用。

在冷至45℃时加入8ml无菌脱纤兔血，即成营养更好的蛋白胨葡萄糖半胱氨酸血液琼脂。